Ιατρικός εμπειρογνώμονας του άρθρου
Νέες δημοσιεύσεις
Sauzern-blotting
Τελευταία επισκόπηση: 23.04.2024
Όλα τα περιεχόμενα του iLive ελέγχονται ιατρικά ή ελέγχονται για να διασφαλιστεί η όσο το δυνατόν ακριβέστερη ακρίβεια.
Έχουμε αυστηρές κατευθυντήριες γραμμές προμήθειας και συνδέουμε μόνο με αξιόπιστους δικτυακούς τόπους πολυμέσων, ακαδημαϊκά ερευνητικά ιδρύματα και, όπου είναι δυνατόν, ιατρικά επισκοπικά μελέτες. Σημειώστε ότι οι αριθμοί στις παρενθέσεις ([1], [2], κλπ.) Είναι σύνδεσμοι με τις οποίες μπορείτε να κάνετε κλικ σε αυτές τις μελέτες.
Εάν πιστεύετε ότι κάποιο από το περιεχόμενό μας είναι ανακριβές, παρωχημένο ή αμφισβητήσιμο, παρακαλώ επιλέξτε το και πατήστε Ctrl + Enter.
Το στύπωμα Southern (που αναπτύχθηκε από τον Ε. Southern και R. Davies το 1975) είναι η κύρια μέθοδος με την οποία εντοπίζονται γονίδια μιας συγκεκριμένης νόσου. Για αυτό, το DNA από τα κύτταρα του ασθενούς εκχυλίζεται και υποβάλλεται σε επεξεργασία με μία από τις ενδονουκλεάσες περιορισμού (ή μερικές). Τα προκύπτοντα θραύσματα υποβάλλονται σε ηλεκτροφόρηση, που τους επιτρέπει να έχουν μέγεθος μεγέθους (μικρότερα θραύσματα κινούνται ταχύτερα διαμέσου των πόρων του πηκτώματος). Στη συνέχεια τα θραύσματα μεταφέρονται (ανατυπώνονται) σε ένα φίλτρο νιτροκυτταρίνης, επάνω στο οποίο στρωματοποιείται ο ραδιοεπισημασμένος ανιχνευτής. Ο ανιχνευτής δεσμεύεται μόνο στη συμπληρωματική ακολουθία. Στη συνέχεια, με τη μέθοδο της αυτοραδιογραφίας, προσδιορίζεται η θέση του επιθυμητού θραύσματος του γονιδιωματικού ϋΝΑ στο ηλεκτροφογραμμα.
Η υβριδοποίηση με τα επισημασμένα RNA ανιχνευτή DNA ή DNA παρασκευάσματα, στάγδην προκλήθηκε επί της στερεάς μήτρας χωρίς προηγούμενη διασπάσεως και ηλεκτροφόρηση ονομάζεται Dot και υβριδισμό slot ανάλογα με τη διαμόρφωση των κηλίδων DNA στο φίλτρο (στρογγυλά ή επιμήκη, αντίστοιχα).
[