Ανοσολογικές μελέτες στην ουρολογία

Η συνταγογράφηση ενός ανοσοδιαγράμματος σε έναν ουρολογικό ασθενή σημαίνει ότι ο θεράπων ιατρός υποψιάζεται την παρουσία διαταραχών στο ανοσοποιητικό σύστημα. Υποτροπιάζουσες βακτηριακές, ιογενείς, μυκητιασικές λοιμώξεις, αλλεργικές εκδηλώσεις, συστηματικές ασθένειες μπορεί να είναι σημάδια αυτών των διαταραχών, οι οποίες χαρακτηρίζονται από μια σειρά συνδρόμων (λοιμώδη, ογκολογικά, αλλεργικά, αυτοάνοσα, λεμφοϋπερπλαστικά). Ένας ασθενής μπορεί να έχει πολλά σύνδρομα. Για παράδειγμα, οι χρόνιες μολυσματικές ασθένειες (λοιμώδες σύνδρομο) μπορούν να προκαλέσουν ανοσοανεπάρκεια και η ανοσοανεπάρκεια μπορεί να εκδηλωθεί ως προδιάθεση για μολυσματικές και ογκολογικές ασθένειες (ογκολογικό σύνδρομο). Η προδιάθεση για λοιμώξεις μπορεί να εμφανιστεί στο πλαίσιο δευτερογενούς ανοσοανεπάρκειας, η οποία αναπτύχθηκε ως αποτέλεσμα μιας λεμφοϋπερπλαστικής ασθένειας, όπως η λευχαιμία. Υπάρχουν τρεις κύριες ομάδες παθολογικών αλλαγών στο ανοσοποιητικό σύστημα:

• ποσοτική ή λειτουργική ανεπάρκεια ενός ή του άλλου συνδέσμου του ανοσοποιητικού συστήματος, η οποία οδηγεί στην ανάπτυξη κατάστασης ανοσοανεπάρκειας.
• μια διαταραχή στην αναγνώριση αντιγόνων από το ανοσοποιητικό σύστημα, που οδηγεί στην ανάπτυξη αυτοάνοσων διεργασιών.
• μια υπεραντιδραστική ή «διεστραμμένη» ανοσοαπόκριση, που εκδηλώνεται με την ανάπτυξη αλλεργικών ασθενειών.

Υπάρχουν μέθοδοι ανοσοδιαγνωστικής διαλογής (δοκιμές επιπέδου 1) και διευκρίνισης (δοκιμές επιπέδου 2). Οι πρώτες υπάρχουν για την καταγραφή διαταραχών στο ανοσοποιητικό σύστημα, οι δεύτερες - για τον καθορισμό των μηχανισμών που εμπλέκονται στην εφαρμογή τους με σκοπό την περαιτέρω ανοσοδιόρθωση.

Β-κυττάρων ανοσία

Μέθοδοι διαλογής

• Προσδιορισμός του σχετικού και απόλυτου αριθμού των Β-λεμφοκυττάρων με ανοσοφθορισμό ή κυτταροφθορομετρία ροής με μονοκλωνικά αντισώματα έναντι αντιγόνων Β-κυττάρων (CD19, CD20, όπου CD είναι συστάδες διαφοροποίησης). Η φυσιολογική περιεκτικότητα των Β-λεμφοκυττάρων σε ενήλικες είναι 8-19% του συνολικού αριθμού λευκοκυττάρων ή 190-380 κύτταρα/μl. Αύξηση της περιεκτικότητας των Β-λεμφοκυττάρων παρατηρείται σε οξείες και χρόνιες βακτηριακές και μυκητιασικές λοιμώξεις, χρόνιες ηπατικές παθήσεις, συστηματικές παθήσεις του συνδετικού ιστού, χρόνια λεμφοκυτταρική λευχαιμία και μυέλωμα.
• Προσδιορισμός της συγκέντρωσης μη ειδικών ανοσοσφαιρινών (F, M, G, E) με απλή ακτινική ανοσοδιάχυση, νεφελομετρία ή στροβιλομετρία, ραδιοανοσοδοκιμασία ή ενζυμική ανοσοδοκιμασία (ELISA). Κανόνες για ενήλικες: ανοσοσφαιρίνη (Ig) A 0,9-4,5 g / l. IgM 0,3-3,7 g / l. IgG 8,0-17 g / l. Αύξηση της συγκέντρωσης ανοσοσφαιρινών εμφανίζεται στις ίδιες παθολογικές καταστάσεις στις οποίες εμφανίζεται αύξηση της περιεκτικότητας σε Β-λεμφοκύτταρα. Μείωση της συγκέντρωσης ανοσοσφαιρινών εμφανίζεται σε συγγενή υπογαμμασφαιριναιμία, νεοπλάσματα του ανοσοποιητικού συστήματος, αφαίρεση σπλήνα, απώλεια πρωτεΐνης, νεφρικές ή εντερικές παθήσεις, θεραπεία με κυτταροστατικά και ανοσοκατασταλτικά.

