Ανοσοφαινοτυπία αιμοβλαστώσεων

Σημαντική πρόοδος στις αιματολογικές μελέτες που σχετίζονται κατά τα τελευταία χρόνια με τη χρήση σύγχρονων μεθόδων ανοσολογικών και αυτοματοποιημένα εργαλεία για την ανάλυση και τη διαλογή κυττάρων περιφερικού αίματος και μυελού των οστών - κυτταρομετρητές ροής. Παραδοσιακά μορφολογική και κυτταροχημική μελέτη της ασθένειας κυτταρικού υποστρώματος (αίμα, κόκκινο μυελό των οστών, λεμφαδένες, σπλήνα, κλπ), σε πολλές περιπτώσεις, ειδικά σε λεμφοπολλαπλασιαστικές νόσους, δεν αποκαλύπτουν ολόκληρη την ποικιλία των επιλογών μεταξύ μορφολογικά παρόμοιες μορφές και να εντοπίσει την προέλευση της παθολογικής κλώνου . Αυτά τα προβλήματα μπορούν να λυθούν μόνο μελετώντας τα ανοσολογικά χαρακτηριστικά των κυττάρων. Κάθε στάδιο διαφοροποίησης των αιμοποιητικών κυττάρων έχει το δικό του σύνολο των αντιγόνων που είναι σχετικά με την διεθνή ταξινόμηση γνωστή ως διαφοροποίηση και διαφοροποίηση χωρίζονται σε συστάδες, που ορίζεται CD.

Στο μπλοκ διαφοροποίηση των νεοπλασματικών αλλοιώσεων μπορεί να συμβεί σε οποιοδήποτε στάδιο της φυσιολογική κυτταρική ανάπτυξη, με αποτέλεσμα ένα παθολογικό κυτταρικό κλώνο που ορίζει νόσου υποστρώματος και έχοντας την χαρακτηριστική ίδιες ανοσολογικές (ή φαινοτυπική). Μετά από μια μελέτη αυτών των δεικτών στα κύτταρα μπορεί να προσδιοριστεί με οποιαδήποτε μορφή ή μορφή πραγματοποιήσεως της νόσου είναι συνεπείς, δηλαδή επί τη βάσει των ανοσολογικών διαφορικής κυτταρικού φαινοτύπου διάγνωση, η οποία είναι η πιο δύσκολη στην λεμφοϋπερπλαστικές διαταραχές, επειδή οι κύριες κυτταρικό υπόστρωμα παθολογικές ασθένειες είναι σχεδόν ο ίδιος τύπος κυττάρων μορφολογικά.

Φαινοτυπική επιτρέπει τη χρήση μονοκλωνικών αντισωμάτων τυποποιούνται βλαστικών κυττάρων και ώριμων μυελοειδών αίματος, μονο-, λεμφοκυτταρική σειρά με την παρουσία των αντιγόνων διαφοροποίησης (υποδοχείς) στο κυτταρικό τοίχωμα. Στο τμήμα "Αξιολόγηση της ανοσολογικής κατάστασης του οργανισμού" περιγράφονται εν μέρει τα χαρακτηριστικά και η διαγνωστική σημασία των κυτταρικών δεικτών. Παρακάτω υπάρχει μια σύντομη περιγραφή των αντιγονικών δεικτών κυττάρων που εφαρμόζονται στη διάγνωση της αιμοβλάστωσης. Στις μεμβράνες των κυττάρων του αίματος και του ερυθρού μυελού των οστών μπορούν να εντοπιστούν τα ακόλουθα αντιγόνα (δείκτες).

• Το CD2 είναι μια μονομερής διαμεμβρανική γλυκοπρωτεΐνη. Παρουσιάζεται στην επιφάνεια όλων των κυκλοφορούντων Τ-λεμφοκυττάρων και ορισμένων ΝΚ-λεμφοκυττάρων. Το CD2 συμμετέχει στη διαδικασία εναλλακτικής ενεργοποίησης των Τ-λεμφοκυττάρων. Η ανίχνευση του CD2 χρησιμοποιώντας μονοκλωνικά αντισώματα στην κλινική πρακτική χρησιμοποιείται για φαινοτυπία οξειών λευχαιμιών κυττάρων Τ, λεμφωμάτων, χρόνιων φλεγμονωδών και ανοσοανεπαρκών καταστάσεων.
• Το CD3 - ένα σύμπλεγμα πρωτεϊνών που σχετίζεται με έναν αντιγόνο-ειδικό υποδοχέα Τ-κυττάρων, είναι ο κύριος λειτουργικός δείκτης των Τ-λεμφοκυττάρων. Διευκολύνει τη μεταφορά του σήματος ενεργοποίησης από τη μεμβράνη στο κυτταρόπλασμα του κυττάρου. Η ανίχνευση CD3 ενδείκνυται για τη διάγνωση οξείας λευχαιμίας κυττάρων Τ, λεμφώματος (CD3 δεν εκφράζεται σε λεμφοειδείς όγκους μη Τ-κυττάρων) και ασθενειών ανοσοανεπάρκειας.
• CD4 - διαμεμβρανική γλυκοπρωτεΐνη που εκφράζεται από ένα υποσύνολο των Τ βοηθητικών (επαγωγείς) που αποτελούν το 45% των λεμφοκυττάρων περιφερικού αίματος. Στα πρώτα στάδια της ανάπτυξης των λεμφοκυττάρων στον θύμο, CD4 αντιγόνα, καθώς και των CD8, εκφράζεται όλες τις φλοιώδεις λεμφοκύτταρα. Μυελοειδές θυμοκύτταρα, το οποίο είναι παρόμοιο με το φαινότυπο των ώριμων CD4 + Τ-κύτταρα περιφερικού αίματος (βοηθητικά Τ κύτταρα), είτε ήδη εκφράζουν CD4, ή υποδοχέων CD8. Στο περιφερικό αίμα, μέχρι 5% των κυττάρων επισημαίνονται ταυτοχρόνως CD4 και CD8. Ελαφρά έκφραση του CD4 είναι δυνατή σε μερικά μονοκύτταρα. CD4 εκφράζεται στις περισσότερες περιπτώσεις, το λέμφωμα Τ κυττάρων, συμπεριλαμβανομένων των σπογγοειδή μυκητίαση, και HTLV-σχετίζεται Τ κυττάρων λευχαιμίας (HTLV - ανθρώπινος Τ-λεμφοτροπικός ιός - ανθρώπινος Τ-λεμφοτροπικός ιός).
• Το CD5 - μία γλυκοπρωτεΐνη μονής αλυσίδας, που υπάρχει σε όλα τα ώριμα Τ-λεμφοκύτταρα και τα περισσότερα θυμοκύτταρα, εκφράζεται ασθενώς από τα Β-λεμφοκύτταρα. Το CD5 ανιχνεύεται σε νεοπλασματικά κύτταρα της χρόνιας λεμφοκυτταρικής λευχαιμίας και του κεντροκυτταρικού λεμφώματος Β-κυττάρων. Σε άλλους τύπους κακοήθων λεμφοειδών ασθενειών - θυλακοειδές λέμφωμα, λευχαιμία των τριχωτών κυττάρων, λέμφωμα μεγάλων κυττάρων - CD5 δεν εκφράζεται.
• Το CD7 είναι μια μονόκλωνη πρωτεΐνη, ο πρώτος δείκτης της διαφοροποίησης των κυττάρων Τ. Εκφράζεται από τα προ-Τ λεμφοκύτταρα ακόμη και πριν μεταναστεύσουν στον θύμο αδένα. Το CD7 ανιχνεύεται στα περισσότερα κύτταρα ΝΚ, παρατηρείται ασθενής έκφραση στα μονοκύτταρα. Τα Β-λεμφοκύτταρα και τα κοκκιοκύτταρα δεν περιέχουν αυτό το αντιγόνο. Ο ορισμός του CD7 χρησιμοποιείται για τη διάγνωση των λεμφωμάτων, της λεμφοβλαστικής λευχαιμίας των Τ-κυττάρων των παιδιών.
• Το CD8 είναι μια πρωτεΐνη που αποτελείται από δύο πολυπεπτιδικές αλυσίδες συνδεδεμένες με δισουλφιδικές γέφυρες. Εκφράζεται από έναν υποπληθυσμό κυτταροτοξικών και κατασταλτικών Τ λεμφοκυττάρων, που περιλαμβάνουν 20-35% των λεμφοκυττάρων του περιφερικού αίματος. Αυτό το αντιγόνο έχει επίσης ΝΚ λεμφοκύτταρα, φλοιώδη θυμοκύτταρα, 30% μυελικά θυμοκύτταρα και έναν υποπληθυσμό κυττάρων μυελού κόκκινου οστού. Το CD8 εξετάζεται για ποσοτική αξιολόγηση της περιεκτικότητας σε Τ-καταστολέα (βλέπε ενότητα "Τ-λεμφοκύτταρα-καταστολείς στο αίμα" παραπάνω).

• Το CD10 είναι η ενδοπεπτιδάση που σχετίζεται με την κυτταρική μεμβράνη. Το CD10 εκφράζει νέες μορφές Β λεμφοκυττάρων και έναν υποπληθυσμό φλοιωδών λεμφοκυττάρων. Το CD10 εκφράζει όλα τα κύτταρα του ALL.
• CD11c εκφράζουν μακροφάγα, μονοκύτταρα, κοκκιοκύτταρα, κύτταρα ΝΚ και κύτταρα λευχαιμίας τριχωτών κυττάρων επί της κυτταρικής μεμβράνης.
• CD13 - γλυκοπρωτεΐνη που εκφράζεται από κύτταρα του μυελομονοκυτταρικής σειράς (προγονικά κύτταρα, ουδετερόφιλα, βασεόφιλα, ηωσινόφιλα, μονοκύτταρα και κύτταρα της μυελοειδούς λευχαιμίας). Απουσιάζει στα Τ και Β λεμφοκύτταρα, τα ερυθροκύτταρα και τα αιμοπετάλια.
• Το CD14 είναι γλυκοπρωτεΐνη επιφανειακής μεμβράνης. Εκφράζεται κυρίως από μονοκύτταρα και μακροφάγα. Το CD14 ανιχνεύεται σε περισσότερο από 95% μονοκύτταρα περιφερικού αίματος και μυελού των οστών. Ισχυρή έκφραση του CD14 παρατηρείται στην οξεία μυελοβλαστική λευχαιμία. Στην οξεία και τη χρόνια λεμφοβλαστική λευχαιμία, αυτό το αντιγόνο δεν εκφράζεται.
• Το CD15 είναι ένας ολιγοσακχαρίτης. Συμμετέχει στις διαδικασίες φαγοκυττάρωσης και χημειοταξίας. Αυτό το αντιγόνο υπάρχει στην επιφάνεια των ώριμων κοκκιοκυττάρων και των κυττάρων Berezovsky-Sternberg. Η έκφραση αντιγόνου CD15 ανιχνεύεται στη νόσο Hodgkin. Στα λεμφώματα μη Hodgkin, το CD15 δεν ανιχνεύεται στις περισσότερες περιπτώσεις.
• Το CD16 εκφράζεται στην επιφάνεια κοκκιοκυττάρων, μονοκυττάρων, μακροφάγων και κυττάρων ΝΚ. Όλα τα λεμφοκύτταρα που εκφράζουν αυτό το αντιγόνο έχουν την ικανότητα για κυτταρική κυτοτοξικότητα εξαρτώμενη από αντισώματα. Το CD16 προσδιορίζεται κατά την τυποποίηση χρόνιων μυελοκυτταρικών λευχαιμιών, για τον χαρακτηρισμό των κυττάρων ΝΚ.
• Το CD19 είναι μια γλυκοπρωτεΐνη παρούσα σε όλα τα περιφερικά Β λεμφοκύτταρα, καθώς και σε όλους τους προδρόμους κυττάρων Β. Απουσιάζει στα κύτταρα πλάσματος. Αυτός είναι ο πρώτος δείκτης των Β-κυττάρων, παίζει σημαντικό ρόλο στη ρύθμιση της ενεργοποίησης και του πολλαπλασιασμού των Β-λεμφοκυττάρων. Το CD19 εκφράζεται σε όλα τα νεοπλασματικά κύτταρα οξείας λευχαιμίας με προέλευση Β-κυττάρων και υπάρχει επίσης σε μερικές μορφές οξείας λευχαιμίας από μονοβλάστες.
• Το CD20 είναι μια μη γλυκοζυλιωμένη πρωτεΐνη. Στην οντογένεση των Β-λεμφοκυττάρων, το CD20 αντιγόνο εμφανίζεται μετά από CD19 στο στάδιο της διαφοροποίησης των λεμφοκυττάρων προ-Β-κυττάρων. Απουσιάζει στη μεμβράνη πλάσματος των κυττάρων πλάσματος. Εκφράζεται σε ΟΛΛ, χρόνια λευχαιμία λεμφοκυτταρικής Β-κυττάρου, λευχαιμία τριχωτών κυττάρων, λέμφωμα Burkitt και πολύ σπάνια σε οξεία λευκοκυτταρική λευχαιμία.
• Το CD21 είναι μια γλυκοπρωτεΐνη, σε σημαντική ποσότητα υπάρχει στα Β-λεμφοκύτταρα σε λεμφοειδή όργανα και σε μικρή ποσότητα στα Β-κύτταρα του περιφερικού αίματος. Το CD21 είναι ένας υποδοχέας για τον ιό Epstein-Barr.
• Το CD22 είναι μια πρωτεΐνη που αποτελείται από δύο πολυπεπτιδικές αλυσίδες. Εκφράζεται στη μεμβράνη των περισσότερων Β-λεμφοκυττάρων, συμπεριλαμβανομένων των προγονικών κυττάρων (προλεμφοκύτταρα). Το αντιγόνο δεν εκφράζεται σε Β-λεμφοκύτταρα (κύτταρα πλάσματος) μετά την ενεργοποίησή τους. Η πιο έντονη έκφραση του CD22 ανιχνεύεται σε κύτταρα με λευχαιμία των τριχωτών κυττάρων, ασθενής - σε μυελογενείς λευχαιμίες και ΟΛΛ-μη Τ-κυττάρων.
• Το CD23 είναι μια γλυκοπρωτεΐνη που εκφράζεται από ενεργοποιημένα Β-λεμφοκύτταρα περιφερικού αίματος σε πολύ μεγαλύτερο βαθμό. Το CD23 διαμεσολαβεί την εξαρτώμενη από IgE κυτταροτοξικότητα και φαγοκυττάρωση από μακροφάγα και ηωσινόφιλα.
• Το CD25 είναι μία γλυκοπρωτεΐνη μονής αλυσίδας που αναγνωρίζεται ως υποδοχέας χαμηλής συγγένειας για την IL-2. Αυτός ο υποδοχέας εκφράζεται σε ενεργοποιημένα Τ-λεμφοκύτταρα και, σε χαμηλότερη πυκνότητα, σε ενεργοποιημένα Β-κύτταρα. Στο περιφερικό αίμα υγειών ανθρώπων, το αντιγόνο υπάρχει σε περισσότερο από το 5% των λεμφοειδών κυττάρων.
• Το CD29 είναι ένας υποδοχέας φιμπρονεκτίνης. Διανέμεται ευρέως στους ιστούς, εκφράζεται από λευκοκύτταρα. Η ανίχνευση CD29 σε κύτταρα περιφερικού αίματος χρησιμοποιείται για να τυπώσει έναν υποπληθυσμό Τ κυττάρων που έχουν τον φαινότυπο CD4 + CD29 +, τα οποία ονομάζονται βοηθός τύπου 2 (Th2). Αυτά τα κύτταρα, μέσω της παραγωγής λεμφοκινών, συμμετέχουν στην πραγματοποίηση της χυμικής ανοσοαπόκρισης.
• Το CD33 είναι μια διαμεμβρανική γλυκοπρωτεΐνη. Είναι παρούσα στην επιφάνεια των κυττάρων της μυελοειδούς και μονοκυτταρικής σειράς. Βρίσκεται στην επιφάνεια των μονοκυττάρων και, σε μικρότερο βαθμό, στα κοκκιοκύτταρα του περιφερικού αίματος. Περίπου το 30% των κυττάρων μυελού κόκκινου οστού εκφράζει CD33, περιλαμβανομένων των μυελοβλαστών, των προμυελοκυττάρων και των μυελοκυττάρων. Το αντιγόνο απουσιάζει από μεμβράνες πολυδύναμων βλαστοκυττάρων. Το CD33 χρησιμοποιείται για τον χαρακτηρισμό κυττάρων σε μυελογενείς λευχαιμίες. Τα κύτταρα λευχαιμίας λεμφοειδούς και ερυθροειδούς προέλευσης δεν εκφράζουν CD33.
• Το CD34 είναι μια φωσφογλυκοπρωτεΐνη, που εκφράζεται από αιματοποιητικά προγονικά κύτταρα, συμπεριλαμβανομένων των μονοπώλων βλαστοκυττάρων. Η πιο έντονη έκφραση του Ar παρατηρείται σε πρώιμους προγόνους. όταν τα κύτταρα ωριμάσουν, η έκφραση του δείκτη πέφτει. Το CD34 βρίσκεται επίσης στα ενδοθηλιακά κύτταρα. Το CD34 χρησιμοποιείται για τον χαρακτηρισμό κυττάρων σε οξεία μυελογενή και λεμφοβλαστική λευχαιμία. Με τη χρόνια λεμφοκυτταρική λευχαιμία και τα λεμφώματα, η έκφραση CD34 αντιγόνου δεν ανιχνεύεται.

• Το CD41a εκφράζεται από αιμοπετάλια και μεγακαρυοκύτταρα. Τα μονοκλωνικά αντισώματα για την ανίχνευση CD41a χρησιμοποιούνται για τη διάγνωση της μεγακαρυοβλαστικής λευχαιμίας. Με θρομβασθένεια Glązmann, η έκφραση αυτού του αντιγόνου απουσιάζει ή καταστέλλεται σημαντικά.
• Το CD42b είναι μια γλυκοπρωτεΐνη μεμβράνης αποτελούμενη από δύο πολυπεπτιδικές αλυσίδες. Ο δείκτης βρίσκεται στην επιφάνεια των αιμοπεταλίων και των μεγακαρυοκυττάρων. Στην κλινική πρακτική, η ανίχνευση του CD42b χρησιμοποιείται για τη διάγνωση της θρομβοκυτταροπάθειας - σύνδρομο Bernard-Soulier.
• Το CD45RA ανήκει στην τάξη των διαμεμβρανικών γλυκοπρωτεϊνών. Αυτό είναι ένα κοινό αντιγόνο λευκοκυττάρων. Εκφράζεται στην κυτταρική μεμβράνη των Β-λεμφοκυττάρων, σε μικρότερη έκταση Τ-λεμφοκύτταρα και σε ώριμα μυελικά θυμοκύτταρα. Ο δείκτης δεν εκφράζεται με κοκκιοκύτταρα.
• Το CD45RO είναι ισόμορφο χαμηλού μοριακού βάρους του CD45RA, ενός κοινού λευκοκυττάρου Ag. Βρίσκονται σε Τ-λεμφοκύτταρα (Τ-λεμφοκύτταρα μνήμης), υποπληθυσμούς Β-λεμφοκυττάρων, μονοκυττάρων και μακροφάγων. Τα μονοκλωνικά αντισώματα στο CD45RO αλληλεπιδρούν με τα περισσότερα θυμοκύτταρα, ένας υποπληθυσμός των ηρεμισμένων Τ-λεμφοκυττάρων CD4 + και CD8 + και των ώριμων ενεργοποιημένων Τ-κυττάρων. Κύτταρα μυελομονοκυτταρικής προέλευσης, κοκκιοκύτταρα και μονοκύτταρα φέρουν επίσης αυτό το αντιγόνο. Ανιχνεύεται σε κυτταροπλαστικά και ανοσοβλαστικά λεμφώματα.
• CD46 - Ο-γλυκοσυλιωμένο διμερές. Είναι ευρέως κατανεμημένη σε ιστούς και εκφράζεται Τ- και Β-λεμφοκύτταρα, μονοκύτταρα, κοκκιοκύτταρα, ΝΚ-κύτταρα, αιμοπετάλια, ενδοθηλιακά κύτταρα, ινοβλάστες, αλλά είναι απούσα στην επιφάνεια των ερυθροκυττάρων. Το CD46 παρέχει προστασία ιστών από δράση συμπληρώματος.
• Το CD61 είναι ένα αντιγόνο αιμοπεταλίων. Εκφράζεται στα αιμοπετάλια του περιφερικού αίματος και του ερυθρού μυελού των οστών, καθώς και στα μεγακαρυοκύτταρα και τους μεγακαρυοβλάστες. Ο ορισμός του χρησιμοποιείται ως δείκτης για την οξεία μεγακαρυοβλαστική λευχαιμία. Η έκφραση του αντιγόνου απουσιάζει ή καταστέλλεται σε ασθενείς με θρομβαστενή Glanzmann.
• Το CD95, που ονομάζεται επίσης Fas ή ΑΡΟ-1, είναι μια διαμεμβρανική γλυκοπρωτεΐνη, μέλος της οικογένειας των υποδοχέων του παράγοντα νέκρωσης όγκου. Εκφράζεται σε σημαντικές ποσότητες στα Τ-λεμφοκύτταρα (CD4 + και CD8 +) περιφερικού αίματος και, σε μικρότερο βαθμό, Β-λεμφοκύτταρα και ΝΚ-κύτταρα. Αυτό το αντιγόνο εκφράζεται επίσης σε κοκκιοκύτταρα, μονοκύτταρα, κύτταρα ιστού και νεοπλασματικά κύτταρα. Η δέσμευση του CD95 με το πρόσδεμα Fas (CD95L) επάγει απόπτωση στα κύτταρα.
• CD95L ή συνδέτη Fas, πρωτεΐνη μεμβράνης που ανήκει στην οικογένεια των υποδοχέων του παράγοντα νέκρωσης όγκου. Αυτό το αντιγόνο εκφράζεται από κυτταροτοξικά Τ λεμφοκύτταρα, κύτταρα ΝΚ και πολύ συχνά από κύτταρα όγκου. ο κύριος επαγωγέας της απόπτωσης στα κύτταρα.
• HLA-DR είναι ένας μονομορφικός προσδιοριστής των μορίων κατηγορίας ΙΙ του κύριου συμπλέγματος ανθρώπινης ιστοσυμβατότητας (HLA). Marker εκφράζεται σε κύτταρα Langerhans, δενδριτικά κύτταρα των λεμφοειδών οργάνων, και ορισμένων τύπων μακροφάγων, Β λεμφοκύτταρα, ενεργοποιημένα Τ κύτταρα και επιθηλιακά κύτταρα θύμου. Η δοκιμή για αυτό το δείκτη χρησιμοποιείται για την ποσοτικοποίηση ενεργοποιημένων Τ-λεμφοκυττάρων με το φαινότυπο CD3 + HLA-DR +.

Χρησιμοποιώντας μια διαφορετική επιλογή μονοκλωνικών αντισωμάτων σε δείκτες, είναι δυνατό να δημιουργηθεί ένα φαινοτυπικό πορτρέτο κυττάρων που είναι χαρακτηριστικό μιας δεδομένης μορφής λευχαιμίας.

Εκτός από τη χρήση τεχνικών ανοσοφαινοτυπική για τη διάγνωση και τη διαφορική διάγνωση των αιματολογικών κακοηθειών, ιδιαίτερα σημαντικό γύρισε χρήση τους στη θεραπευτική διαδικασία για την αξιολόγηση της κατάστασης της ύφεσης και υπολειμματικού πληθυσμού των λευχαιμικών κυττάρων. Γνωρίζοντας την φαινοτυπική «πορτραίτο» των βλαστικών κυττάρων κατά την περίοδο της διάγνωσης, από αυτές τις ενδείξεις μπορεί να βρει κυττάρων λευχαιμικών κλώνο σε ύφεση, και από την αύξηση του αριθμού τους - για να προβλέψουμε την εξέλιξη της υποτροπής καιρό (για 1-4 μήνες) έως ότου οι κλινικές και τα μορφολογικά χαρακτηριστικά του.

[1], [2], [3], [4],