Συναισθηματική ενδοκοιλιακή μικροσκοπία του κερατοειδούς

Η συνεστιακή μικροσκόπηση του κερατοειδούς είναι μία από τις σύγχρονες μεθόδους έρευνας. επιτρέπει την διεξαγωγή ενδοϋαλοειδούς παρακολούθησης της κατάστασης του κερατοειδούς με οπτική απεικόνιση ιστών σε κυτταρικό και μικροδομικό επίπεδο.

Αυτή η μέθοδος, λόγω του αρχικού σχεδιασμού του μικροσκοπίου και της υψηλής ανάλυσης του, επιτρέπει την απεικόνιση των ζωντανών ιστών κερατοειδούς, τη μέτρηση του πάχους κάθε στοιβάδας και την εκτίμηση του βαθμού μορφολογικών διαταραχών.

Ο σκοπός της ομοιοπολικής μικροσκοπίας του κερατοειδούς χιτώνα

Χαρακτηρίζουν τις μορφολογικές μεταβολές στον κερατοειδή, που προκύπτουν από διάφορες φλεγμονώδεις και δυστροφικές ασθένειες, καθώς και από χειρουργικές επεμβάσεις και τις επιδράσεις της CR.

Απαιτούνται μορφολογικά δεδομένα για να εκτιμηθεί η σοβαρότητα της παθολογικής διαδικασίας, η αποτελεσματικότητα της θεραπείας και να καθοριστεί η τακτική της διαχείρισης του ασθενούς.

Ενδείξεις για τη διαδικασία

• Φλεγμονώδεις ασθένειες του κερατοειδούς ( κερατίτιδα ).
• Δυστροφικές ασθένειες του κερατοειδούς ( κερατόκωνος, δυστροφία του Fuchs, κλπ.).
• Σύνδρομο "ξηροφθαλμίας".
• Συνθήκες μετά από χειρουργικές παρεμβάσεις στον κερατοειδή (μέσω μεταμόσχευσης κερατοειδούς, κερατοδιαμορφωτικές λειτουργίες).
• Συνθήκες που συνδέονται με τη χρήση φακών επαφής.

[1], [2], [3], [4]

Παρασκευή

Η μελέτη αυτή είναι δυνατή χωρίς τη χρήση αναισθητικών. Μια σταγόνα υγρού εμβάπτισης τοποθετείται στον φακό του φακού ομοιοπολικού μικροσκοπίου. Αυτό εξαλείφει την άμεση επαφή του φακού με τον κερατοειδή και ελαχιστοποιεί τον κίνδυνο επιθηλιακών βλαβών.

[5], [6], [7], [8], [9],

Τεχνική συγκροτημένη μικροσκοπία του κερατοειδούς χιτώνα

Η μελέτη διεξάγεται σε ένα ομοειδές μικροσκόπιο ConfoScan 4 (Nider) με αύξηση 500 φορές. Η συσκευή σας επιτρέπει να εξετάσετε τον κερατοειδή σε όλο το πάχος του.

Το μέγεθος της εξεταζόμενης ζώνης είναι 440 × 330 μm, το πάχος του στρώματος σάρωσης είναι 5 μm. Ένας φακός με μια σταγόνα γέλης φέρεται στον κερατοειδή ώστε να αγγίζει και να ρυθμίζεται έτσι ώστε το πάχος του στρώματος υγρού εμβάπτισης να είναι 2 mm. Ο σχεδιασμός της συσκευής σας επιτρέπει να εξετάσετε τον κερατοειδή στην κεντρική ζώνη και τις παρακείμενες περιοχές.

Αντενδείξεις στη διαδικασία

Η σχετική αντένδειξη σηματοδότησε ερεθισμό του οφθαλμού στο υπόβαθρο μιας οξείας φλεγμονώδους διαδικασίας.

[10], [11]

Κανονική απόδοση

Κανονική μορφολογική εικόνα του κερατοειδούς

Το πρόσθιο επιθήλιο αποτελείται από 5-6 στρώματα κυττάρων. Το μέσο πάχος ολόκληρου του επιθηλίου είναι περίπου 50 μm. Σύμφωνα με τη μορφολογική δομή, διακρίνονται τα ακόλουθα στρώματα (από μέσα προς τα έξω): βασικά, υποκείμενα και επιφανειακά.

• Το εσωτερικό (βασικό) στρώμα αντιπροσωπεύεται από μικρά πυκνά κυλινδρικά κύτταρα χωρίς ορατό πυρήνα. Τα σύνορα των βασικών κυττάρων είναι σαφή, φωτεινά.
• Το μεσαίο στρώμα αποτελείται από 2-3 στρώματα κυψελίδων (φτερωτών) σχήματος σπονδυλικής στήλης με βαθιές εισβολές, στις οποίες κατασκευάζονται εκβλέψεις γειτονικών κυττάρων. Μικροσκοπικά, τα όρια των κυττάρων είναι αρκετά διακριτά και οι πυρήνες μπορεί να μην είναι καθορισμένοι ή να είναι ασαφείς.
• Το επιφανειακό στρώμα του επιθηλίου αντιπροσωπεύεται από ένα ή δύο στρώματα πολυγωνικών κυττάρων με διαυγή όρια και ομοιογενή πυκνότητα. Οι πυρήνες είναι συνήθως φωτεινότεροι από το κυτταρόπλασμα, στον οποίο μπορεί κανείς να διακρίνει έναν σκούρο δακτύλιο κοντά στον πυρήνα.

Μεταξύ των κυττάρων του επιφανειακού στρώματος γίνεται διάκριση ανάμεσα στο σκοτάδι και το φως. Η αυξημένη ανακλαστικότητα των επιθηλιακών κυττάρων υποδηλώνει μείωση στο επίπεδο του μεταβολισμού σε αυτά και την έναρξη της απολέπισής τους.

Η μεμβράνη Bowman είναι μια διαφανής δομή που δεν αντανακλά το φως, οπότε είναι αδύνατο να την απεικονίσει όταν πραγματοποιείται ομοεστιακή μικροσκοπία.

Το υποβυσικό πλέγμα νεύρου βρίσκεται κάτω από τη μεμβράνη Bowman. Κανονικά, οι νευρικές ίνες μοιάζουν με φωτεινές λωρίδες που εκτελούνται παράλληλα σε σκοτεινό υπόβαθρο και έρχονται σε επαφή μεταξύ τους. Η ανακλαστικότητα (ανακλαστικότητα) μπορεί να είναι άνιση στο μήκος των ινών.

Το στρώμα του κερατοειδούς καταλαμβάνει το 80 έως 90% του πάχους του κερατοειδούς και αποτελείται από ένα κυτταρικό και εξωκυτταρικό συστατικό. Τα βασικά κυτταρικά στοιχεία του στρώματος είναι τα κερατοκύτταρα. αποτελούν περίπου το 5% της ποσότητας.

Ένα τυπικό μικροσκοπικό μοτίβο του στρώματος περιλαμβάνει διάφορα λαμπερά ακανόνιστα σώματα ωοειδούς σχήματος (πυρήνες κερατοκυττάρων) που βρίσκονται στο πάχος μιας διαφανούς σκούρας γκρίζας ή μαύρης μήτρας. Κανονικά, η απεικόνιση των εξωκυττάριων δομών είναι αδύνατη λόγω της διαφάνειας τους. Το στρώμα μπορεί να χωριστεί υπό όρους σε υποστρώματα: εμπρόσθια (βρίσκεται ακριβώς κάτω από τη μεμβράνη Bowman και αποτελεί το 10% του πάχους του στρώματος), πρόσθια, μεσαία και οπίσθια.

Η μέση πυκνότητα των κερατοκυττάρων είναι υψηλότερη στο πρόσθιο στρώμα, βαθμιαία ο αριθμός τους μειώνεται προς τα οπίσθια στρώματα. Πρόσθια πυκνότητα στρωματικών κυττάρων σχεδόν δύο φορές υψηλότερη από ό, τι τα πίσω στρωματικά κύτταρα (αν η πυκνότητα των κυττάρων της πρόσθιας στρώματος λαμβάνεται ως 100%, τότε η πυκνότητα του οπίσθιου περίπου 53,7% των κυττάρων). Στο πρόσθιο στρώμα, οι πυρήνες των κερατοκυττάρων έχουν στρογγυλεμένο σχήμα φασολιού και στο οπίσθιο οβάλ και πιο επιμήκη.

Οι πυρήνες των κερατοκυττάρων μπορεί να διαφέρουν στη φωτεινότητα. Η διαφορετική ικανότητα να αντανακλάται το φως εξαρτάται από τη μεταβολική τους κατάσταση. Τα φωτεινότερα κύτταρα θεωρούνται ενεργοποιημένα κερατοκύτταρα ("κύτταρα στρες"), οι δραστηριότητες των οποίων στοχεύουν στη διατήρηση της εσωτερικής ομοιοστασίας του κερατοειδούς. Στο πρότυπο και το οπτικό πεδίο, υπάρχουν μόνο ενεργοποιημένα κελιά.

Οι νευρικές ίνες στο πρόσθιο στρώμα του κερατοειδούς απεικονίζονται ως λαμπρές ομοιογενείς ζώνες, που συχνά σχηματίζουν διακλαδώσεις.

Η αποκομμένη μεμβράνη είναι κανονικά διαφανής και δεν απεικονίζεται με συνεστιακή μικροσκοπία.

Το οπίσθιο επιθήλιο είναι μία μονοστιβάδα εξαγωνικών ή πολυγωνικών επίπεδων κυττάρων με ομοιόμορφα ελαφριά επιφάνεια σε φόντο διαφορετικών σκοτεινών ενδοκυτταρικών ορίων.

Η συσκευή παρέχει τη δυνατότητα χειροκίνητου ή αυτόματου υπολογισμού της κυτταρικής πυκνότητας, της περιοχής και του συντελεστή μεταβλητότητας.

Παθολογικές αλλαγές στη δομή του κερατοειδούς

Ο κερατόκωνος χαρακτηρίζεται από σημαντικές αλλαγές στο πρόσθιο επιθήλιο και στο στρώμα του κερατοειδούς χιτώνα.

[12], [13], [14], [15], [16], [17], [18], [19], [20]