Μέθοδοι διευκρίνισης

• Προσδιορισμός των κυκλοφορούντων ανοσοσυμπλεγμάτων στο αίμα με επιλεκτική καθίζηση σε πολυαιθυλενογλυκόλη ακολουθούμενη από φασματοφωτομετρική δοκιμή πυκνότητας (φυσιολογική τιμή 80-20 U). Η αύξηση των κυκλοφορούντων ανοσοσυμπλεγμάτων είναι τυπική για οξείες βακτηριακές, μυκητιακές, ιογενείς λοιμώξεις, αυτοάνοσες λοιμώξεις, ανοσολογικές παθήσεις, ορονοσία, αλλεργικές αντιδράσεις τύπου 3.
• Προσδιορισμός ειδικών ανοσοσφαιρινών στο αίμα σε σχέση με βακτηριακά και ιικά αντιγόνα, δεοξυριβονουκλεϊκό οξύ (DNA) σε αυτοάνοσα νοσήματα, ανίχνευση αντισπερμικών (αυτοάνοση υπογονιμότητα) και αντινεφρικών αντισωμάτων (πυελονεφρίτιδα και σπειραματονεφρίτιδα) με τη μέθοδο ακτινικής ανοσοδιάχυσης ή ELISA.
• Προσδιορισμός αντισπερματικών αντισωμάτων στο σπέρμα [MAR test (μικτή αντίδραση αντισφαιρίνης)], φυσιολογικό - αρνητικό αποτέλεσμα.
• Προσδιορισμός της συγκέντρωσης ανοσοσφαιρινών στα ούρα για τον σκοπό της διαφορικής διάγνωσης μεταξύ πυελονεφρίτιδας και σπειραματονεφρίτιδας (επιλεκτικότητα της πρωτεϊνουρίας).
• Προσδιορισμός της περιεκτικότητας σε IgE στο υγρό του προστάτη για τη διάγνωση της αλλεργικής προστατίτιδας χρησιμοποιώντας τη μέθοδο ακτινικής ανοσοδιάχυσης ή ELISA.
• Μελέτη της απόκρισης στην αντίδραση μετασχηματισμού βλαστών Β-λεμφοκυττάρων στο μιτογόνο Β-κυττάρων (μιτογόνο φυτοφαρμάκου για την διέγερση της αντίδρασης μετασχηματισμού βλαστών Β-λεμφοκυττάρων παρουσία Τ-λεμφοκυττάρων), η κανονιστική τιμή της οποίας είναι 95-100%.

