Ιός ηπατίτιδας Α

Η ιική ηπατίτιδα Α είναι μια ανθρώπινη μολυσματική ασθένεια που χαρακτηρίζεται από κυρίαρχη ηπατική βλάβη και εκδηλώνεται με κλινική δηλητηρίαση και ίκτερο. Ο ιός της ηπατίτιδας Α ανιχνεύθηκε το 1973 από τον S. Feinstone (και άλλους) χρησιμοποιώντας τη μέθοδο της μικροσκοπίας του ανοσοποιητικού ηλεκτρονίου και μολύνοντας πιθήκους - χιμπατζήδες και μαρμόζες. Η μέθοδος μικροσκοπίας ανοσοποιητικό ηλεκτρονίων είναι ότι τα περιττώματα στο διήθημα προστέθηκε ηπατίτιδας Α ασθενής ειδικό αντίσωμα (αναρρωνύοντα ορού) και το ίζημα υποβλήθηκε σε μικροσκοπία ηλεκτρονίων. Λόγω της αλληλεπίδρασης των ιών με ειδικά αντισώματα, υφίστανται ειδική συσσωμάτωση. Στην περίπτωση αυτή, είναι ευκολότερο να ανιχνευθούν και η συσσωμάτωση υπό την επίδραση των αντισωμάτων επιβεβαιώνει την ιδιαιτερότητα του παθογόνου. Η ανακάλυψη του S. Feinstone επιβεβαιώθηκε σε πειράματα σε εθελοντές.

Ο ιός ηπατίτιδας Α έχει σφαιρικό σχήμα, η διάμετρος του ιού είναι 27 nm. Το γονιδίωμα αντιπροσωπεύεται από μονόκλωνο θετικό RNA με μάζα 2,6 MD. Το υπερκασψίδιο απουσιάζει. Ο τύπος συμμετρίας είναι κυβικός - εικοσαμέδρος. Το καψίδιο έχει 32 καψομερή, σχηματίζεται από τέσσερα πολυπεπτίδια (VP1-VP4). Με τις ιδιότητές του, ο ιός της ηπατίτιδας Α ανήκει στο γένος Heparnovirus, την οικογένεια Picornaviridae. Αντιγονικά, ο ιός της ηπατίτιδας Α (HAV - ιός ηπατίτιδας Α) είναι ομοιογενής. Το HAV πολλαπλασιάζεται καλά στο σώμα των χιμπατζήδων, μπαμπουίνων, hamadryls και πιθήκων τυχερών παιχνιδιών (marmosets). Για πολύ καιρό, ο ιός δεν μπορούσε να καλλιεργηθεί. Μόνο στη δεκαετία του '80. ήταν δυνατόν να ληφθούν κυτταρικές καλλιέργειες στις οποίες διαδίδεται το ΗΑν. που χρησιμοποιήθηκε αρχικά για τους σκοπούς αυτούς, αθανατοποιημένες εμβρυϊκή νεφρική κυτταρική σειρά ρέζους μακάκους (καλλιέργεια FRhK-4), και τώρα - μεταμοσχευμένου νεφρού κυτταρική γραμμή πράσινου πιθήκου (Culture 4647).

Σύμφωνα με τις συστάσεις των εμπειρογνωμόνων της ΠΟΥ, υιοθέτησε την ακόλουθη ονοματολογία της ηπατίτιδας Α δεικτών ιού: ιό της ηπατίτιδας Α - οι NAU αντισώματα του ιού της ηπατίτιδας Α: αντι-HAV IgM και αντι-HAV IgG.

Το HAV είναι μικρά σωματίδια με διάμετρο 27-30 nm, με εικοσαεδρική συμμετρία και με ομοιογένεια. Στο περίγραμμα διάθλασης ηλεκτρονίων που λαμβάνεται με τη μέθοδο της ανοσολογικής συσσωμάτωσης, ανιχνεύονται ηλεκτρονικά πυκνά σωματίδια με επιφανειακά τοποθετημένα συμμετρικά διατεταγμένα καψομερή. Με αρνητικές αντιθέσεις, εντοπίζονται τόσο τα πλήρη όσο και τα κενά σωματίδια στα παρασκευάσματα. Το νουκλεοκαψίδιο NAV, σε αντίθεση με εκείνο της γρίπης, δεν έχει επιφανειακές προεξοχές και μεμβράνες. Είναι επίσης σημαντικό το βιριόν HAV να μην έχει δομή σε σχήμα καρδιάς.

