Βακτηριοσκοπική ανάλυση πτυέλων

Η έγκαιρη ταυτοποίηση ενός μολυσματικού παράγοντα είναι πολύ σημαντική για την σωστή επιλογή ενός αντιβακτηριακού φαρμάκου προκειμένου να αποφευχθεί η ανάπτυξη βακτηριακής αντοχής κατά τη διάρκεια της εμπειρικής χορήγησης ενός αντιβιοτικού. Η χρώση με Gram είναι η πιο συνηθισμένη μέθοδος χρωματισμού όλων των τύπων υλικού που λαμβάνεται από έναν ασθενή (πτύελα, βρογχοκυψελιδική έκπλυση κλπ.) Για ταχεία και ενδεικτική δημιουργία μολυσματικού παράγοντα.

Χρησιμοποιώντας ένα μικροσκόπιο επίχρισμα-πτύελο πτυέλων, πραγματοποιείται μια προκαταρκτική αξιολόγηση ενός πιθανού αιτιολογικού παράγοντα. Το πτύελο με χρώση Gram εξετάζεται πριν από τη σπορά του σε θρεπτικά μέσα, επίσης για τον σκοπό της εκτίμησης της καταλληλότητας για καλλιέργεια και ταυτοποίηση ενός πιθανού παθογόνου παράγοντα. Τα πτύελα θεωρούνται κατάλληλα εάν ένα επίχρισμα κηλιδωμένο από το Gram με μικρή αύξηση στο μικροσκόπιο αποκαλύπτει περισσότερα από 25 λευκοκύτταρα και λιγότερα από 10 επιθηλιακά κύτταρα στο οπτικό πεδίο. Σημάδια ποιότητα του δείγματος πτυέλων που μπορεί να χρησιμοποιηθεί για καλλιέργεια, μια επικράτηση των λευκοκυττάρων σε επιθηλιακά κύτταρα, καθώς και η παρουσία των βακτηρίων του ίδιου είδους, τα οποία τοποθετούνται μέσα ή γύρω από λευκοκύτταρα. Τα θετικά κατά Gram βακτήρια στο παρασκεύασμα έχουν σκούρο μπλε χρώμα και τα αρνητικά κατά Gram βακτήρια έχουν ροζ χρώμα. Οι αιτιολογικοί παράγοντες της άτυπης πνευμονίας (μυκόπλασμα, λεγιονέλλα, ρικέτσια και χλαμύδια) δεν βάφονται από το Gram, επομένως χρησιμοποιούνται ορολογικές μέθοδοι για την ανίχνευσή τους.

Τα επιτόπια επιχρίσματα στο Τsiol-Nielsen χρησιμοποιούνται για την ταυτοποίηση των βακίλων με οξύ οξύ, κυρίως μυκοβακτηριδίου φυματίωσης. Το παρασκεύασμα παρασκευάζεται από πυώδη σωματίδια πτύελου, τα οποία επιλέγονται από 4-6 διαφορετικά μέρη. Τα επιλεγμένα σωματίδια κονιοποιούνται προσεκτικά μεταξύ 2 πλακιδίων σε ομοιογενή μάζα, ξηρανθέντα στον αέρα, στερεωμένα πάνω από τη φλόγα του καυστήρα. Το Mycobacterium tuberculosis είναι χρωματισμένο κόκκινο, όλα τα άλλα πτύελα και τα βακτήρια σε μπλε χρώμα. Το Mycobacterium tuberculosis έχει την εμφάνιση λεπτών, ελαφρώς καμπυλωμένων ραβδιών διαφόρων μηκών, με πάχυνση στα άκρα ή στη μέση, διατεταγμένα σε ομάδες και μεμονωμένα. Η ανίχνευση του Mycobacterium tuberculosis είναι το πιο αξιόπιστο σημείο βλαβών της φυματίωσης των πνευμόνων. Η μέθοδος χρώσης επιχρισμάτων σύμφωνα με την Τsiol-Nielsen με ενεργές μορφές πνευμονικής φυματίωσης έχει ευαισθησία 50% και ειδικότητα 80-85%.

[1], [2], [3], [4], [5], [6]