Σύνδεση ανοσίας με Τ-λεμφοκύτταρα

Μέθοδοι διαλογής

• Προσδιορισμός του σχετικού και απόλυτου αριθμού ώριμων CD3 Τ-λεμφοκυττάρων με αντίδραση ανοσοφθορισμού ή κυτταροφθορομετρία ροής χρησιμοποιώντας μονοκλωνικά αντισώματα κατά του CD3. Ο κανόνας για τους ενήλικες είναι 58-76% ή 1100-1700 κύτταρα/μl. Η μείωση του αριθμού των Τ-λεμφοκυττάρων αποτελεί ένδειξη ανεπάρκειας της κυτταρικής σύνδεσης της ανοσίας. Αυτό είναι χαρακτηριστικό για ορισμένες δευτερογενείς και πρωτοπαθείς ανοσοανεπάρκειες (χρόνιες βακτηριακές και ιογενείς λοιμώξεις: φυματίωση, σύνδρομο επίκτητης ανοσοανεπάρκειας, κακοήθεις όγκοι, χρόνια νεφρική ανεπάρκεια, τραυματισμοί, στρες, γήρανση, υποσιτισμός, θεραπεία με κυτταροστατικά, έκθεση σε ιονίζουσα ακτινοβολία). Η αύξηση του αριθμού των Τ-λεμφοκυττάρων συμβαίνει στο πλαίσιο ανοσολογικής υπερδραστηριότητας ή σε λεμφοϋπερπλαστικές ασθένειες. Με τη φλεγμονή, ο αριθμός των Τ-λεμφοκυττάρων πρώτα αυξάνεται και στη συνέχεια μειώνεται. Η απουσία μείωσης των Τ-λεμφοκυττάρων υποδηλώνει μια χρόνια φλεγμονώδη διαδικασία.
• Αξιολόγηση υποπληθυσμών λεμφοκυττάρων.
  • Προσδιορισμός του αριθμού των Τ-βοηθητικών λεμφοκυττάρων (αντισώματα κατά του CD4). Κανονικά 36-55% ή 400-1100 κύτταρα/mcl. Αύξηση του αριθμού αυτών των κυττάρων παρατηρείται σε αυτοάνοσα νοσήματα, νόσο του Waldenstrom, ενεργοποίηση της αντιμεταμοσχευτικής ανοσίας. Μείωση του αριθμού των Τ-βοηθητικών λεμφοκυττάρων παρατηρείται σε χρόνιες βακτηριακές, ιογενείς, πρωτόζωες λοιμώξεις, φυματίωση, σύνδρομο επίκτητης ανοσοανεπάρκειας, κακοήθεις όγκους, εγκαύματα, τραυματισμούς, υποσιτισμό, γήρανση, θεραπεία με κυτταροστατικά, έκθεση σε ιονίζουσα ακτινοβολία.
  • Προσδιορισμός του αριθμού των Τ-κατασταλτών (αντισώματα κατά του CD4). Κανονικά 17-37% ή 300-700 κύτταρα/μl. Η αύξηση του αριθμού των Τ-κατασταλτών συμβαίνει στις ίδιες συνθήκες υπό τις οποίες μειώνεται ο αριθμός των Τ-βοηθητικών, και η μείωσή τους συμβαίνει στις ίδιες συνθήκες υπό τις οποίες αυξάνεται η περιεκτικότητα σε Τ-βοηθητικά.
  • Ανοσορυθμιστικός δείκτης CD4/CD8, κανονικά 1,5-2,5. Υπερδραστηριότητα με τιμές άνω του 2,5 (αλλεργικές και αυτοάνοσες ασθένειες). υποδραστηριότητα - μικρότερη από 1,0 (προδιάθεση για χρόνιες λοιμώξεις). Στην αρχή της φλεγμονώδους διαδικασίας, ο ανοσορυθμιστικός δείκτης αυξάνεται και όταν υποχωρεί, ομαλοποιείται.