Σύμφωνα με φυσικές-χημικές ιδιότητες του ιού ηπατίτιδας Α σχετίζεται με την οικογένεια των Picornaviridae, γένους εντεροϊό με ατομικό αριθμό 72. Ωστόσο, αυτή η ταξινόμηση ήταν πολύ ασυνήθιστο, και ο οποίος βρήκε τη δυνατότητα να αφήσει την ορολογία «ιό της ηπατίτιδας Α».

Όπως όλοι οι ιοί της οικογένειας Picornaviridae, ο ιός της ηπατίτιδας Α περιέχει ριβονουκλεϊνικό οξύ. Ορισμένα εργαστήρια έχουν δείξει τη δυνατότητα κλωνοποίησης του γονιδιώματος του ιού της ηπατίτιδας Α, πράγμα που ανοίγει την προοπτική λήψης παρασκευασμάτων εμβολίων.

[1], [2], [3], [4], [5], [6], [7],

Αντοχή του ιού της ηπατίτιδας Α

Ο ιός είναι σχετικά ανθεκτικός στις υψηλές θερμοκρασίες, τα οξέα, τους λιπώδεις διαλύτες (δεν υπάρχουν λιπίδια), τα απολυμαντικά, αντέχει σε χαμηλή θερμοκρασία. Όλα αυτά συμβάλλουν στη μακροπρόθεσμη διατήρηση του στο εξωτερικό περιβάλλον. Σε θερμοκρασία δωματίου, επιβιώνει για αρκετές εβδομάδες, στους 60 ° C χάνει εν μέρει μολυσματικότητα μετά από 4-12 ώρες, εντελώς - μετά από μερικά λεπτά στους 85 ° C. Εξαιρετικά ανθεκτικό στο χλώριο, λόγω του οποίου είναι σε θέση να διεισδύσει στο νερό της βρύσης μέσω των φραγμάτων των μονάδων επεξεργασίας νερού.

Συνοψίζοντας όλα τα δεδομένα, μπορούμε να χαρακτηρίσουμε τον ιό της ηπατίτιδας Α ως εξής:

• ο φυσικός κύριος είναι ο άνθρωπος.
• πειραματόζωα - μαρμαζέτ, χιμπατζή.
• πηγή μόλυνσης - κόπρανα.
• ασθένεια - επιδημία και ενδημική;
• η οδός μετάδοσης είναι κοπτική-από του στόματος.
• περίοδος επώασης - 14-40 ημέρες.
• μετάβαση στη χρόνια ηπατίτιδα - δεν σημειώνεται.

Οι ανοσολογικές ιδιότητες του NAV έχουν ως εξής:

• Πρωτότυπα στελέχη - Ms-1, CR-326, GVG. Όλα είναι ανοσολογικά παρόμοια ή ταυτόσημα.
• Τα αντισώματα IgM και IgG παράγονται ως απόκριση στην εισαγωγή δομικών πρωτεϊνών του ιού και είναι προστατευτικά.
• Η τροφική δράση της γ-σφαιρίνης στον ανθρώπινο ορό - προστατεύει ή εξασθενεί την ασθένεια υπό την προϋπόθεση χορήγησης πριν από τη μόλυνση ή κατά τη διάρκεια της περιόδου επώασης.

Τα φυσικοχημικά χαρακτηριστικά του NAU είναι τα εξής:

• Η μορφολογία είναι ένα σφαιρικό σωματίδιο μη κελύφους με κυβική συμμετρία, το καψίδιο αποτελείται από 32 καψομερή.
• Η διάμετρος είναι 27-30 nm.
• SsS1 Πυκνότητα (g / cm3) - 1,38-1,46 (ανοικτή σωματίδια), 1,33-1,34 (ώριμο ιοσωμάτιο), 1.29 - 1.31 (ανώριμα ιοσωμάτια, κενά σωματίδια)?
• Ο συντελεστής καθίζησης είναι 156-160 ώριμα βιριόνια.
• Νουκλεϊκό οξύ - μονόκλωνο, γραμμικό RNA.
• Σχετικό μοριακό βάρος - 2,25 106-2,8 106KD.
• Ο αριθμός των νουκλεοτιδίων είναι 6.500-8.100.

Η σταθερότητα της NAV στις φυσικοχημικές επιδράσεις έχει ως εξής:

• Χλωροφόρμιο, αιθέρας - είναι σταθερός.
• Χλωρίδιο, 0,5-1,5 mg / l, 5 ° C, 15 λεπτά - μερική αδρανοποίηση.
• Χλωραμίνη, 1 g / l, 20 ° C, 15 λεπτά - πλήρης απενεργοποίηση.
• Φορμαλίνη, 1: 4000, 35-37 ° C, 72 ώρες - πλήρης απενεργοποίηση, 1: 350, 20 ° C, 60 λεπτά - μερική αδρανοποίηση.

Θερμοκρασία:

• 20-70 ° C - σταθερό.
• 56 ° C, 30 λεπτά - είναι σταθερό.
• 60 ° С, 12 ώρες - μερική αδρανοποίηση.
• 85 ° C, 1 λεπτό - πλήρης απενεργοποίηση.
• Αυτόκλειστο, 120 ° C. 20 λεπτά - πλήρης απενεργοποίηση.
• Ξηρή θερμότητα, 180 ° C, 1 ώρα - πλήρης απενεργοποίηση.
• UV, 1,1 W, 1 λεπτό - πλήρης απενεργοποίηση.

Τα δεδομένα που παρουσιάζονται δείχνουν ότι οι φυσικοχημικές ιδιότητες του ιού της ηπατίτιδας Α είναι οι πλησιέστερες στους εντεροϊούς. Όπως και άλλοι εντεροϊοί, το ΗΑν είναι ανθεκτικό σε πολλά απολυμαντικά διαλύματα, πλήρως αδρανοποιημένο για μερικά λεπτά στους 85 ° C και σε αυτόκαυστο.

Αποδεικνύεται ότι ο ιός της ηπατίτιδας Α μπορεί να αναπαραχθεί σε πρωτεύουσες και μεταμοσχευμένες γραμμές καλλιέργειας μονοστοιβάδας κυττάρων ανθρώπου και μαϊμού. Ιδιαίτερα δραστική αναπαραγωγή του ιού της ηπατίτιδας Α σε καλλιέργειες in vitro παρατηρείται όταν χρησιμοποιούνται εκχυλίσματα ήπατος από ασθενείς πιθήκων ως αρχικό υλικό. Ωστόσο, θα πρέπει να σημειωθεί ότι σε όλα τα πειράματα σύμφωνα με μια αναπαραγωγή του ιού ηπατίτιδας Α σε in vitro καλλιέργειες αξιοσημείωτο μακρά περίοδο επώασης σε πρωτογενείς διόδους (-10 έως 4 εβδομάδες), στη συνέχεια συσσώρευση ιικών αυξήσεις γενετικού υλικού, αλλά οι απόλυτες τιμές είναι πολύ ασήμαντο, γεγονός που δίνει τη δυνατότητα σε πολλούς ερευνητές να μιλήσουν για ελλιπή αναπαραγωγή του ιού της ηπατίτιδας Α σε καλλιέργειες ιστών.

Συνοψίζοντας τα στοιχεία της βιβλιογραφίας σχετικά με την αναπαραγωγή του ιού της ηπατίτιδας Α από καλλιέργειες μη ριζών, μπορεί να ειπωθεί ότι το γεγονός της παρατεταμένης εμπειρίας του HAV in vitro είναι αναμφισβήτητο. Οι βέλτιστες συνθήκες για ένα σταθερό υψηλό επίπεδο ιικής αντιγραφής δεν έχουν τελικά προσδιοριστεί και αυτό περιορίζει τη μελέτη των βιολογικών ιδιοτήτων του, την παραγωγή πηγής αντιδραστηρίων για την παραγωγή διαγνωστικών και το σχεδιασμό εμβολίων.

Ταυτόχρονα, πιο αισιόδοξες κρίσεις σχετικά με αυτό το πρόβλημα μπορούν να βρεθούν στη βιβλιογραφία. Η λύση όλων των ζητημάτων που σχετίζονται με την καλλιέργεια του ιού της ηπατίτιδας Α είναι θέμα για το εγγύς μέλλον. Κατά τη μελέτη οι βέλτιστες συνθήκες HAV πολλαπλασιασμού σε καλλιέργεια κυττάρων εμβρυϊκού νεφρού πιθήκων ρέζους αποκάλυψε δύο φάσεις: η φάση της παραγωγής μολυσματικού ιού (μέχρι 6-8 ημέρες στην 5η δίοδο) και τη φάση της εντατικής συσσώρευσης του ιικού αντιγόνου. Δείχνεται επίσης ότι η πιο σημαντική συσσώρευση του ιικού αντιγόνου συμβαίνει υπό τις συνθήκες της αποκαλούμενης καλλιέργειας κυλίνδρων (περιστρεφόμενες φιάλες). Με αυτό τον τρόπο ανοίγει τη δυνατότητα απόκτησης ενός καλλιέργειας του αντιγόνου σε μεγάλες ποσότητες, και κατά συνέπεια θα αρχικό υλικό για την παρασκευή των διαγνωστικών συστημάτων και παραγωγή παρασκευασμάτων εμβολίου.

Επιδημιολογία της ηπατίτιδας Α

Ο ιός της ηπατίτιδας Α έχει υψηλή παθογονικότητα για τον άνθρωπο. Σύμφωνα με το συμπέρασμα της WHO (1987), για την εμφάνιση της νόσου αρκεί να μολυνθεί μόνο ένα βιριόν. Ωστόσο, η πρακτική λοιμώδης δόση είναι πιθανώς πολύ υψηλότερη. Η πηγή μόλυνσης είναι μόνο μολυσμένο άτομο. Ο ιός απελευθερώνεται σε μεγάλες ποσότητες με περιττώματα 12-14 ημέρες πριν από την εμφάνιση του ίκτερου και μέσα σε 3 εβδομάδες. ετερόρρυθμη περίοδο. Δεν έχουν εντοπιστεί σημαντικές διαφορές στην απομόνωση του παθογόνου παράγοντα σε ασθενείς με ictric, ίκτερο και ασυμπτωματικές μορφές ηπατίτιδας Α. Η μέθοδος της λοίμωξης είναι κοπράνων - από του στόματος, κυρίως υδατικών, αλλά και από τις οδούς των νοικοκυριών και των τροφίμων. Η μέθοδος της λοίμωξης είναι κοπράνων - από του στόματος, κυρίως υδατικών, αλλά και από τις οδούς των νοικοκυριών και των τροφίμων. Η κύρια (πρωτεύουσα) οδός μετάδοσης του ιού είναι το νερό. Είναι επίσης δυνατή η αερομεταφερόμενη μόλυνση. Η ευαισθησία του πληθυσμού είναι καθολική. Τα παιδιά ηλικίας κάτω των 14 ετών είναι άρρωστα. Η νόσος έχει έντονη εποχικότητα το φθινόπωρο και το χειμώνα.

[8], [9], [10], [11], [12], [13], [14], [15]

Τα συμπτώματα της ηπατίτιδας Α

Η περίοδος επώασης κυμαίνεται από 15 έως 50 ημέρες, ανάλογα με το μέγεθος της δόσης μολυσματικού ιού, αλλά κατά μέσο όρο 28-30 ημερών. Μόλις στο σώμα, ιό της ηπατίτιδας Α αναδιπλασιάζεται στους τοπικούς λεμφαδένες, στο αίμα και στη συνέχεια στα κύτταρα του ήπατος και προκαλεί διάχυτη οξεία ηπατίτιδα που συνοδεύεται από αλλοιώσεις των ηπατοκυττάρων του ήπατος και δικτυοενδοθηλιακά κύτταρα και μία μείωση σε λειτουργίες αποτοξίνωσης και φραγμού της. Η βλάβη στα ηπατοκύτταρα δεν οφείλεται στην άμεση δράση του ιού, αλλά ως αποτέλεσμα των ανοσοπαθολογικών μηχανισμών. Το πιο χαρακτηριστικό εικόνα της ηπατίτιδας Α είναι οξεία ικτερική κυκλική μορφή: η περίοδος επώασης, η πρόδρομη (preicteric), ίκτερος και η περίοδος ανάρρωσης. Ωστόσο, στην εστίες μόλυνσης αποκαλύπτει ένα μεγάλο αριθμό ασθενών με ασυμπτωματική και anicteric μορφές μόλυνσης, ο αριθμός των οποίων υπερισχύει ικτερική ( «φαινόμενο παγόβουνου»).

Η μετα-λοιμώδης ανοσία είναι ισχυρή και διαρκής, προκαλούμενη από αντισώματα εξουδετέρωσης του ιού και κύτταρα ανοσοποιητικής μνήμης.

Μικροβιολογική διάγνωση της ηπατίτιδας Α

Διάγνωση της ηπατίτιδας Α (με εξαίρεση τα ζώα μόλυνση - χιμπατζήδες marmozet, μπαμπουίνους, που έχουμε) με βάση διάφορες ανοσολογικές μεθόδους: DGC μέθοδο ανοσοφθορισμού, αιμοσυγκόλλησης άνοσο πρόσφυσης (σύμπλοκο ιικού αντιγόνου + αντισώματος σε παρουσία συμπληρώματος προσροφάται επί ερυθροκυττάρων και προκαλεί την προσκόλληση τους) . Ωστόσο, η εφαρμοσιμότητα αυτών των μεθόδων είναι περιορισμένη λόγω της έλλειψης συγκεκριμένων ιικών αντιγόνων και αντίδραση ανοσοφθορισμού απαιτεί βιοψίες ήπατος, το οποίο είναι ανεπιθύμητο. Αξιόπιστη και συγκεκριμένη είναι η μέθοδος της μικροσκοπίας του ανοσοποιητικού ηλεκτρονίου, αλλά είναι πολύ επίπονη. Ως εκ τούτου, μέχρι η μόνη αποδεκτή μέθοδος για την ανοσολογική αντίδραση είναι ανοσορροφητική δοκιμασία στερεάς φάσης, με τη μορφή της IPM, ή RIM, ειδικά στην τροποποίηση της «ενσωμάτωσης» της ανοσοσφαιρίνης Μ Στη χώρα μας για το σκοπό που προτείνει αυτό το σύστημα εξέτασης - «DIAG-Α-GEO». Η αρχή λειτουργίας αυτού του συστήματος δοκιμών έχει ως εξής. Στους τοίχους του πολυστυρενίου lunochek απορροφάται πρώτα αντισώματα προς ανοσοσφαιρίνες της κατηγορίας Μ (antiimmunoglobuliny Μ) στη συνέχεια προστίθεται στο ορό διερευνηθεί ασθενούς. Αν υπάρχει τάξη αντίσωμα IgM, θα συνδέονται προς ένα αντίσωμα-Ti-Μ, στη συνέχεια προστέθηκε σε ένα συγκεκριμένο ιικό αντιγόνο (του ιού της ηπατίτιδας Α), η οποία λαμβάνεται δι 'αναπτύξεως σε καλλιέργεια κυττάρων. Το σύστημα πλένεται και προστίθενται αντι-ιικά αντισώματα επισημασμένα με υπεροξειδάση αγριοραπανίδας. Εάν αλληλεπιδράσουν και τα τέσσερα στοιχεία του συστήματος, προκύπτει ένα "σάντουιτς" τεσσάρων επιπέδων:

• αντι-ανοσοσφαιρίνες Μ,
• ανοσοσφαιρίνες Μ (έναντι ιού ηπατίτιδας Α - στον ορό δοκιμασίας του ασθενούς),
• ιικό αντιγόνο,
• αντιϊκά αντισώματα επισημασμένα με ένα ένζυμο.

Για την ανίχνευση αυτού του συμπλόκου, ένα υπόστρωμα για το ένζυμο προστίθεται στις φακές. Υπό την επίδραση του ενζύμου, καταστρέφεται και σχηματίζεται ένα έγχρωμο προϊόν. Η ένταση του χρώματος μπορεί να μετρηθεί ποσοτικά με φασματοφωτόμετρο ή φωτοχρωματομετρητή.

Το πλεονέκτημα της μεθόδου "σύλληψης" IgM είναι ότι αντισώματα αυτής της κατηγορίας ανοσοσφαιρινών εμφανίζονται στην πρωταρχική ανοσοαπόκριση και δείχνουν ένα ενεργό στάδιο μόλυνσης, εξαφανίζονται μετά την μεταφερόμενη ασθένεια. Αντι-ιικά αντισώματα που ανήκουν στην κατηγορία των IgG, αντίθετα, παραμένουν για μεγάλο χρονικό διάστημα μετά την ασθένεια, παρέχοντας την επίκτητη ανοσία. Για την ανίχνευση του ιού της ηπατίτιδας Α, έχει προταθεί μέθοδος ανίχνευσης ϋΝΑ: ένα συμπληρωματικό vRNA χρησιμοποιείται ως DNA ανιχνευτής.

Θεραπεία της ηπατίτιδας Α

Λόγω του γεγονότος ότι η παραγωγή ιντερφερόνης διακόπτεται στην ιική ηπατίτιδα, η θεραπεία της ηπατίτιδας Α βασίζεται στη χρήση ιντερφερόνης και επαγωγέα της ενδογενούς σύνθεσης αμιξίνης.

Ειδική πρόληψη της ηπατίτιδας Α

Προηγουμένως εφαρμόζεται ευρέως seroprevention ηπατίτιδας Α χρησιμοποιώντας γάμμα σφαιρίνη δεν δικαιολογείται, ωστόσο, η έμφαση δόθηκε στην ανοσοποίηση εκμετάλλευση, διενεργείται εμβολιασμός κατά της ηπατίτιδας Α. Για το σκοπό αυτό, αναπτύσσονται και χρησιμοποιούνται ήδη διάφορες παραλλαγές εμβολίων. Στη Ρωσία, ένα αποτελεσματικό εμβόλιο κατά της ηπατίτιδας Α ελήφθη το 1995 και τώρα εφαρμόστηκε με επιτυχία.