Περιορισμοί, κίνδυνοι και επιπλοκές της μεταμόσχευσης κυττάρων

Πλαστικό-αναγεννητική ιατρική βασίζεται στη συνειδητοποίηση των πολυδύναμων εμβρυϊκών βλαστικών και των προγονικών κυττάρων κλινική και toti- ιδιότητες, επιτρέποντας in vitro και in νίνο για να δημιουργήσει ένα προκαθορισμένο κυτταρικές γραμμές ανακατάληψης κατεστραμμένους ιστούς και όργανα ενός ασθενούς ανθρώπου.

Η πραγματική δυνατότητα χρησιμοποίησης των εμβρυϊκών βλαστοκυττάρων και των βλαστικών κυττάρων οριστικών ιστών (τα αποκαλούμενα βλαστικά κύτταρα ενηλίκων) ενός ανθρώπου για θεραπευτικούς σκοπούς δεν είναι πλέον αμφίβολη. Ωστόσο, εμπειρογνώμονες από τις Εθνικές και Ιατρικές Ακαδημίες των Ηνωμένων Πολιτειών (ΗΠΑ) συνιστούν να μελετηθούν λεπτομερέστερα οι ιδιότητες των βλαστικών κυττάρων σε πειράματα σε επαρκή βιολογικά μοντέλα και να αξιολογήσει αντικειμενικά όλες τις συνέπειες της μεταμόσχευσης και μόνο στη συνέχεια να χρησιμοποιήσει βλαστοκύτταρα στην κλινική.

Διαπιστώνεται ότι τα βλαστικά κύτταρα αποτελούν μέρος των παραγώγων των ιστών και των τριών εμβρυϊκών φυλλαδίων. Τα βλαστικά κύτταρα που βρέθηκαν στον αμφιβληστροειδή, τον κερατοειδή, το δέρμα, επιδερμίδα, μυελού των οστών και περιφερικού αίματος, στα αγγεία, ο πολτός του δοντιού, ο νεφρός, το επιθήλιο της πεπτικής οδού, του παγκρέατος και του ήπατος. Με τη βοήθεια σύγχρονων μεθόδων αποδεικνύεται ότι τα νευρικά κύτταρα του στελέχους εντοπίζονται στον εγκέφαλο του ενήλικα και στο νωτιαίο μυελό. Αυτά τα εντυπωσιακά ευρήματα έχουν προσελκύσει ιδιαίτερη προσοχή των επιστημόνων και των μέσων ενημέρωσης, όπως οι νευρώνες στον εγκέφαλο ήταν ένα κλασικό παράδειγμα ενός στατικού κυτταρικού πληθυσμού που δεν μπορεί να αποκατασταθεί. Και οι δύο νωρίς και αργά περιόδους οντογένεση λόγω νευρικά βλαστικά κύτταρα στον άνθρωπο και τα ζώα του εγκεφάλου που δημιουργείται νευρώνες, αστροκύτταρα και ολιγοδενδροκύτταρα (Βλαστοκύτταρα: επιστημονική πρόοδο και τις μελλοντικές ερευνητικές κατευθύνσεις Nat Inst, Υγείας των ΗΠΑ ..).

Ωστόσο, υπό κανονικές συνθήκες, δεν εμφανίζεται η πλαστικότητα των βλαστοκυττάρων οριστικών ιστών. Για να πραγματοποιηθεί το πλαστικό δυναμικό των βλαστοκυττάρων οριστικών ιστών, πρέπει να απομονωθούν και στη συνέχεια να καλλιεργηθούν σε μέσα με κυτοκίνες (LIF, EGF, FGF). Επιπλέον, τα παράγωγα των βλαστικών κυττάρων επιβιώνουν επιτυχώς μόνο όταν μεταμοσχευθούν στο σώμα ενός ζώου με υποβαθμισμένο ανοσοποιητικό σύστημα (γ-ακτινοβολία, κυτταροστατικά, βουσουλφάνη κλπ.). Μέχρι σήμερα, δεν υπήρξε πειστική απόδειξη πλαστικότητας βλαστικών κυττάρων σε ζώα που δεν έχουν ακτινοβοληθεί ή εκτίθενται με άλλο τρόπο σε βαθιά ανοσοκαταστολή.

Σε αυτές τις περιπτώσεις, οι επικίνδυνες ΡΟΟ δραστικότητα εκδηλώνεται κυρίως σε έκτοπη περιοχή μεταμόσχευσης τους - υποδόρια ένεση ESK ανοσοανεπαρκή ποντίκια στη θέση της ένεσης που σχηματίζεται τερατοκαρκινώματος. Επιπλέον, κατά τη διάρκεια ανθρώπινα εμβρυϊκά συχνότητα ανάπτυξη των χρωμοσωμικών ανωμαλιών σε σχέση με εμβρυογένεση σε ζώα. Στο στάδιο της βλαστοκύστης μόνο 20-25% των ανθρώπινων εμβρύων αποτελούνται από κύτταρα με ένα φυσιολογικό καρυότυπο, και στη συντριπτική πλειονότητα των πρώιμων ανθρώπινων εμβρύων που αποκτώνται μετά γονιμοποίηση in vitro, χρωμοσωμική μωσαϊκισμό ανιχνεύεται χαοτική και πολύ συχνές αριθμητικές και δομικές εκτροπές.

[1], [2], [3], [4], [5], [6], [7]

Ευεργετική επίδραση των βλαστικών κυττάρων

Προκαταρκτικά αποτελέσματα κλινικών δοκιμών επιβεβαιώνουν την ωφέλιμη επίδραση των βλαστικών κυττάρων στον ασθενή, αλλά μέχρι στιγμής δεν υπάρχουν πληροφορίες σχετικά με τις μακροπρόθεσμες συνέπειες της μεταμόσχευσης κυττάρων. Στη βιβλιογραφία, αρχικά κυριαρχείται από τις εκθέσεις των θετικών αποτελεσμάτων της μεταμόσχευσης των θραυσμάτων του μυελού των εμβρύων στη νόσο του Πάρκινσον, αλλά στη συνέχεια άρχισαν να εμφανίζονται τα δεδομένα αρνείται αποτελεσματική θεραπευτικά αποτελέσματα των εμβρυϊκών ή εμβρυϊκών νευρικό ιστό μεταμοσχεύθηκαν σε εγκεφάλους ασθενών.

Στη μέση του ΧΧ αιώνα η αποκατάσταση της αιμοποίησης ανακαλύφθηκε για πρώτη φορά σε θανάσιμα ακτινοβολημένα ζώα μετά από ενδοφλέβια μετάγγιση των κυττάρων του μυελού των οστών, και το 1969 η Αμερικανική ερευνητής D. Thomas πραγματοποίησε την πρώτη του μυελού των οστών ανθρώπου μεταμόσχευση. Έλλειψη γνώσης σχετικά με τους μηχανισμούς της ανοσολογικής δότη μυελού οστών ασυμβατότητα και του λήπτη, ενώ προκάλεσε υψηλή θνησιμότητα λόγω των συχνών μοσχεύματος neprizhivleniya και αντίδραση ανάπτυξη «graft versus host». Η ανακάλυψη του μείζονος συμπλέγματος ιστοσυμβατότητας, η οποία αποτελείται από ανθρώπινο αντιγόνο λευκοκυττάρων (HbA), και τη βελτίωση των μεθόδων πληκτρολογώντας δυνατή την αύξηση σημαντικά το ποσοστό επιβίωσης μετά από μεταμόσχευση μυελού των οστών, η οποία οδήγησε στην ευρέως διαδεδομένη αυτή τη μέθοδο θεραπείας στην Ογκολογία και Αιματολογίας. Μετά από μια δεκαετία, πραγματοποιήθηκε η πρώτη μεταμόσχευση αιματοποιητικών βλαστικών κυττάρων (HSC) που ελήφθησαν από περιφερικό αίμα με τη βοήθεια λευκαφαίρεσης. Το 1988 στη Γαλλία για την θεραπεία ενός παιδιού με αναιμία Fanconi ως πηγή HSCs αυτό χρησιμοποιήθηκε για πρώτη φορά αίμα ομφάλιου λώρου, και το τέλος του 2000 στον Τύπο άρχισαν να εμφανίζονται σχετικά με την ικανότητα των HSCs να διαφοροποιηθούν σε κύτταρα διαφόρων τύπων ιστού που επεκτείνει δυνητικά το πεδίο της κλινικής εφαρμογής τους. Ωστόσο, αποδείχθηκε ότι το υλικό για μεταμόσχευση, μαζί με την GSK, περιέχει σημαντικό αριθμό μη αιμοποιητικών κυττάρων, τα οποία είναι ποικίλης φύσης και ιδιοτήτων. Σε σχέση με αυτό, αναπτύσσονται μέθοδοι καθαρισμού του μοσχεύματος και κριτήρια για την εκτίμηση της κυτταρικής καθαρότητάς του. Συγκεκριμένα, χρησιμοποιείται θετική ανοσοποίηση κυττάρων CD34 +, η οποία καθιστά δυνατή την απομόνωση του HSC με τη βοήθεια μονοκλωνικών αντισωμάτων.

[8], [9], [10], [11], [12]

Επιπλοκές της θεραπείας με βλαστοκύτταρα

Οι επιπλοκές της μεταμόσχευσης μυελού των οστών είναι συχνότερα αιματολογικές και συνδέονται με παρατεταμένη περίοδο ιατρογενικής πανκυτταροπενίας. Οι πιο συχνές λοιμώξεις είναι η αναιμία, η αναιμία και οι αιμορραγίες. Στο πλαίσιο αυτό, είναι πολύ σημαντικό το πώς να βρεθεί η βέλτιστη δειγματοληψία λειτουργία, την επεξεργασία και την αποθήκευση των του μυελού των οστών για τη μέγιστη διατήρηση των βλαστικών κυττάρων που παρέχουν μια ταχεία και σταθερή ανάκτηση της αιμοποίησης. Κατά τον χαρακτηρισμό του μοσχεύματος λαμβάνεται να εκτιμηθούν οι ακόλουθες παράμετροι είναι τώρα: ο αριθμός των μονοπύρηνων ή / και εμπύρηνα κύτταρα, και σχηματισμού αποικίας περιεχόμενο μονάδων SB34-θετικά κύτταρα. Δυστυχώς, αυτοί οι δείκτες παρέχουν μόνο μια έμμεση εκτίμηση της πραγματικής αιματοποιητικής ικανότητας του πληθυσμού μεταμοσχεύσεων βλαστικών κυττάρων. Για σήμερα, υπάρχουν απόλυτα ακριβείς παράμετροι για τον προσδιορισμό της επάρκειας του μοσχεύματος για τη μακροπρόθεσμη ανάρρωση της αιμοποίησης σε ασθενείς, ακόμα και σε αυτόλογη μεταμόσχευση μυελού των οστών. Η ανάπτυξη κοινών κριτηρίων είναι εξαιρετικά δύσκολη λόγω έλλειψης αυστηρών προτύπων επεξεργασίας, κρυοσυντήρησης και δοκιμών μοσχεύματος. Επιπλέον, είναι απαραίτητο να ληφθεί υπόψη η ποικιλία των παραγόντων που επηρεάζουν τις παραμέτρους της επιτυχούς ανάκτησης αιματοποίησης σε κάθε συγκεκριμένο ασθενή. Σε αυτόλογη μεταμόσχευση μυελού των οστών πιο σημαντικά από αυτά είναι ο αριθμός των προηγούμενα σχήματα, ιδιαίτερα θεραπείας προετοιμασίας, μια περίοδος της νόσου, η οποία παράγεται στην αποικία εφαρμογή σύστημα συλλογής μυελού οστού παράγοντες διέγερσης στην περίοδο μετά τη μεταμόσχευση. Επιπλέον, δεν πρέπει να ξεχνάμε ότι η χημειοθεραπεία που προηγείται εμβρυϊκού εμβολιασμού μπορεί να έχει αρνητική επίδραση στα βλαστοκύτταρα του μυελού των οστών.

Η συχνότητα εμφάνισης σοβαρών τοξικών επιπλοκών αυξάνεται σημαντικά με αλλογενή μεταμόσχευση μυελού των οστών. Σε αυτό το πλαίσιο, παρουσιάζουν ενδιαφέροντα στατιστικά στοιχεία σχετικά με τη μεταμόσχευση αλλογενικού μυελού των οστών στην περίπτωση της θαλασσαιμίας. Στις εκθέσεις της Ευρωπαϊκής Ομάδας Μεταμόσχευσης Μυελού των Οστών καταγράφηκαν περίπου 800 μεταμοσχεύσεις μυελού των οστών σε ασθενείς με μεγάλη θαλασσαιμία. Αλλογενή μεταμόσχευση σε θαλασσαιμία στις περισσότερες περιπτώσεις εκτελείται από HLA-ταυτόσημα αδέλφια, η οποία συνδέεται με σοβαρές επιπλοκές και υψηλότερη θνησιμότητα στην μεταμόσχευση υλικού βλαστικών κυττάρων που σχετίζονται εν μέρει συμβατά ή συμφωνημένα μη συγγενείς δότες. Για να ελαχιστοποιηθεί ο κίνδυνος θανατηφόρων μολυσματικών επιπλοκών, οι ασθενείς τοποθετούνται σε απομονωμένα δοχεία ασηπτικής συσκευασίας με στρωτή ροή αέρα, λαμβάνουν χαμηλή ή βακτηριακή διατροφή. Για την βακτηριακή απολύμανση του εντέρου per os προδιαγράφουν μη απορροφητικές μορφές αντιβιοτικών, αντιμυκητιασικά φάρμακα. Για να αποφευχθεί η ενδοφλέβια αμφοτερικίνη Β Πρόληψη των συστηματικών λοιμώξεων σταθερών αμικασίνη και κεφταζιδίμη, η οποία ορίζει την ημέρα πριν από τη μεταμόσχευση, ενώ συνεχίζεται η θεραπεία να εκπληρώσει τους ασθενείς. Όλα τα παρασκευάσματα αίματος πριν από την ακτινοβόληση ακτινοβολούνται σε δόση 30 Gy. Η παρεντερική διατροφή κατά τη διάρκεια της μεταμόσχευσης αποτελεί προϋπόθεση και αρχίζει αμέσως με τον περιορισμό της πρόσληψης τροφής φυσικά.

Ένας αριθμός των επιπλοκών που συνδέονται με την υψηλή τοξικότητα των ανοσοκατασταλτικών φαρμάκων, τα οποία συχνά προκαλούν ναυτία, έμετο και βλεννογονίτιδα, νεφρική βλάβη, και διάμεση πνευμονία. Μία από τις σοβαρότερες επιπλοκές της χημειοθεραπείας είναι η νευρο-αποφρακτική ασθένεια του ήπατος, που οδηγεί σε θάνατο στην πρώιμη μετα-μεταμόσχευση περίοδο. Μεταξύ των παραγόντων κινδύνου για φλεβική θρόμβωση του συστήματος πύλης του ήπατος πρέπει να σημειωθεί ηλικία του ασθενούς, παρουσία ηπατίτιδα και ηπατική ίνωση, και κρατώντας ανοσοκατασταλτική θεραπεία μετά από μεταμόσχευση μυελού των οστών. Venookklyuzionnaya ασθένεια είναι ιδιαίτερα επικίνδυνη σε θαλασσαιμία, η οποία συνοδεύεται από αιμοσιδήρωση ίνωση του ήπατος και η ηπατίτιδα - συχνές δορυφόρους trans-συγχωνευτικές θεραπεία. Φλεβική θρόμβωση του συστήματος πύλης του ήπατος αναπτύσσεται μέσα σε 1-2 εβδομάδες μετά την μεταμόσχευση και χαρακτηρίζεται από μία ταχεία αύξηση της χολερυθρίνης στο αίμα και των τρανσαμινασών, προοδευτική ηπατομεγαλία, ασκίτης, εγκεφαλοπάθεια, και πόνος στην άνω κοιλιακή χώρα. Ιστολογικά υλικό αυτοψίας ορίζεται στην ενδοθηλιακή βλάβη, υποενδοθηλιακή αιμορραγία, βλάβες tsentrolobulyarnyh ηπατοκύτταρα, θρομβωτική απόφραξη της ηπατικής φλεβίδια και η κεντρική φλέβα. Σε ασθενείς με θαλασσαιμία έχουν περιγραφεί περιπτώσεις θανατηφόρου καρδιακής ανακοπής που σχετίζονται με τοξικές επιδράσεις των κυτταροστατικών.

Κατά την προετοιμασία για μεταμόσχευση, το κυκλοφωσφαμίδιο και η βουσουλφάνη συχνά προκαλούν τοξική αιμορραγική κυστίτιδα με παθολογικές μεταβολές στα ουροεπιθηλιακά κύτταρα. Η χρήση της κυκλοσπορίνης Α στη μεταμόσχευση μυελού των οστών συχνά συνοδεύεται από επιδράσεις νεφρο- και νευροτοξικότητας, σύνδρομο υπέρτασης, κατακράτηση υγρών στο σώμα και κυτταρόλυση ηπατοκυττάρων. Η παραβίαση της σεξουαλικής και αναπαραγωγικής λειτουργίας παρατηρείται συχνότερα στις γυναίκες. Στα μικρά παιδιά μετά τη μεταμόσχευση, η εφηβική ανάπτυξη συνήθως δεν υποφέρει, αλλά στα μεγαλύτερα παιδιά η παθολογία της ανάπτυξης της γεννητικής σφαίρας μπορεί να είναι πολύ σοβαρή - μέχρι τη στειρότητα. Οι επιπλοκές που σχετίζονται άμεσα με το ίδιο το μόσχευμα περιλαμβάνουν απόρριψη αλλογενών κυττάρων μυελού των οστών, ασυμβατότητα στο σύστημα ΑΒΟ, οξείες και χρόνιες μορφές της αντίδρασης "μοσχεύματος έναντι ξενιστή".

Μέσα στον ασθενή μετά τη μεταμόσχευση ΑΒΟ-ασύμβατη μυελού των οστών τύπου idioagglutinin «ξενιστή έναντι ΑΒΟ δότη» που παράγονται εντός 330-605 ημέρες μετά τη μεταμόσχευση, η οποία μπορεί να οδηγήσει σε παρατεταμένη αιμόλυση και την απότομη αύξηση της ανάγκης για μεταγγίσεις αίματος. Η εν λόγω επιπλοκή εμποδίζεται από μετάγγιση των ομάδων ερυθροκυττάρων μόνο 0. Μετά την μεταμόσχευση σε έναν αριθμό ασθενών την αυτοάνοση ουδετεροπενία, θρομβοκυτταροπενία, πανκυτταροπενία, ή, για την διόρθωση που πρέπει να υποστούν σπληνεκτομή.

Σε 35-40% των αποδεκτών της οξείας αντίδρασης «graft versus host» αναπτύσσεται εντός 100 ημέρες μετά την μεταμόσχευση των αλλογενών αιμοσφαιρίνης-ταυτόσημα μυελού των οστών. Ο βαθμός των βλαβών του δέρματος, του ήπατος και των εντέρων ποικίλλει από εξάνθημα, υπερχολερυθριναιμία, διάρροια και ήπια έως την απολέπιση του δέρματος, εντερική απόφραξη, και οξεία ηπατική ανεπάρκεια. Ασθενείς με συχνότητα θαλασσαιμία οξεία αντίδραση «graft versus host» I βαθμό μετά από μεταμόσχευση μυελού των οστών είναι 75%, II και υψηλότερη έκταση - 11-53%. Χρόνια αντίδραση «graft versus host» ως μια συστημική πολυοργανική σύνδρομο συνήθως αναπτύσσεται μέσα σε 100-500 ημέρες μετά τη μεταμόσχευση αλλογονικού μυελού οστών σε 30-50% των ασθενών. Το δέρμα, το στόμα, το συκώτι, τα μάτια, ο οισοφάγος και το ανώτερο αναπνευστικό σύστημα επηρεάζονται. Διακρίνουν περιορισμένη μορφή χρόνιας αντίδρασης «μοσχεύματος κατά ξενιστή», όταν το προσβεβλημένο δέρμα και / ή το συκώτι, και ευρέως διαδεδομένη, γενικευμένες δερματικές αλλοιώσεις όταν συνδυάζεται με χρόνια επιθετική ηπατίτιδα, ασθένεια των ματιών, σιελογόνους αδένες ή οποιοδήποτε άλλο όργανο. Η αιτία θανάτου είναι συχνά οι μολυσματικές επιπλοκές που προκύπτουν από σοβαρή ανοσοανεπάρκεια. Σε θαλασσαιμία χρόνια ήπια μορφή της αντίδρασης «μοσχεύματος κατά ξενιστή» βρέθηκε στο 12%, μέτρια - 3% και σοβαρή - έχουν 0,9% των αποδεκτών των HLA-συμβατών αλλογονικού μυελού των οστών. Μια σοβαρή επιπλοκή στη μεταμόσχευση μυελού των οστών είναι η απόρριψη μοσχεύματος, η οποία αναπτύσσεται 50-130 ημέρες μετά την επέμβαση. Η συχνότητα απόρριψης εξαρτάται από τη λειτουργία κλιματισμού. Ειδικότερα, οι ασθενείς με θαλασσαιμία σε θεραπεία κατά τη διάρκεια της παρασκευής της και μόνο μεθοτρεξάτη, απόρριψη μοσχεύματος μυελού των οστών παρατηρείται στο 26% των περιπτώσεων, οι συνδυασμοί της μεθοτρεξάτης με κυκλοσπορίνη Α - 9%, και κατά την ανάθεση μόνο κυκλοσπορίνη Α - 8% των περιπτώσεων (Haziyev κ.λπ. ., 1995).

Λοιμώδεις επιπλοκές μετά τη μεταμόσχευση του μυελού των οστών που προκαλούνται από ιούς, βακτήρια και μύκητες. Η ανάπτυξή τους συνδέεται με βαθιά ουδετεροπενία, η οποία προκαλείται κατά τη διάρκεια της προετοιμασίας της χημειοθεραπείας, κυτταροστατικά ήττα του βλεννογόνου εμπόδια και αντίδραση «μοσχεύματος κατά του ξενιστή». Ανάλογα με την ώρα της ανάπτυξης, υπάρχουν τρεις φάσεις της λοίμωξης. Στην πρώτη φάση (ανάπτυξη κατά τον πρώτο μήνα μετά την μεταμόσχευση) κυριαρχείται από βλάβη στο φράγμα του βλεννογόνου και ουδετεροπενία, συχνά συνοδεύονται από ιογενείς λοιμώξεις (έρπης, ο ιός Epstein-Barr, τον κυτταρομεγαλοϊό, Varicella zoster), καθώς και μολύνσεων που προκαλούνται από grampolozhi - φλεγμονώδη και Gram-αρνητικών βακτηρίων, Candida μυκήτων , ασπεργιλλώματα. Κατά την πρώιμη περίοδο μετά τη μεταμόσχευση (η δεύτερη και η τρίτη μήνες μετά τη μεταμόσχευση) είναι η πιο σοβαρή λοίμωξη από κυτταρομεγαλοϊό, η οποία συχνά οδηγεί στο θάνατο των ασθενών κατά τη δεύτερη φάση της μόλυνσης. Η θαλασσαιμία λοίμωξη από κυτταρομεγαλοϊό μετά από μεταμόσχευση του μυελού των οστών συμβαίνει σε 1.7 με 4.4% των αποδεκτών. Η τρίτη φάση παρατηρείται στην όψιμη περίοδο μετά τη μεταμόσχευση (τρεις μήνες μετά την επέμβαση), και χαρακτηρίζεται από σοβαρή συνδυασμένη ανοσοανεπάρκεια. Αυτή η περίοδος βρίσκεται συνήθως λοιμώξεων που προκαλούνται από Varicella zoster, στρεπτόκοκκο, Pneumocystis Carini, Neisseria meningitidis, Haemophilus influenzae, και ηπατοτρόπων ιών. θνησιμότητα θαλασσαιμία σε ασθενείς μετά από μεταμόσχευση μυελού των οστών συνδέεται με βακτηριακές και μυκητιακές σήψη, ιδιοπαθής διάμεση πνευμονία και ο κυτταρομεγαλοϊός, σύνδρομο οξείας αναπνευστικής δυσχέρειας, οξείας καρδιακής ανεπάρκειας, καρδιακός επιπωματισμός, εγκεφαλική αιμορραγία, venookklyuzionnoy ηπατική νόσο και οξεία αντίδραση «graft versus host».

Προς το παρόν, έχει επιτευχθεί κάποια πρόοδος στην ανάπτυξη μεθόδων για την απομόνωση από τον μυελό των οστών ενός καθαρού πληθυσμού αιμοποιητικών κυττάρων στελεχών. Η τεχνική λήψης εμβρυϊκού αίματος από τον ομφάλιο λώρο έχει βελτιωθεί και έχουν αναπτυχθεί μέθοδοι για την απομόνωση κυττάρων που σχηματίζουν αίμα από αίμα ομφάλιου λώρου. Στον επιστημονικό Τύπο υπάρχουν αναφορές ότι όταν καλλιεργούνται σε μέσα με κυτοκίνες, τα αιματοποιητικά βλαστοκύτταρα είναι ικανά πολλαπλασιασμού. Όταν χρησιμοποιούνται ειδικά σχεδιασμένοι βιοαντιδραστήρες για την επέκταση του HSC, η βιομάζα αιμοποιητικών κυττάρων στελεχών που απομονώνονται από μυελό των οστών, περιφερικό αίμα ή αίμα ομφάλιου λώρου αυξάνεται σημαντικά. Η πιθανότητα επέκτασης του HSC είναι ένα σημαντικό βήμα στην κλινική ανάπτυξη της μεταμόσχευσης κυττάρων.

Ωστόσο, πριν από την αναπαραγωγή του HSC in vitro, είναι απαραίτητο να απομονωθεί ένας ομοιογενής πληθυσμός αιματοποιητικών βλαστικών κυττάρων. Αυτό επιτυγχάνεται συνήθως με τη χρήση δεικτών, επιτρέποντας να σηματοδοτήσει επιλεκτικά HSC μονοκλωνικά αντισώματα ομοιοπολικά συνδεδεμένο με μαγνητικά ή φθορίζουσα επισήμανση, και επιλέξτε τα με ένα κατάλληλο κύτταρο διαλογέα. Ταυτόχρονα, το ζήτημα των φαινοτυπικών χαρακτηριστικών των αιματοποιητικών βλαστικών κυττάρων δεν επιλύθηκε επιτέλους. Α Petrenko., V. Hryschenko (2003) ως υποψηφίων για GSK επεξεργασμένα κύτταρα, τα οποία είναι παρόντα στην επιφάνεια των CD34, AC133 και αντιγόνα Thyl και χωρίς CD38, HLA-DR και άλλους δείκτες διαφοροποίησης (κύτταρα με φαινότυπο CD34 + Liir). Με γραμμική δεικτών διαφοροποίησης (γράμμωσης, Lin) περιλαμβάνουν γλυκοφορίνη Α (GPA), CD3, CD4, CD8, CD10, CD14, CD16, CD19, CD20 (Muench, 2001). Θεωρείται πολλά υποσχόμενη για μεταμόσχευση των κυττάρων με τον φαινότυπο CD34 + CD45RalüW CD71low, καθώς και CD34 + Thyl + CD38low / c-kit / χαμηλή.

Το πρόβλημα του αριθμού των HSC που είναι επαρκές για αποτελεσματική μεταμόσχευση παραμένει ένα πρόβλημα. Επί του παρόντος, η πηγή των κυττάρων που σχηματίζουν αιμοφόρα αίτια είναι το μυελό των οστών, το περιφερικό και το ομφαλοπλακουντιακό καθώς και το εμβρυϊκό ήπαρ. Η επέκταση των αιμοποιητικών κυττάρων του στελέχους επιτυγχάνεται με καλλιέργεια αυτών με την παρουσία ενδοθηλιακών κυττάρων και αιμοποιητικών αυξητικών παραγόντων. Διαφορετικά πρωτόκολλα για την επαγωγή του πολλαπλασιασμού των HSC χρησιμοποιούνται mieloproteiny, SCF, ερυθροποιητίνη, ινσουλίνη αυξητικούς παράγοντες, κορτικοστεροειδή και οιστρογόνα. Όταν οι συνδυασμοί κυτοκινών χρησιμοποιούνται in vitro, μπορεί να επιτευχθεί μια σημαντική αύξηση της συγκέντρωσης HSC με μια κορυφή της απελευθέρωσής τους στο τέλος της δεύτερης εβδομάδας καλλιέργειας.

Παραδοσιακά, αίμα ομφάλιου λώρου HSC χρησιμοποιείται κυρίως σε αιμοβλαστώσεις. Ωστόσο, η ελάχιστη δόση αιμοποιητικών κυττάρων που είναι αναγκαία για την επιτυχή μεταμόσχευση κυττάρων αίματος ομφάλιου λώρου είναι 3,7 χ ¹⁰⁷ πυρήνια κύτταρα ανά 1 κιλό σωματικού βάρους του λήπτη. Η χρήση μικρότερης ποσότητας HSC αυξάνει σημαντικά τον κίνδυνο αποτυχίας μοσχεύματος και υποτροπής της νόσου. Επομένως, η μεταμόσχευση αιμοποιητικών κυττάρων αίματος ομφάλιου λώρου χρησιμοποιείται κυρίως για τη θεραπεία της αιμοβλάστωσης σε παιδιά.

Δυστυχώς, δεν υπάρχει ακόμη πρότυπο κενό, και τυποποιημένα πρωτόκολλα κλινική χρήση των αιμοποιητικών κυττάρων αίματος ομφάλιου λώρου. Κατά συνέπεια οι ίδιοι βλαστικά κύτταρα του αίματος του ομφάλιου λώρου δεν αναγνωρίζονται από το νόμο ως πηγή αιμοποιητικών βλαστικών κυττάρων για μεταμόσχευση. Επιπλέον, δεν υπάρχει καμία ηθική ή νομικών κανόνων που διέπουν τις δραστηριότητες και την οργάνωση των τραπεζών του ομφάλιου krovb που είναι διαθέσιμες στο εξωτερικό. Εν τω μεταξύ, για την ασφαλή μεταμόσχευση, όλα τα δείγματα αίματος του ομφάλιου λώρου θα πρέπει να παρακολουθούνται προσεκτικά. Προτού συλλεχθεί ένα δείγμα αίματος από έγκυο, πρέπει να ληφθεί η συγκατάθεσή του. Κάθε έγκυος πρέπει να εξετάζεται σε ένα φορείο του HBsAg, αντισωμάτων στον ιό της ηπατίτιδας C, τον ιό HIV, και σύφιλη. Κάθε δείγμα του αίματος του ομφάλιου λώρου θα πρέπει να δοκιμαστούν στο πρότυπο αριθμό των εμπύρηνων κυττάρων και CD34 + ικανότητα σχηματισμού αποικίας. Επιπλέον, HbA διεξάγεται δακτυλογράφηση, ομάδα αίματος ΑΒΟ και τη συμμετοχή της στην παράγοντα Rh. Οι διαδικασίες ελέγχου που απαιτούνται καλλιεργειών για βακτηριολογικές στειρότητας, ορολογικές δοκιμασίες για HIV-1 και η λοίμωξη HIV-2, HBsAg, τον ιό της ηπατίτιδας C, λοίμωξη από κυτταρομεγαλοϊό, ntly ntly-1 και-II, σύφιλη, τοξοπλάσμωση. Επιπλέον, διεξάγεται αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης για την ανίχνευση κυτταρομεγαλοϊού και λοίμωξης HIV. Κρίνεται σκόπιμο να συμπληρωθεί η ανάλυση των πρωτοκόλλων δοκιμών ομφάλιου HSCs αίματος ομφάλιου λώρου για την ταυτοποίηση τέτοιων γενετικές ασθένειες όπως η θαλασσαιμία και δρεπανοκυτταρική αναιμία, ανεπάρκεια απαμινάσης αδενοσίνης, αγαμμασφαιριναιμία Bruton, ασθένεια Harlera και παίκτης.

Στο επόμενο στάδιο προετοιμασίας για μεταμόσχευση, τίθεται το ζήτημα της διατήρησης της GSK. Τα πιο επικίνδυνα για τη βιωσιμότητα των κυττάρων κατά την παρασκευή τους είναι οι διαδικασίες κατάψυξης και απόψυξης. Κατά την κατάψυξη των αιμοποιητικών κυττάρων, ένα σημαντικό μέρος αυτών μπορεί να καταστραφεί λόγω σχηματισμού κρυστάλλων. Για τη μείωση του ποσοστού κυτταρικού θανάτου, χρησιμοποιούνται ειδικές ουσίες - κρυοπροστατευτικά. Πιο συχνά, ως κρυοπροστατευτικό, χρησιμοποιείται DMSO σε τελική συγκέντρωση 10%. Ωστόσο, για το DMSO, αυτή η συγκέντρωση χαρακτηρίζεται από ένα άμεσο κυτταροτοξικό αποτέλεσμα, το οποίο εκδηλώνεται ακόμη και υπό συνθήκες ελάχιστης έκθεσης. Μειωμένη κυτταροτοξικό αποτέλεσμα επιτυγχάνεται διατηρώντας ένα άκαμπτο λειτουργία έκθεσης και τη συμμόρφωση ρύθμιση υλικό επεξεργασίας μηδέν θερμοκρασία κατά τη διάρκεια και μετά την απόψυξη (ταχύτητα όλων των χειρισμών που εφαρμόζονται πολλαπλές διαδικασίες ξέπλυμα). Μην εφαρμόζετε συγκέντρωση DMSO μικρότερη από 5%, δεδομένου ότι σε αυτή την περίπτωση, ο θάνατος μαζών αιμοποιητικών κυττάρων εμφανίζεται κατά τη διάρκεια της περιόδου κατάψυξης.

Η παρουσία προσμείξεων ερυθρών αιμοσφαιρίων στο εναιώρημα GSK δημιουργεί τον κίνδυνο εμφάνισης αντίδρασης ασυμβατότητας για αντιγόνα ερυθροκυττάρων. Ταυτόχρονα, με την απομάκρυνση των ερυθροκυττάρων, η απώλεια αιματοποιητικών κυττάρων αυξάνεται σημαντικά. Στο πλαίσιο αυτό, προτάθηκε μια μέθοδος για τον μη διαχωρισμό του GCS. Σε αυτή την περίπτωση, για την προστασία των εμπύρηνων κυττάρων από τις βλαβερές συνέπειες των χαμηλών θερμοκρασιών με χρήση διαλύματος DMSO 10% και την ψύξη με σταθερή ταχύτητα (ΕΣ / min) έως -80 ° C, μετά το οποίο το κυτταρικό εναιώρημα καταψύχθηκε σε υγρό άζωτο. Πιστεύεται ότι με αυτή την τεχνική κρυοσυντήρησης λαμβάνει χώρα μερική λύση των ερυθροκυττάρων, επομένως τα δείγματα αίματος δεν απαιτούν κλασμάτωση. Πριν από τη μεταμόσχευση, το κυτταρικό εναιώρημα αποψύχεται, πλένεται χωρίς αιμοσφαιρίνη και DMSO σε διάλυμα ανθρώπινης αλβουμίνης ή ορού. Διατήρηση των αιμοποιητικών προγονικών χρήση αυτής της μεθόδου είναι πράγματι υψηλότερη από ότι μετά κλασμάτωση αίματος ομφάλιου λώρου, αλλά ο κίνδυνος των επιπλοκών λόγω της μετάγγισης του ΑΒΟ-ασύμβατη μεταγγίσεις ερυθροκυττάρων αποθηκεύονται.

Η δημιουργία ενός συστήματος τραπεζών για την αποθήκευση των δοκιμασμένων με HSC δειγμάτων και των δειγμάτων HSC θα μπορούσε να λύσει τα παραπάνω προβλήματα. Ωστόσο, για το σκοπό αυτό είναι απαραίτητο να αναπτυχθούν ηθικοί και νομικοί κανόνες, οι οποίοι εξακολουθούν να συζητούνται. Πριν από τη δημιουργία ενός τραπεζικού δικτύου, είναι απαραίτητο να θεσπιστούν ορισμένες διατάξεις και έγγραφα για την τυποποίηση των διαδικασιών δειγματοληψίας, κλασμάτωσης, δοκιμών και δακτυλογράφησης και κρυοσυντήρηση της GCW. Προϋπόθεση της αποτελεσματικής δράσης των τραπεζών GSK είναι η οργάνωση των βάσεων δεδομένων ηλεκτρονικών υπολογιστών για τη σχέση με τον μυελό των οστών του δότη καταγράφει World Association (WMDA) και το Εθνικό μυελό των οστών του δότη των μελών Πρόγραμμα των Ηνωμένων (NMDP).

Επιπλέον, είναι απαραίτητο να βελτιστοποιηθούν και να τυποποιηθούν οι μέθοδοι επέκτασης HSC in vitro, κυρίως αιμοποιητικών κυττάρων ομφαλοπλακουντιακού αίματος. Η αναπαραγωγή αίματος ομφάλιου λώρου HSC είναι απαραίτητη για την αύξηση του αριθμού των πιθανών παραληπτών που είναι συμβατοί με το σύστημα HLA. Λόγω των μικρών όγκων αίματος ομφάλιου λώρου, η ποσότητα HSC που περιέχεται σε αυτό, κατά κανόνα, δεν είναι σε θέση να παράσχει επαναπληθυσμό μυελού των οστών σε ενήλικες ασθενείς. Ταυτόχρονα, για τη διεξαγωγή μη σχετιζόμενων μεταμοσχεύσεων, είναι απαραίτητο να υπάρχει πρόσβαση σε επαρκή αριθμό τυπικών δειγμάτων GSK (από 10.000 έως 1.500.000 ανά 1 παραλήπτη).

Η μεταμόσχευση αιμοποιητικών κυττάρων στελεχών δεν εξαλείφει επιπλοκές που συνοδεύουν τη μεταμόσχευση μυελού των οστών. Η ανάλυση δείχνει ότι στη μεταμόσχευση βλαστικών κυττάρων του ομφαλίου λώρου, οι σοβαρές μορφές της οξείας αντίδρασης "μοσχεύματος έναντι ξενιστή" αναπτύσσονται σε 23%, χρόνιες σε 25% των ασθενών. Σε ογκοεμφυτευτικούς ασθενείς παρατηρήθηκαν υποτροπές οξείας λευχαιμίας κατά το πρώτο έτος μετά τη μεταμόσχευση αίματος ομφάλιου λώρου HSC στο 26% των περιπτώσεων.

Τα τελευταία χρόνια, οι μέθοδοι μεταμόσχευσης περιφερικών αιματοποιητικών βλαστικών κυττάρων αναπτύσσονται εντατικά. Η περιεκτικότητα του HSC στο περιφερικό αίμα είναι τόσο μικρή (υπάρχουν 1 GSK ανά 100.000 κύτταρα αίματος), ότι η απομόνωσή τους χωρίς ειδική προετοιμασία δεν έχει νόημα. Ως εκ τούτου, ο δότης έχει προηγουμένως λάβει μια πορεία διέγερσης από το φάρμακο για την απελευθέρωση αιματοποιητικών κυττάρων μυελού των οστών μέσα στο αίμα. Για το σκοπό αυτό, χρησιμοποιούνται τόσο μακριά αβλαβή φάρμακα όπως ο κυκλοφωσφαμίδιο και ο παράγοντας διέγερσης αποικιών κοκκιοκυττάρων. Αλλά ακόμη και μετά τη διαδικασία κινητοποίησης HSC στο περιφερικό αίμα, το περιεχόμενο των κυττάρων CD34 + δεν υπερβαίνει το 1,6%.

Για την κινητοποίηση του HSC στην κλινική χρησιμοποιείται συνηθέστερα το C-CEC, το οποίο χαρακτηρίζεται από σχετικά καλή ανεκτικότητα, με εξαίρεση την σχεδόν τακτική εμφάνιση του πόνου στα οστά. Πρέπει να σημειωθεί ότι η χρήση σύγχρονων διαχωριστών αίματος μας επιτρέπει να απομονώσουμε αποτελεσματικά τους βλαστούς προγόνους αιματοποίησης. Ωστόσο, υπό συνθήκες φυσιολογικής αιμοποίησης, πρέπει να εκτελούνται τουλάχιστον 6 διαδικασίες για την απόκτηση επαρκούς αριθμού αιμοποιητικών βλαστοκυττάρων, συγκρίσιμων με την ικανότητα αποκαταστάσεως του πολτού μυελού των οστών. Με κάθε τέτοια διαδικασία, ο διαχωριστής επεξεργάζεται 10-12 λίτρα αίματος, που μπορεί να προκαλέσει θρομβοπενία και λευκοπενία. Η διαδικασία διαχωρισμού περιλαμβάνει τη χορήγηση αντιπηκτικού (κιτρικού νατρίου) στον δότη, ο οποίος όμως δεν αποκλείει την επαφή με την ενεργοποίηση των αιμοπεταλίων κατά τη διάρκεια της εξωσωματικής φυγοκέντρησης. Αυτοί οι παράγοντες δημιουργούν συνθήκες για την ανάπτυξη μολυσματικών και αιμορραγικών επιπλοκών. Ένα άλλο μειονέκτημα της μεθόδου έγκειται στη σημαντική μεταβλητότητα στην απόκριση κινητοποίησης, η οποία απαιτεί την παρακολούθηση του περιεχομένου του HSC στους δωρητές περιφερικού αίματος, που είναι απαραίτητο για τον προσδιορισμό του μέγιστου επιπέδου τους.

Η αυτόλογη μεταμόσχευση HSC, σε αντίθεση με την αλλογενή, αποκλείει εντελώς την ανάπτυξη της αντίδρασης απόρριψης. Ωστόσο, ένα σημαντικό μειονέκτημα της αυτόλογης μεταμόσχευσης αιμοποιητικών βλαστικών κυττάρων, περιορίζοντας το φάσμα των ενδείξεων για τη συμπεριφορά της, είναι μια μεγάλη πιθανότητα επανέγχυση των κυττάρων λευχαιμικών κλώνος με μεταμόσχευση. Επιπροσθέτως, η έλλειψη ανοσομεσολαβούμενου αποτελέσματος "μοσχεύματος έναντι όγκου" αυξάνει σημαντικά τη συχνότητα των υποτροπών της κακοήθους νόσου του αίματος. Ως εκ τούτου, ο μόνος τρόπος για ριζική εξάλειψη της κλωνικής αιμοποιητικών νεοπλασματικών και αποκατάσταση της φυσιολογικής πολυκλωνικό αιματοποίηση ίη μυελοδυσπλαστικά σύνδρομα είναι εντατική χημειοθεραπεία με αλλογενή μεταμόσχευση HSC.

Αλλά ακόμη και σε αυτή την περίπτωση, η θεραπεία για τις περισσότερες αιμοβλαστώσεις αποσκοπεί μόνο στην αύξηση του χρόνου επιβίωσης των ασθενών και στη βελτίωση της ποιότητας ζωής τους. Σύμφωνα με αρκετές μεγάλες μελέτες, η παρατεταμένη επιβίωση χωρίς νόσο μετά την μεταμόσχευση HSC επιτυγχάνεται σε 40% των ασθενών με ογκοεμφυτευτική νόσο. Όταν χρησιμοποιούνται βλαστικά κύτταρα συμβατού με HbA, τα καλύτερα αποτελέσματα παρατηρούνται σε νεαρούς ασθενείς με σύντομο ιστορικό της νόσου, τον αριθμό των βλαστικών κυττάρων έως 10% και ευνοϊκά κυτταρογενετικά. Δυστυχώς, η θνησιμότητα που σχετίζεται με τη διαδικασία για τη μεταμόσχευση HSC σε ασθενείς με μυελοδυσπλαστικές ασθένειες παραμένει υψηλή (στις περισσότερες αναφορές - περίπου 40%). Τα αποτελέσματα 10 ετών εργάζονται Εθνικό Πρόγραμμα ΗΠΑ δωρεά μυελού των οστών (510 ασθενείς, η μέση ηλικία - 38 ετών) δείχνουν ότι η επιβίωση ελεύθερη νόσου είναι 29% μέσα σε δύο χρόνια σε σχετικά χαμηλή πιθανότητα υποτροπής (14%). Ωστόσο, η θνησιμότητα που προκαλείται από τη διαδικασία της μεταμόσχευσης της GSC από έναν μη συνδεδεμένο δότη είναι εξαιρετικά υψηλή και φτάνει το 54% σε διάστημα δύο ετών. Παρόμοια αποτελέσματα αποκτήθηκαν στην ευρωπαϊκή μελέτη (118 ασθενείς, μέση ηλικία 24 ετών, επιβίωση χωρίς υποτροπή 2 ετών, 28%, υποτροπή 35%, θνησιμότητα 58%).

Κατά τη διεξαγωγή εντατική χημειοθεραπεία που ακολουθείται από αναγωγή των αλλογενών αιμοποιητικών κυττάρων gemopo- ηθικά συχνά προκύπτουν immunohematology και τη μετάγγιση επιπλοκές. Με πολλούς τρόπους, σχετίζονται με το γεγονός ότι οι ομάδες αίματος στους ανθρώπους κληρονομούνται ανεξάρτητα από τα μόρια MHC. Συνεπώς, ακόμη και αν ο δότης και ο λήπτης είναι συμβατοί με τα κύρια αντιγόνα HLA, τα ερυθροκύτταρα τους μπορεί να έχουν διαφορετικό φαινότυπο. Κατανείμετε «μεγάλα» ασυμβατότητα όταν προϋπάρχω στο αντίσωμα-αποδέκτη σε αντιγόνα του δότη ερυθρών αιμοσφαιρίων, και «μικρό», όταν τα αντισώματα δότη σε αντιγόνα των ερυθρών κυττάρων του αίματος του αποδέκτη. Υπάρχουν περιπτώσεις συνδυασμού "μεγάλων" και "μικρών" ασυμβίβαστων.

Τα αποτελέσματα της συγκριτικής ανάλυσης της κλινικής αποτελεσματικότητας του μυελού των οστών και αιμοποιητικών βλαστικών κυττάρων του ομφάλιου αλλομοσχευμάτων αίματος σε αιματολογικές κακοήθειες υποδεικνύει ότι το αίμα λώρου παιδιά αλλομεταμόσχευση GSK μείωσε σημαντικά τον κίνδυνο της αντίδρασης «μόσχευμα έναντι ξενιστού», αλλά υπάρχει μια μακρύτερη περίοδο ανάκτησης των ουδετερόφιλων και αιμοπεταλίων υψηλότερη συχνότητα μετά από μεταμόσχευση θνησιμότητας 100 ημερών.

Η μελέτη των αιτιών της πρώιμης θνησιμότητας κατέστησε δυνατή την αποσαφήνιση των αντενδείξεων στην αλλογενή μεταμόσχευση της GSK, μεταξύ των οποίων οι σημαντικότερες είναι:

• παρουσία στον θεράποντα ή δότη θετικών δοκιμών για μόλυνση από κυτταρομεγαλοϊό (χωρίς να προληφθεί η προληπτική θεραπεία) ·
• οξεία ασθένεια ακτινοβολίας.
• την παρουσία ή ακόμη και την υποψία παρουσίας μυκοτικής μόλυνσης στον ασθενή (χωρίς συστηματική πρώιμη προφύλαξη με μυκητοκτόνα φάρμακα).
• αιμοβλαστώσεις, στις οποίες οι ασθενείς έλαβαν παρατεταμένη θεραπεία με κυτταροστατικά (λόγω της μεγάλης πιθανότητας αιφνίδιας καρδιακής ανακοπής και πολλαπλής ανεπάρκειας οργάνων).
• μεταμόσχευση από HLA-μη ταυτόσημους δότες (χωρίς πρόληψη της οξείας αντίδρασης "μεταμόσχευσης κατά ξενιστή" από την κυκλοσπορίνη Α).
• χρόνια ιογενή ηπατίτιδα C (λόγω του υψηλού κινδύνου εμφάνισης φλεβο-αποφρακτικής νόσου του ήπατος).

Έτσι, η μεταμόσχευση GSK μπορεί να προκαλέσει σοβαρές επιπλοκές, οι οποίες συχνά οδηγούν σε θάνατο. Στις αρχές της δεκαετίας (έως και 100 ημέρες μετά την μεταμόσχευση) περιόδου αυτές περιλαμβάνουν λοιμώδεις επιπλοκές, οξεία αντίδραση «μόσχευμα έναντι ξενιστού», απόρριψη μοσχεύματος (neprizhivlenie HSC δότης), venookklyuzionnaya ηπατική νόσο, καθώς και λόγω της τοξικότητας θεραπείας προετοιμασίας, βλάβη των ιστών, για την οποία η υψηλή χαρακτηριστική την ταχύτητα της αναδιαμόρφωσης (δέρμα, αγγειακό ενδοθήλιο, εντερικό επιθήλιο). Επιπλοκές της καθυστερημένης περίοδο μετά τη μεταμόσχευση περιλαμβάνουν χρόνια αντίδραση του «μοσχεύματος κατά ξενιστή» υποτροπή της υποκείμενης νόσου, επιβράδυνση της ανάπτυξης σε παιδιά, μειωμένη αναπαραγωγική λειτουργία και τη νόσο του θυρεοειδούς ματιών.

Πρόσφατα, σε σχέση με την εμφάνιση δημοσιεύσεων σχετικά με την πλαστικότητα των κυττάρων μυελού των οστών, έχει προκύψει η ιδέα της χρήσης της GSK για τη θεραπεία καρδιακών προσβολών και άλλων ασθενειών. Αν και ορισμένα πειράματα σε ζώα υποστηρίζουν αυτή τη δυνατότητα, πρέπει να επιβεβαιωθούν τα συμπεράσματα σχετικά με την πλαστικότητα των κυττάρων μυελού των οστών. Αυτή η περίσταση πρέπει να ληφθεί υπόψη από τους ερευνητές που πιστεύουν ότι τα μεταμοσχευμένα κύτταρα του ανθρώπινου μυελού των οστών μετασχηματίζονται εύκολα σε κύτταρα σκελετικών μυών, μυοκαρδίου ή ΚΝΣ. Η υπόθεση ότι οι GSKs είναι μια φυσική κυτταρική πηγή αναγέννησης αυτών των οργάνων απαιτεί σοβαρά στοιχεία.

Ειδικότερα, δημοσίευσε τα πρώτα αποτελέσματα μιας ανοικτής τυχαιοποιημένη μελέτη Belenkova V. (2003), των οποίων ο σκοπός - να μελετήσει την επίδραση της C-SIS (δηλαδή, κινητοποίηση του αυτόλογου HSCs αίματος) σε κλινικές, αιμοδυναμικές και νευροχυμικές κατάσταση των ασθενών με μέτρια έως σοβαρή χρόνια καρδιακή ανεπάρκεια, καθώς επίσης και η αξιολόγηση ασφάλειας με την καθιερωμένη θεραπεία (αναστολείς ΜΕΑ, βήτα-αναστολείς, διουρητικά, καρδιακά γλυκοσίδια). Η πρώτη δημοσίευση των αποτελεσμάτων των συντακτών του ερευνητικού προγράμματος σημειώνουν ότι το μόνο επιχείρημα υπέρ της O-CBP είναι τα αποτελέσματα της θεραπείας ενός ασθενούς ο οποίος κατά τη διάρκεια της θεραπείας με αυτό το φάρμακο βρέθηκε αδιαμφισβήτητη βελτίωση σε όλες τις κλινικές και αιμοδυναμικές παραμέτρους. Ωστόσο, η θεωρία της κινητοποίησης HSCs στην κυκλοφορία του αίματος που ακολουθείται από αναγέννηση του μυοκαρδίου στη ζώνη μετά το έμφραγμα, δεν έχει επιβεβαιωθεί - ακόμη και σε ασθενείς με ένα θετικό κλινικό δυναμική της ηχοκαρδιογραφίας στρες με δοβουταμίνη δεν αποκάλυψε την ανάδειξη βιώσιμων μυοκάρδιο στους τομείς ουλή του γηπέδου.

Θα πρέπει να σημειωθεί ότι, μέχρι σήμερα, τα δεδομένα που επιτρέπουν να προτείνεται υποκαταστατική κυτταρική θεραπεία για ευρεία εισαγωγή στην καθημερινή κλινική πρακτική είναι σαφώς ανεπαρκής. Μια καλά δημιουργημένο και ποιοτική απόδοση των κλινικών μελετών για να προσδιοριστεί η αποτελεσματικότητα των διαφόρων επιλογών της αναγεννητικής κυτταρική θεραπεία, την ανάπτυξη των ενδείξεις και αντενδείξεις σε αυτό, καθώς και κατευθυντήριες γραμμές σχετικά με τη συνδυασμένη χρήση της αναγεννητικής και πλαστικών θεραπεία και συμβατική χειρουργική ή συντηρητική θεραπεία. Μέχρι στιγμής, καμία απάντηση στο ερώτημα του τι είδους ενός πληθυσμού κυττάρων μυελού των οστών (βλαστικά αιμοποιητικά ή στρωματική) μπορεί να προκαλέσει νευρώνες και καρδιομυοκύτταρα, και δεν είναι σαφές ποια συνθήκες συμβάλλουν σε αυτή την ίη νίνο.

Η εργασία σε αυτούς τους τομείς διεξάγεται σε πολλές χώρες. Στην περίληψη του συμποσίου οξεία ηπατική ανεπάρκεια οι ΗΠΑ Εθνικά Ινστιτούτα Υγείας μεταξύ των υποσχόμενες μέθοδοι θεραπείας, μαζί με μεταμόσχευση ήπατος, μεταμόσχευση σημειώνονται σύνδεση ξένον ή αλλογενή ηπατοκύτταρα και in vitro βιοαντιδραστήρες με τα κύτταρα του ήπατος. Υπάρχει άμεση ένδειξη ότι μόνο ξένα, λειτουργικά ενεργά ηπατοκύτταρα μπορούν να παρέχουν αποτελεσματική υποστήριξη στο ήπαρ του λήπτη. Για κλινική χρήση των απομονωμένων ηπατοκυττάρων απαραίτητο να δημιουργηθεί μια τράπεζα κυττάρων, η οποία θα μειώσει σημαντικά το χρόνο μεταξύ της απελευθέρωσης των κυττάρων και τη χρήση τους. Το πλέον αποδεκτό για δημιουργία μίας τράπεζας απομονωμένων ηπατοκυττάρων είναι η κρυοσυντήρηση των ηπατικών κυττάρων σε υγρό άζωτο. Η χρήση τέτοιων κυττάρων στην κλινική για ασθενείς με οξεία και χρόνια ηπατική νόσο αποκάλυψε ένα επαρκώς υψηλό θεραπευτικό αποτέλεσμα.

Παρά την αισιοδοξία και ενθαρρυντικά αποτελέσματα της μεταμόσχευσης κυττάρων του ήπατος σε πειράματα και κλινικές, υπάρχουν ακόμα πολλά προβλήματα που εξακολουθούν να απέχουν πολύ από το να λυθεί. Αυτές περιλαμβάνουν την περιορισμένη ποσότητα κατάλληλων φορέων για τη λήψη απομονωμένα ηπατοκύτταρα ανεπαρκώς αποτελεσματικές μεθόδους διαχωρισμού, την έλλειψη τυποποιημένων μεθόδων διατήρησης κυττάρων του ήπατος fuzzy κατανόηση των μηχανισμών ρύθμισης της ανάπτυξης και του πολλαπλασιασμού των μεταμοσχευμένων κυττάρων, η έλλειψη κατάλληλης αξιολόγησης μεθόδων εμφύτευση ή την απόρριψη του αλλογενούς ηπατοκυττάρων. Αυτό, επίσης, θα πρέπει να περιλαμβάνουν την παρουσία της ανοσίας μεταμόσχευσης χρησιμοποιώντας αλλογενή ή ξενογενή κύτταρα, αν και λιγότερο από ό, τι σε ορθοτοπική μεταμόσχευση ήπατος, αλλά απαιτούν την εφαρμογή ανοσοκατασταλτικών παραγόντων, ενθυλάκωσης απομονωμένα ηπατοκύτταρα ή ειδικά ένζυμα επεξεργασίας. Μεταμόσχευση ηπατοκυττάρων οδηγεί συχνά σε ένα ανοσοποιητικό συγκρούσεις μεταξύ λήπτη και του δότη σε μία αντίδραση απόρριψης, η οποία απαιτεί τη χρήση των κυτταροστατικών φαρμάκων. Μία λύση σε αυτό το πρόβλημα είναι να χρησιμοποιηθεί πολυμερές μικροπορώδη media για να απομονωθούν τα κύτταρα του ήπατος, η οποία θα βελτιώσει την επιβίωση τους, δεδομένου ότι η μεμβράνη της κάψουλας προστατεύει αποτελεσματικά τα ηπατοκύτταρα, παρά την ανοσοποίηση ξενιστή.

Ωστόσο, στην οξεία ηπατική ανεπάρκεια, όπως η μεταμόσχευση ηπατοκυττάρου δεν έχει κανένα αποτέλεσμα, λόγω της αρκετά μεγάλο χρονικό διάστημα που απαιτείται για την εμφύτευση των κυττάρων του ήπατος στο νέο περιβάλλον με πρόσβαση σε ένα βήμα τη βέλτιστη λειτουργία. Ένας πιθανός περιορισμός είναι η έκκριση της χολής έκτοπης μεταμόσχευση των απομονωμένων ηπατοκυττάρων, και κατά τη χρήση βιοαντιδραστήρες ουσιώδη φυσιολογικού φραγμού δρα ασυμφωνία ειδών μεταξύ ανθρώπινες πρωτεΐνες και πρωτεΐνες που παράγουν ξενογενή ηπατοκύτταρα.

Στη βιβλιογραφία υπάρχουν αναφορές ότι η τοπική μεταμόσχευση μυελού των οστών στρωματικά αρχέγονα κύτταρα διευκολύνει αποτελεσματική διόρθωση των ελαττωμάτων των οστών, και την αποκατάσταση των οστών στην περίπτωση αυτή είναι πιο εντατική από ό, τι στην αυθόρμητη επανορθωτική αναγέννηση. Σε αρκετές προκλινικές μελέτες σε ζωικά μοντέλα έχουν καταδείξει πειστικά τη δυνατότητα χρησιμοποιήσεως μοσχευμάτων των στρωματικών κυττάρων του μυελού των οστών στην ορθοπεδική, αν και για τη βελτιστοποίηση αυτών των μεθόδων, ακόμη και στις απλούστερες περιπτώσεις, απαιτείται περαιτέρω εργασία. Συγκεκριμένα, οι βέλτιστες συνθήκες για την επέκταση των οστεογονικών στρωματικών κυττάρων ex vivo δεν έχουν ακόμη βρεθεί, η δομή και η σύνθεση του ιδανικού φορέα (μήτρας) παραμένουν ακατέργαστες. Δεν προσδιορίζεται ο ελάχιστος αριθμός κυττάρων που απαιτούνται για την αναγέννηση των οστών.

Απέδειξε ότι τα μεσεγχυματικά βλαστικά κύτταρα εμφανίζουν transgermalnuyu πλαστικότητα - την ικανότητα να διαφοροποιούνται σε τύπους κυττάρων που φαινοτυπικά δεν σχετίζονται με την αρχική κυτταρική γραμμή. Κάτω από ιδανικές συνθήκες πολύκλωνη γραμμή βλαστοκυττάρων καλλιέργειας στρωματικών κυττάρων μυελού των οστών διατηρούνται in vitro για περισσότερα από 50 διαιρέσεων, η οποία καθιστά δυνατή τη λήψη τα δισεκατομμύρια των στρωματικών κυττάρων από 1 ml από αναρρόφηση μυελού των οστών. Ωστόσο, ο πληθυσμός των μεσεγχυματικών βλαστικών κυττάρων που χαρακτηρίζεται από ετερογένεια, η οποία εκδηλώνεται ως μεταβλητότητα σε μεγέθη αποικιών, διαφορετικές ταχύτητες του σχηματισμού και μορφολογική ποικιλία κυτταρικών τύπων - από παρόμοια με ινοβλάστη σχήμα ατράκτου με μεγάλες επίπεδες κύτταρα. Εντός 3 εβδομάδων από βλαστικά κύτταρα καλλιέργειας στρωματικών παρατηρήθηκαν φαινοτυπικές ετερογένεια: μία αποικία οζίδια του ιστού των οστών που σχηματίζουν, ενώ άλλοι - συστάδες λιποκυττάρων, και άλλα, πιο σπάνια, σχηματίζοντας νησιά του χόνδρου.

Για τη θεραπεία εκφυλιστικών νόσων του κεντρικού νευρικού συστήματος χρησιμοποιήθηκε για πρώτη φορά μεταμόσχευση εμβρυϊκού νευρικού ιστού. Τα τελευταία χρόνια, αντί των εμβρυϊκών μεταμόσχευσης χάλυβα εγκεφαλικό ιστό κυτταρικά στοιχεία νευροσφαιρών που προέρχονται από νευρικά βλαστικά κύτταρα (.Poltavtseva, 2001). Τα νευροσφαίρια περιέχουν δεσμευμένα νευρικά πρόδρομα και νευρογλία - αυτό δίνει ελπίδα για αποκατάσταση χαμένων λειτουργιών του εγκεφάλου μετά τη μεταμόσχευση. Μετά τη μεταμόσχευση των κυττάρων για να νευροσφαιρών διεσπαρμένα σώμα αρουραίου ραβδωτού σώματος του εγκεφάλου που σημειώνονται πολλαπλασιασμό και την διαφοροποίηση τους σε ντοπαμινεργικούς νευρώνες, η οποία εξαλείφει ασυμμετρία κινητήρα σε αρουραίους με πειραματική gemiparkinsonizmom. Ωστόσο, σε ορισμένες περιπτώσεις, από νευροσφαιρών κύτταρα ανέπτυξαν όγκους, η οποία οδήγησε στο θάνατο των ζώων (Bjorklund, 2002).

Η κλινική προσεκτική μελέτη των δύο ομάδων των ασθενών στους οποίους ούτε οι ασθενείς ούτε οι γιατροί γνώριζαν τους (διπλή-τυφλή) βλέποντας, ότι μία ομάδα ασθενών που μεταμοσχεύονται εμβρυϊκό ιστό με νευρώνες που παράγουν ντοπαμίνη, μια δεύτερη ομάδα ασθενών έκανε ένα στραβοπάτημα, έδωσε απροσδόκητα αποτελέσματα . Οι ασθενείς που μεταμοσχεύθηκαν με εμβρυϊκό νευρικό ιστό δεν αισθάνονται καλύτερα από τους ασθενείς της ομάδας ελέγχου. Επιπλέον, 5 από 33 ασθενείς μετά από 2 χρόνια μετά τη μεταμόσχευση των εμβρυϊκών νευρικού ιστού αναπτυχθεί επίμονη δυσκινησία, η οποία δεν είχε καμία ομάδα ασθενών ελέγχου (Βλαστοκύτταρα: επιστημονική πρόοδο και τις μελλοντικές ερευνητικές κατευθύνσεις Nat Inst, της υγείας των ΗΠΑ ...). Ένα από τα άλυτα προβλήματα των κλινικών μελετών των νευρικών βλαστικών κυττάρων του εγκεφάλου είναι η ανάλυση των πραγματικές προοπτικές και τους περιορισμούς των παραγώγων τους μεταμόσχευσης για τη διόρθωση των διαταραχών του ΚΝΣ. Είναι πιθανό η παρατεταμένη επιληπτική δραστηριότητα που επάγεται neyronogenez στον ιππόκαμπο, που οδηγεί σε δομικές και λειτουργικές αλλαγές της μπορεί να είναι ένας παράγοντας στην προοδευτική ανάπτυξη της επιληψίας. Το συμπέρασμα αυτό είναι ιδιαίτερα αξιοσημείωτο, όπως επισημαίνει με τις πιθανές αρνητικές επιπτώσεις της παραγωγής νέων νευρώνων στον ενήλικα εγκέφαλο, και το σχηματισμό των μη-φυσιολογικών συναπτικές συνδέσεις.

Δεν πρέπει να ξεχνάμε ότι στα μέσα ενημέρωσης καλλιέργειας με κυτοκίνες (μιτογόνα) προσεγγίζει τα χαρακτηριστικά των αρχέγονων κυττάρων με εκείνη των κυττάρων όγκου, όπως απαντώνται κοντά στις αλλαγές στη ρύθμιση των κυτταρικών κύκλων, τον προσδιορισμό της ικανότητας να διαιρούνται απεριόριστα. Από αμέλεια μεταμοσχευμένων ανθρώπινων νωρίς προέρχονται εμβρυϊκά βλαστικά κύτταρα, δεδομένου ότι στην περίπτωση αυτή ο κίνδυνος της κακοήθειας είναι πολύ υψηλό. Είναι πολύ πιο ασφαλές να χρησιμοποιήσουμε τους περισσότερο αφοσιωμένους απογόνους τους, δηλαδή προγονικά κύτταρα διαφοροποιημένων γραμμών. Ωστόσο, επί του παρόντος δεν έχει ακόμη αναπτυχθεί μια αξιόπιστη τεχνική για τη λήψη σταθερών ανθρώπινων κυτταρικών σειρών που να διαφοροποιούνται προς τη σωστή κατεύθυνση.

Η χρήση τεχνολογιών μοριακής βιολογίας για τη διόρθωση κληρονομικής παθολογίας και ανθρώπινων παθήσεων με τη βοήθεια της τροποποίησης των βλαστικών κυττάρων έχει μεγάλο ενδιαφέρον για την πρακτική ιατρική. Χαρακτηριστικά του γονιδιώματος των βλαστικών κυττάρων επιτρέπουν την ανάπτυξη μοναδικών σχεδίων μεταμόσχευσης με σκοπό τη διόρθωση γενετικών ασθενειών. Αλλά προς αυτή την κατεύθυνση υπάρχουν επίσης ορισμένοι περιορισμοί που πρέπει να ξεπεραστούν πριν αρχίσει η πρακτική εφαρμογή της γενετικής μηχανικής των βλαστικών κυττάρων. Πρώτα απ 'όλα, είναι απαραίτητο να βελτιστοποιηθεί η διαδικασία τροποποίησης γονιδιώματος βλαστικών κυττάρων ex νίνο. Είναι γνωστό ότι ένας παρατεταμένος (3-4 εβδομάδες) πολλαπλασιασμός των βλαστικών κυττάρων μειώνει τη διαμόλυσή τους, έτσι είναι απαραίτητοι αρκετοί κύκλοι διαμόλυνσης για να επιτευχθεί ένα υψηλό επίπεδο γενετικής τροποποίησης. Ωστόσο, το κύριο πρόβλημα σχετίζεται με τη διάρκεια έκφρασης του θεραπευτικού γονιδίου. Μέχρι τώρα, σε καμία από τις μελέτες, η περίοδος αποτελεσματικής έκφρασης μετά τη μεταμόσχευση των τροποποιημένων κυττάρων δεν ξεπέρασε τους τέσσερις μήνες. Σε 100% των περιπτώσεων με την πάροδο του χρόνου, η έκφραση των επιμολυσμένων γονιδίων μειώνεται λόγω αδρανοποίησης προαγωγών και / ή θανάτου κυττάρων με τροποποιημένο γονιδίωμα.

Ένα σημαντικό πρόβλημα είναι το κόστος χρήσης των κυτταρικών τεχνολογιών στην ιατρική. Για παράδειγμα, η εκτιμώμενη ετήσια απαίτηση χρηματοδότησης για τα ιατρικά έξοδα ενός τμήματος μεταμόσχευσης μυελού των οστών, που έχει σχεδιαστεί για την εκτέλεση 50 μεταμοσχεύσεων ετησίως, είναι περίπου 900.000 δολάρια.

Η ανάπτυξη κυτταρικών τεχνολογιών στην κλινική ιατρική είναι μια πολύπλοκη και πολυβάθμια διαδικασία που περιλαμβάνει την εποικοδομητική συνεργασία πολυεπιστημονικών επιστημονικών και κλινικών κέντρων και της διεθνούς κοινότητας. Ταυτόχρονα, δίδεται ιδιαίτερη προσοχή στην επιστημονική οργάνωση της έρευνας στον τομέα της κυτταροθεραπείας. Τα σημαντικότερα από αυτά είναι η ανάπτυξη πρωτοκόλλων για κλινικές δοκιμές, η παρακολούθηση της εγκυρότητας των κλινικών δεδομένων, η δημιουργία ενός εθνικού μητρώου έρευνας, η ενσωμάτωση σε διεθνή προγράμματα πολυκεντρικών κλινικών δοκιμών και η εισαγωγή αποτελεσμάτων στην κλινική πρακτική.

Ολοκληρώνοντας την εισαγωγή σε θέματα μεταμόσχευσης κυττάρων, θα ήθελα να εκφράσω την ελπίδα ότι οι κοινές προσπάθειες από τους κορυφαίους εμπειρογνώμονες της Ουκρανίας από διάφορους τομείς της επιστήμης θα εξασφαλίσει σημαντική πρόοδο σε πειραματικές και κλινικές μελέτες και θα επιτρέψει τα επόμενα χρόνια να βρουν αποτελεσματικούς τρόπους για να βοηθήσει σοβαρά άρρωστοι άνθρωποι που έχουν ανάγκη από μεταμόσχευση οργάνων , τους ιστούς και τα κύτταρα.

[13], [14], [15], [16], [17], [18]