Μέθοδοι διευκρίνισης

• Προσδιορισμός του αριθμού των φυσικών φονικών κυττάρων (κύτταρα NK) - αντισώματα κατά του CD16 και του CD56. Ο κανόνας για τα λεμφοκύτταρα CD 16 είναι 6-26%, CD56 - 9-19%. Αύξηση του αριθμού των κυττάρων NK παρατηρείται κατά την απόρριψη μοσχεύματος, μείωση - με ιογενείς λοιμώξεις, καρκίνο, πρωτοπαθείς και δευτερογενείς ανοσοανεπάρκειες, εγκαύματα, τραυματισμούς και στρες, θεραπεία με κυτταροστατικά και έκθεση σε ιονίζουσα ακτινοβολία.
• Προσδιορισμός του αριθμού των Τ-λεμφοκυττάρων με υποδοχέα στην ιντερλευκίνη-2 (δείκτης ενεργοποίησης) - αντισώματα κατά του CD25. Ο κανόνας είναι 10-15%. Αύξηση του αριθμού τους παρατηρείται σε αλλεργικές παθήσεις, απόρριψη μοσχεύματος, απόκριση σε αντιγόνα που εξαρτώνται από τον θύμο αδένα στην οξεία περίοδο της πρωτοπαθούς μόλυνσης, μείωση - στις ίδιες ασθένειες στις οποίες υπάρχει μείωση του αριθμού των ΝΚ κυττάρων.
• Μελέτη της έκφρασης του δείκτη ενεργοποίησης - μορίου ιστοσυμβατότητας τάξης II HLA-DR. Αυξημένη έκφραση εμφανίζεται σε φλεγμονώδεις διεργασίες, σε ασθενείς με ηπατίτιδα C, κοιλιοκάκη, σύφιλη, οξείες αναπνευστικές παθήσεις.
• Αξιολόγηση της απόπτωσης των λεμφοκυττάρων. Μια γενική ιδέα για την ετοιμότητα των λεμφοκυττάρων για απόπτωση μπορεί να προσδιοριστεί από την έκφραση του υποδοχέα Fas (CD95) στην επιφάνειά τους και του πρωτοογκογονιδίου bd-2 στα μιτοχόνδρια. Η απόπτωση των λεμφοκυττάρων αξιολογείται με την επεξεργασία τους με δύο φθορίζουσες χρωστικές: ιωδιούχο προπίδιο, το οποίο συνδέεται με θραύσματα DNA, και ανεξίνη Υ, η οποία συνδέεται με φωσφατιδυλοσερίνη, η οποία εμφανίζεται στην κυτταρική μεμβράνη κατά την έναρξη της απόπτωσης. Τα αποτελέσματα αξιολογούνται χρησιμοποιώντας κυτταροφθορόμετρο ροής. Τα αποτελέσματα υπολογίζονται με βάση την αναλογία των κυττάρων που έχουν χρωματιστεί με διαφορετικές χρωστικές. Τα μη χρωματισμένα κύτταρα είναι βιώσιμα, τα κύτταρα που συνδέονται μόνο με την ανεξίνη Υ είναι πρώιμες εκδηλώσεις απόπτωσης, με ιωδιούχο προπίδιο και ανεξίνη Υ είναι όψιμες εκδηλώσεις απόπτωσης, η χρώση μόνο με ιωδιούχο προπίδιο υποδηλώνει νέκρωση.
• Αξιολόγηση του πολλαπλασιασμού των Τ-λεμφοκυττάρων in vitro.
  • Αλλαγές στην κυτταρική βλαστογένεση - αντίδραση μετασχηματισμού βλαστών λεμφοκυττάρων. Τα λευκοκύτταρα επωάζονται με οποιοδήποτε μιτογόνο φυτικής προέλευσης (λεκτίνες). Η φυτοαιμαγλουτινίνη χρησιμοποιείται συχνότερα για 72 ώρες, στη συνέχεια λαμβάνεται επίχρισμα, χρωματίζεται και μετράται ο αριθμός των βλαστών! Ο δείκτης διέγερσης είναι η αναλογία του ποσοστού των μετασχηματισμένων κυττάρων στο πείραμα (καλλιέργεια με φυτοαιμαγλουτινίνη) προς το ποσοστό των μετασχηματισμένων κυττάρων στον έλεγχο (καλλιέργεια χωρίς φυτοαιμαγλουτινίνη). Η αντίδραση μετασχηματισμού βλαστών λεμφοκυττάρων μπορεί να αξιολογηθεί με την συμπερίληψη μιας ραδιενεργού ετικέτας (ZN-θυμνδίνη) στα καλλιεργημένα κύτταρα, καθώς η σύνθεση DNA αυξάνεται κατά την κυτταρική διαίρεση. Διαταραχές στην πολλαπλασιαστική απόκριση εμφανίζονται τόσο σε πρωτοπαθείς όσο και σε δευτεροπαθείς ανοσοανεπάρκειες που σχετίζονται με λοιμώξεις, καρκίνο, νεφρική ανεπάρκεια και χειρουργικές επεμβάσεις.
  • Σε αυτές τις μελέτες, αξιολογείται η έκφραση δεικτών ενεργοποίησης (CD25, υποδοχέας τρανσφερίνης - CD71) και το μόριο του μείζονος συμπλέγματος ιστοσυμβατότητας κατηγορίας II HLA-DR, τα οποία πρακτικά απουσιάζουν από τα ηρεμούντα Τ-λεμφοκύτταρα. Τα Τ-λεμφοκύτταρα διεγείρονται με φυτοαιμαγλουτινίνη, μετά από 3 ημέρες η έκφραση των δεικτών ενεργοποίησης αναλύεται με τη μέθοδο άμεσης ή έμμεσης αντίδρασης ανοσοφθορισμού, κυτταροφθορομετρία ροής, χρησιμοποιώντας μονοκλωνικά αντισώματα στους απομονωμένους υποδοχείς.
  • Μέτρηση της ποσότητας των μεσολαβητών που συντίθενται από ενεργοποιημένα Τ-λεμφοκύτταρα [ιντερλευκίνη (IL) 2, IL-4, IL-5, IL-6, γ-ιντερφερόνη, κ.λπ.] χρησιμοποιώντας ραδιοανοσοδοκιμασία ή ELISA. Ιδιαίτερη σημασία έχει η αξιολόγηση της συγκέντρωσης γ-ιντερφερόνης και IL-4 ως δεικτών Th1 και Th2 στο υπερκείμενο των ενεργοποιημένων καλλιεργειών και μέσα στο κύτταρο. Εάν είναι δυνατόν, είναι χρήσιμο να προσδιοριστεί η γονιδιακή έκφραση για την αντίστοιχη κυτοκίνη από το επίπεδο του ριβονουκλεϊκού οξέος της μήτρας στο κύτταρο παραγωγό και την ένταση έκφρασης των υποδοχέων για τις αντίστοιχες κυτοκίνες.
    
• Αντίδραση αναστολής μετανάστευσης λεμφοκυττάρων. Τα ευαισθητοποιημένα Τ-λεμφοκύτταρα σε αντίδραση με το αντιγόνο εκκρίνουν λεμφοκίνες, συμπεριλαμβανομένων παραγόντων που αναστέλλουν τη μετανάστευση λεμφοκυττάρων. Το φαινόμενο αναστολής παρατηρείται όταν εισάγονται μιτογόνα στην κυτταροκαλλιέργεια. Η αξιολόγηση του βαθμού αναστολής μας επιτρέπει να κρίνουμε την ικανότητα των λεμφοκυττάρων να εκκρίνουν κυτοκίνες. Κανονικά, η συχνότητα μετανάστευσης, ανάλογα με το συγκεκριμένο μιτογόνο, είναι 20-80%.
• Αξιολόγηση της κυτταροτοξικότητας των κυττάρων NK. Προσδιορίζεται η ικανότητα των φυσικών κυττάρων φονέων να σκοτώνουν τα κύτταρα-στόχους της ερυθρομυελοειδούς σειράς K-562. Εάν αξιολογηθεί η εξαρτώμενη από αντισώματα κυτταροτοξικότητα, χρησιμοποιούνται κύτταρα-στόχοι επικαλυμμένα με αντισώματα IgG. Τα κύτταρα-στόχοι επισημαίνονται με 3H-ουριδίνη και επωάζονται με κύτταρα-τελεστές. Ο θάνατος των κυττάρων-στόχων αξιολογείται με την απελευθέρωση της ραδιενεργού ετικέτας στο διάλυμα. Μείωση της κυτταροτοξικότητας παρατηρείται σε κακοήθη νεοπλάσματα. Σε ορισμένες περιπτώσεις, όταν είναι απαραίτητο να προβλεφθεί η αποτελεσματικότητα της θεραπείας με ιντερλευκίνες, η κυτταροτοξικότητα των κυττάρων NK αξιολογείται κατά την επώαση με ορισμένες κυτοκίνες.

Μελέτη της λειτουργίας των φαγοκυττάρων

Μέθοδοι διαλογής

Μελέτη της έντασης απορρόφησης μικροβιακών κυττάρων από φαγοκύτταρα (φαγοκυττάρωση σωματιδίων λάτεξ, δοκιμαστική καλλιέργεια σταφυλόκοκκου, E. coli ή μικροοργανισμών που απομονώθηκαν από τον ασθενή). Με φυγοκέντρηση ηπαρινωμένου αίματος, απομονώνεται ένα εναιώρημα λευκοκυττάρων, προστίθεται ορός της ομάδας αίματος IV για οψωνοποίηση (οι οψωνίνες είναι πρωτεΐνες που ενισχύουν τη φαγοκυττάρωση). Το μικροβιακό εναιώρημα αραιώνεται, αναμιγνύεται με λευκοκύτταρα και επωάζεται για 120 λεπτά, λαμβάνοντας δείγματα για ανάλυση 30, 90, 120 λεπτά μετά την έναρξη της επώασης. Γίνονται επιχρίσματα από το συλλεγμένο εναιώρημα λευκοκυττάρων. Προσδιορίζονται οι ακόλουθοι δείκτες φαγοκυττάρωσης:

• φαγοκυτταρικός δείκτης - το ποσοστό των κυττάρων που εισήλθαν σε φαγοκυττάρωση εντός 30 λεπτών και 120 λεπτών επώασης· η τυπική τιμή του φαγοκυτταρικού δείκτη (30) είναι 94%, ο φαγοκυτταρικός δείκτης (120) είναι 92%.
• φαγοκυτταρικός αριθμός - ο μέσος αριθμός βακτηρίων που βρίσκονται ενδοκυτταρικά. η τυπική τιμή του φαγοκυτταρικού αριθμού (30) είναι 11%, ο φαγοκυτταρικός αριθμός (120) είναι 9,8%.
• συντελεστής φαγοκυττάρωσης - η αναλογία του φαγοκυττάρου (30) προς τον φαγοκυττάριο αριθμό (120)· κανονικά 1,16·
• Δείκτης βακτηριοκτόνου ουδετερόφιλων - η αναλογία του αριθμού των μικροβίων που θανατώνονται μέσα στα φαγοκύτταρα προς τον συνολικό αριθμό των μικροβίων που απορροφώνται· κανονικά 66%.

Μέθοδοι διευκρίνισης

• Μελέτη της βακτηριοκτόνου ικανότητας των φαγοκυττάρων στη δοκιμή με νιτρομπλε τετραζόλιο (NBT) - Δοκιμή NBT. Κίτρινη χρωστική νιτρομπλε τετραζόλιο προστίθεται στα λευκοκύτταρα. Όταν ένα ουδετερόφιλο απορροφά τη χρωστική, λαμβάνει χώρα μια διαδικασία αναγωγής υπό την επίδραση ελεύθερων ριζών οξυγόνου, με αποτέλεσμα τον μπλε χρωματισμό. Η αντίδραση διεξάγεται σε μια πλάκα 96 φρεατίων με επίπεδο πυθμένα. Διάλυμα Hanks (αυθόρμητο NBT) προστίθεται στα τρία πρώτα φρεάτια με ένα μείγμα NBT και λευκοκυττάρων, και σωματίδια λάτεξ προστίθενται στο δεύτερο. Το μείγμα επωάζεται στους 37°C για 25 λεπτά. Τα αποτελέσματα διαβάζονται στα 540 nm σε μια συσκευή ανάγνωσης και εκφράζονται σε αυθαίρετες μονάδες. Υπολογίζεται ο συντελεστής διέγερσης (Kst ₎, ίσος με την αναλογία της οπτικής πυκνότητας στα διεγερμένα φρεάτια προς τη μέση οπτική πυκνότητα στα φρεάτια χωρίς διέγερση. Σε υγιείς ανθρώπους, _{αυθόρμητη} NBT = 90 ± 45 CU, _{διέγερση} NBT = 140 ± 60 CU. K _st = 1,78±0,36.
• Μελέτη μορίων προσκόλλησης. Η κυτταροφθορομετρία ροής χρησιμοποιείται για τον προσδιορισμό της έκφρασης των επιφανειακών αντιγόνων CD11a/CD18, CD11b/CD18, CD11c/CD18. Οι ανοσοανεπάρκειες με μειωμένη προσκόλληση εκδηλώνονται με υποτροπιάζουσες λοιμώξεις, αργή επούλωση τραυμάτων και απουσία πύου στις εστίες της λοίμωξης.

Μελέτη του συστήματος συμπληρώματος

Μέθοδοι διαλογής

Ο προσδιορισμός της αιμολυτικής δράσης του συμπληρώματος είναι μια μελέτη της κλασικής οδού ενεργοποίησης του συμπληρώματος. Διαφορετικές αραιώσεις ορού από ένα άρρωστο και ένα υγιές άτομο προστίθενται σε ερυθροκύτταρα επικαλυμμένα με αντισώματα. Η μονάδα αιμολυτικής δράσης είναι το αντίστροφο της αραίωσης του ορού στην οποία καταστρέφεται το 50% των ερυθροκυττάρων. Ο βαθμός αιμόλυσης εκτιμάται φωτομετρικά από την απελευθέρωση αιμοσφαιρίνης στο διάλυμα. Μείωση της αιμολυτικής δράσης του συμπληρώματος παρατηρείται σε συστηματικό ερυθηματώδη λύκο με νεφρική βλάβη, οξεία σπειραματονεφρίτιδα, συνδυασμένες ανοσοανεπάρκειες, μυασθένεια, ιογενή ηπατίτιδα, λεμφώματα, αύξηση - σε αποφρακτικό ίκτερο, θυρεοειδίτιδα Hashimoto, ρευματισμούς, ρευματοειδή αρθρίτιδα, οζώδη περιαρτηρίτιδα, δερματομυοσίτιδα, έμφραγμα του μυοκαρδίου, ελκώδη κολίτιδα, σύνδρομο Reiter, ουρική αρθρίτιδα.

Μέθοδοι διευκρίνισης

• Προσδιορισμός συστατικών του συμπληρώματος. Ο ποσοτικός προσδιορισμός πραγματοποιείται με ακτινική ανοσοδιάχυση και νεφελομετρία.
  Η μελέτη δεν είναι κατατοπιστική εκτός εάν αλλάξουν οι αντιγονικές ιδιότητες των συστατικών του συμπληρώματος.
• Έχει διαπιστωθεί ότι το συστατικό Clq του συμπληρώματος ενισχύει τη φαγοκυττάρωση και προκαλεί κυτταρική κυτταροτοξικότητα. Η μείωσή του συμβαίνει σε ανοσοσυμπλέγματα, συστηματικό ερυθηματώδη λύκο, πυώδεις λοιμώξεις και όγκους.
• Το συστατικό C3 εμπλέκεται στην ενεργοποίηση των κλασικών και εναλλακτικών οδών του συμπληρώματος. Η μείωση της συγκέντρωσής του σχετίζεται με χρόνιες βακτηριακές και μυκητιασικές λοιμώξεις, την παρουσία κυκλοφορούντων ή ιστών ανοσοσυμπλεγμάτων.
• Το συστατικό C4 εμπλέκεται στην ενεργοποίηση της κλασικής οδού. Η μείωση της συγκέντρωσής του σχετίζεται με παρατεταμένη ενεργοποίηση του συμπληρώματος από ανοσοσυμπλέγματα και μείωση της συγκέντρωσης του αναστολέα C1, ο οποίος ελέγχει την ενεργοποίηση της κλασικής οδού του συμπληρώματος. Η ανεπάρκεια C4 εμφανίζεται στον συστηματικό ερυθηματώδη λύκο, ενώ η αύξηση του C4 εμφανίζεται σε νεφρική νόσο, απόρριψη μοσχεύματος, οξεία φλεγμονή και γαστρεντερικές παθήσεις.
• Το C5a είναι ένα μικρό θραύσμα του μορίου C5, το οποίο αποσπάται από αυτό ως αποτέλεσμα της ενεργοποίησης του συστήματος συμπληρώματος. Η συγκέντρωσή του αυξάνεται κατά τη διάρκεια φλεγμονής, σήψης, ατοπικών και αλλεργικών παθήσεων.
• Ο αναστολέας Cl είναι ένας πολυλειτουργικός παράγοντας. Ελέγχει την ενεργοποίηση του συστατικού C1 του συμπληρώματος, αναστέλλει τη δράση της καλλικρεΐνης, της πλασμίνης και του ενεργοποιημένου παράγοντα Hageman, των πρωτεασών Cls και Or. Η ανεπάρκεια του αναστολέα C1 οδηγεί σε αγγειοοίδημα.
• Λειτουργικές μελέτες του συμπληρώματος. Ο ορός δοκιμής προστίθεται σε έναν πρότυπο ορό που δεν περιέχει κανένα συστατικό του συμπληρώματος και προσδιορίζεται η αιμολυτική δράση του συμπληρώματος. Εάν η αιμολυτική δράση δεν αποκατασταθεί στο φυσιολογικό, η δράση αυτού του συστατικού του συμπληρώματος στον ορό δοκιμής θεωρείται μειωμένη.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ]