Μικροβιολογική εξέταση των πτυέλων

Η μικροβιολογική εξέταση είναι ο πιο σημαντικός κρίκος στην διαγνωστική αναζήτηση και επαλήθευση του αιτιολογικού παράγοντα της πνευμονίας. Περιλαμβάνει όχι μόνο την απομόνωση του αιτιολογικού παράγοντα, αλλά και τη μελέτη των ιδιοτήτων του, συμπεριλαμβανομένης της ευαισθησίας σε διάφορα φάρμακα με βακτηριοκτόνο και βακτηριοστατική δράση.

Για το σκοπό αυτό, χρησιμοποιείται η μέθοδος σποράς πτυέλων σε διάφορα θρεπτικά μέσα. Σε ένα δείγμα πτυέλων που παραδίδεται στο εργαστήριο, επιλέγονται πυώδεις σβώλοι και πλένονται προσεκτικά σε τρυβλίο Petri με ισοτοπικό διάλυμα χλωριούχου νατρίου, το οποίο σε κάποιο βαθμό τους επιτρέπει να απελευθερωθούν από τη μικροχλωρίδα της ανώτερης αναπνευστικής οδού. Η σπορά πυωδών σβώλων πτυέλων πραγματοποιείται σε διάφορα θρεπτικά μέσα, η σύνθεση των οποίων περιγράφεται σε ειδικά εγχειρίδια μικροβιολογίας. Τα μέσα με τους σπόρους επωάζονται στους 37,5 °C για 24 ώρες. Οι καθαρές καλλιέργειες απομονώνονται από τις αναπτυγμένες αποικίες, αναγνωρίζονται με γνωστές μικροβιολογικές μεθόδους και προσδιορίζεται η ευαισθησία τους στα αντιβιοτικά.

Για τον προσδιορισμό της ποσοτικής περιεκτικότητας σε μικροοργανισμούς, τα πτύελα ομογενοποιούνται, αναμειγνύονται με θρεπτικό ζωμό και παρασκευάζονται διαδοχικές δεκαπλάσιες αραιώσεις από το μείγμα, οι οποίες εμβολιάζονται σε τρυβλία Petri με αιματούχο άγαρ. Μετά από 24 ώρες επώασης στους 37,5°C, τα αποτελέσματα λαμβάνονται υπόψη, μετρώντας αποικίες του ίδιου τύπου σε εμφάνιση και λαμβάνοντας υπόψη τον βαθμό αραίωσης του υλικού. Παρασκευάζονται επιχρίσματα από τις αποικίες και εξετάζονται στο μικροσκόπιο.

Ερμηνεία των αποτελεσμάτων

Η ερμηνεία των αποτελεσμάτων της μικροβιολογικής εξέτασης των πτυέλων είναι αρκετά περίπλοκη, γεγονός που εξηγείται από διάφορους παράγοντες. Έχει ήδη αναφερθεί παραπάνω η συνεχής εμφάνιση βρογχικού περιεχομένου με τη μικροχλωρίδα της ανώτερης αναπνευστικής οδού και της στοματικής κοιλότητας και η συχνή παρουσία στο φυσιολογικό τραχειοβρογχικό περιεχόμενο υγιών ανθρώπων των περισσότερων από τους πιο τυπικούς αιτιολογικούς παράγοντες αναπνευστικών παθήσεων (πνευμονιόκοκκοι, στρεπτόκοκκοι, σταφυλόκοκκοι κ.λπ.). Από αυτή την άποψη, η απομόνωση στα πτύελα κατά τη διάρκεια μικροβιολογικών μελετών μιας συσχέτισης διαφόρων μικροοργανισμών, οι περισσότεροι από τους οποίους στη συγκεκριμένη περίπτωση είναι ευκαιριακούς, καθιστά εξαιρετικά δύσκολη την αναγνώριση του αιτιολογικού παράγοντα της νόσου. Επομένως, για την ερμηνεία των αποτελεσμάτων της μικροβιολογικής εξέτασης των πτυέλων, είναι απαραίτητο να ληφθεί υπόψη η ποσοτική κυριαρχία ενός συγκεκριμένου τύπου βακτηρίων (περισσότερο από ¹⁰⁶ -107 ^mc /ml), η εμφάνιση ορισμένων μικροοργανισμών στη φάση της έξαρσης και η εξαφάνισή τους κατά την περίοδο ύφεσης. Είναι πολύ σημαντικό να ληφθεί υπόψη η κλινική εικόνα της νόσου.

Οι κύριοι και πιθανοί αιτιολογικοί παράγοντες διαφόρων κλινικών μορφών πνευμονίας

Κλινική μορφή πνευμονίας	Κύρια παθογόνα	Πιθανά παθογόνα
Κρουπός	Πνευμονιόκοκκοι	Στρεπτόκοκκοι, Κλεμπσιέλα
Μετά τη γρίπη	Σταφυλόκοκκοι, πνευμονόκοκκοι, κλεμπσιέλλα	Haemophilus influenzae, στρεπτόκοκκοι
Απόστημα	Σταφυλόκοκκοι, βακτηριοειδή, μικτή χλωρίδα	Κλεμπσιέλα, Pseudomonas aeruginosa
Φιλοδοξία	Βακτηρίδια, αναερόβιοι στρεπτόκοκκοι	Σταφυλόκοκκοι, πνευμονιόκοκκοι
Μετεγχειρητική	Σταφυλόκοκκοι	Πνευμονιόκοκκοι, Κλεμπσιέλα
Διάμεσος	Μυκοπλάσματα	Παθογόνα της ορνίθωσης, της ψιττάκωσης
Δευτεροπαθής πνευμονία σε νοσοκομειακούς ασθενείς χωρίς προηγούμενη αντιβακτηριακή θεραπεία	Σταφυλόκοκκοι, πνευμονιόκοκκοι, κλεμπσιέλλα, βακτηριοειδή	Escherichia coli, serratia, κ.λπ.
Δευτερογενής πνευμονία που αναπτύχθηκε στο πλαίσιο της αντιβακτηριακής θεραπείας	Προαιρετικοί παθογόνοι μικροοργανισμοί	Ψευδομονάδα, Σερράτια, Κλεμπσιέλα, Σταφυλόκοκκος, Πρωτέας, κ.λπ.
Σε ασθενείς με χρόνια βρογχίτιδα	Πνευμονιόκοκκοι, Haemophilus influenzae	Σταφυλόκοκκοι, στρεπτόκοκκοι
Σε ασθενείς με αλκοολισμό	Πνευμονιόκοκκοι, Αιμόφιλος ινφλουέντζας, Κλεμπσιέλα	E. coli, πρωτόζωα
Στο σύνδρομο επίκτητης ανοσοανεπάρκειας	Πνευμονοκύστη, μύκητες	Κυτταρομεγαλοϊοί
Σε ασθενείς των οποίων η φροντίδα παρέχεται από εξωτερικούς συνεργάτες	Πνευμονιόκοκκοι, σταφυλόκοκκοι, αιμοφιλικές θηλές	Κλεμπσιέλα, Εσεριχία κολί

Κατά την ποσοτική αξιολόγηση των αποτελεσμάτων της μελέτης της μικροβιακής μόλυνσης σε ασθενείς με πνευμονία, είναι απαραίτητο να λαμβάνεται υπόψη η εξαιρετικά υψηλή ευαισθησία αυτού του δείκτη στη συνταγογράφηση αντιβιοτικών. Ακόμη και η βραχυπρόθεσμη θεραπεία με αντιβακτηριακά φάρμακα μπορεί να οδηγήσει σε απότομη μείωση της μικροβιακής μόλυνσης, η οποία δεν επιτρέπει την επαρκή αξιολόγηση των αποτελεσμάτων της μελέτης των πτυέλων. Επομένως, συνιστάται η συλλογή πτυέλων πριν από τη συνταγογράφηση αντιβιοτικής αγωγής.

Θα πρέπει επίσης να σημειωθεί ότι χρησιμοποιούνται ειδικά επιλεκτικά θρεπτικά μέσα για την καλλιέργεια ενδοκυτταρικών παθογόνων της πνευμονίας (μυκόπλασμα, λεγιονέλλα, χλαμύδια, ρικέτσια). Οι συνήθεις μικροβιολογικές εξετάσεις ρουτίνας με χρήση συμβατικών θρεπτικών μέσων (άγαρ-άγαρ) δεν δίνουν ποτέ θετικά αποτελέσματα. Συνεπώς, η επιλογή συγκεκριμένων μεθόδων μικροβιολογικών εξετάσεων θα πρέπει να γίνεται με τη συμμετοχή του θεράποντος ιατρού, ο οποίος υποχρεούται να ενημερώσει τον εργαστηριακό ιατρό για τις υποψίες του σχετικά με τον πιθανό ρόλο των ενδοκυτταρικών παθογόνων στην εμφάνιση πνευμονίας σε αυτόν τον ασθενή.

Θα πρέπει να προστεθεί ότι στην πραγματική κλινική πρακτική, ακόμη και μια τεχνικά άρτια μικροβιολογική εξέταση των πτυέλων επιτρέπει την ταυτοποίηση του παθογόνου σε όχι περισσότερο από 40-60% των περιπτώσεων. Επομένως, μπορούν να χρησιμοποιηθούν και άλλες σύγχρονες ερευνητικές μέθοδοι για την επαλήθευση του παθογόνου. Το πληροφοριακό περιεχόμενο μιας βακτηριολογικής μελέτης μπορεί να αυξηθεί σημαντικά χρησιμοποιώντας τραχειοβρογχικό αναρρόφημα, υγρό που λαμβάνεται κατά τη διάρκεια βρογχοκυψελιδικής πλύσης (BAL), βρογχοσκόπηση κ.λπ., αντί για πτύελα, ως βιολογικό υλικό που μελετάται.

Επιπλέον, η μέθοδος ανοσοφθορισμού διαφόρων βιολογικών υλικών (υλικό βρογχοσκόπησης, αίμα, υπεζωκοτικό περιεχόμενο κ.λπ.), οι διαγνωστικές μέθοδοι PCR και η μελέτη του επιπέδου ειδικών αντισωμάτων στον ορό του αίματος μπορούν να χρησιμοποιηθούν για την ταυτοποίηση παθογόνων της πνευμονίας. Δυστυχώς, αυτές οι διαγνωστικές μέθοδοι δεν έχουν ακόμη βρει ευρεία κλινική εφαρμογή και χρησιμοποιούνται επί του παρόντος μόνο σε μεγάλα εξειδικευμένα κέντρα και εργαστήρια.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ]