Ιατρικός εμπειρογνώμονας του άρθρου
Νέες δημοσιεύσεις
Υβριδισμός in situ
Τελευταία επισκόπηση: 04.07.2025
Όλα τα περιεχόμενα του iLive ελέγχονται ιατρικά ή ελέγχονται για να διασφαλιστεί η όσο το δυνατόν ακριβέστερη ακρίβεια.
Έχουμε αυστηρές κατευθυντήριες γραμμές προμήθειας και συνδέουμε μόνο με αξιόπιστους δικτυακούς τόπους πολυμέσων, ακαδημαϊκά ερευνητικά ιδρύματα και, όπου είναι δυνατόν, ιατρικά επισκοπικά μελέτες. Σημειώστε ότι οι αριθμοί στις παρενθέσεις ([1], [2], κλπ.) Είναι σύνδεσμοι με τις οποίες μπορείτε να κάνετε κλικ σε αυτές τις μελέτες.
Εάν πιστεύετε ότι κάποιο από το περιεχόμενό μας είναι ανακριβές, παρωχημένο ή αμφισβητήσιμο, παρακαλώ επιλέξτε το και πατήστε Ctrl + Enter.
Η διαδικασία υβριδισμού μπορεί να πραγματοποιηθεί όχι μόνο σε πήκτωμα, σε φίλτρα ή σε διάλυμα, αλλά και σε ιστολογικά ή χρωμοσωμικά παρασκευάσματα. Αυτή η μέθοδος ονομάζεται υβριδισμός in situ. Μια παραλλαγή της μεθόδου, στην οποία παρασκευάσματα DNA ή RNA επισημασμένα με φθοροχρώματα χρησιμοποιούνται ως ανιχνευτές, ονομάζεται FISH (υβριδισμός in situ φλουορεσκεΐνης). Ο επισημασμένος ανιχνευτής DNA εφαρμόζεται σε παρασκευάσματα διαφορικά χρωματισμένων και προετοιμασμένων για υβριδισμό (μετουσιωμένα) μεταφασικών χρωμοσωμάτων. Χρησιμοποιείται προκαταρκτική επεξεργασία των χρωμοσωμάτων για να διευκολυνθεί η πρόσβαση του ανιχνευτή στο γονιδιωματικό DNA. Μετά την έκπλυση των μη δεσμευμένων μορίων DNA και την εφαρμογή ενός φωτοευαίσθητου γαλακτώματος (όταν χρησιμοποιείται ραδιενεργός ετικέτα) ή την εκτέλεση κατάλληλης επεξεργασίας (όταν χρησιμοποιούνται ανιχνευτές DNA επισημασμένοι με βιοτίνη ή φλουορεσκεΐνη), οι θέσεις εντοπισμού αλληλουχιών DNA που είναι συμπληρωματικές προς τον ανιχνευτή DNA που χρησιμοποιείται μπορούν να ανιχνευθούν απευθείας με μικροσκοπία ως χαρακτηριστικές κουκκίδες πάνω από τα αντίστοιχα τμήματα ορισμένων χρωμοσωμάτων.
Αυτή η ερευνητική μέθοδος μας επιτρέπει να προσδιορίσουμε όχι μόνο τη χρωμοσωμική συσχέτιση, αλλά και τον ενδοχρωμοσωμικό εντοπισμό του γονιδίου που μελετάται.
[