PCR ηπατίτιδας C

Ο HCV στο υλικό κανονικά δεν υπάρχει.

Σε αντίθεση με ορολογική διάγνωση της ηπατίτιδας C ιικές μέθοδοι όπου ανιχνεύουν αντισώματα σε HCV, PCR μπορεί να ανιχνεύσει την παρουσία HCV RNA και άμεσα ποσοτικοποίηση συγκέντρωσή του στο υλικό. Η δοκιμή έχει ειδική εξειδίκευση και υψηλή ευαισθησία: δέκα μόρια RNA HCV στο υλικό δοκιμής είναι επαρκή για την ανίχνευσή της. Ανίχνευση των αντισωμάτων κατά του HCV επιβεβαιώνει μόνο την μολυσμένα γεγονός ασθενή, αλλά δεν επιτρέπει να κρίνουμε τη δραστηριότητα του μολυσματικού διαδικασίας (της αντιγραφής του ιού) και την πρόγνωση της νόσου. Επιπλέον, αντισώματα προς HCV ανιχνεύθηκαν στο αίμα των ασθενών με οξεία και χρόνια ηπατίτιδα, καθώς επίσης και σε εκείνους τους ασθενείς που είναι άρρωστοι και ανακτάται, αλλά συχνά αντισώματα εμφανίζονται στο αίμα μόνο λίγους μήνες μετά την έναρξη της κλινικής νόσου, γεγονός που καθιστά δύσκολο να εντοπιστεί. Η ανίχνευση του HCV στο αίμα χρησιμοποιώντας PCR είναι μια πιο ενημερωτική διαγνωστική μέθοδος. Η ανίχνευση του HCV RNA σε PCR μαρτυρεί την ιαιμία, επιτρέπει να κρίνει τον αναδιπλασιασμό του ιού στο σώμα και χρησιμεύει ως ένα από τα κριτήρια για την αποτελεσματικότητα της αντιιικής θεραπείας. Ανίχνευση του HCV RNA με PCR στα πρώιμα στάδια της ιικής μόλυνσης στο φόντο του την πλήρη απουσία οποιωνδήποτε ορολογικών δεικτών μπορεί να είναι το νωρίτερο ενδείξεις λοίμωξης. Ωστόσο, η απομονωμένη ανίχνευση του HCV RNA στο υπόβαθρο της πλήρους απουσίας οποιωνδήποτε άλλων ορολογικών δεικτών δεν μπορεί να εξαλείψει πλήρως το ψευδώς θετικό αποτέλεσμα της PCR. Σε τέτοιες περιπτώσεις απαιτείται εκτεταμένη αξιολόγηση κλινικών, βιοχημικών και μορφολογικών μελετών, με επαναλαμβανόμενη επανειλημμένη επιβεβαίωση της παρουσίας λοίμωξης PCR.

Μεγάλη σημασία έχει η χρήση της μεθόδου PCR σε ασθενείς με χρόνια ιική ηπατίτιδα C, καθώς στις περισσότερες περιπτώσεις δεν υπάρχει συσχέτιση μεταξύ της παρουσίας της αντιγραφής του ιού και της δραστηριότητας των ηπατικών ενζύμων. Σε τέτοιες περιπτώσεις, μόνο η PCR επιτρέπει να κρίνεται η παρουσία αναπαραγωγής του ιού, ειδικά εάν το τελικό αποτέλεσμα εκφράζεται ποσοτικά. Στις περισσότερες περιπτώσεις, η εξαφάνιση του HCV RNA από τον ορό του αίματος συμβαίνει αργότερα από την κανονικοποίηση των ηπατικών ενζύμων, οπότε η κανονικοποίησή τους δεν μπορεί να χρησιμεύσει ως βάση για την παύση της αντιικής θεραπείας.

Είναι πρακτικά σημαντικό για την ανίχνευση του HCV RNA να διερευνηθεί με τη μέθοδο PCR όχι μόνο ο ορός, αλλά και τα λεμφοκύτταρα, το hepatobiobaptam. Οι ιοί μπορούν να ανιχνευθούν 2-3 φορές πιο συχνά στον ιστό του ήπατος παρά στον ορό. Κατά την αξιολόγηση των αποτελεσμάτων της μελέτης του ορού αίματος για το HCV RNA, θα πρέπει να θυμόμαστε ότι η ιαιμία μπορεί να παρουσιάζει διακυμάνσεις στη φύση (όπως η μεταβολή της ενζυμικής δραστηριότητας). Συνεπώς, μετά από θετικά αποτελέσματα της μελέτης PCR, μπορεί να επιτευχθεί αρνητικό αποτέλεσμα και αντίστροφα. Σε τέτοιες περιπτώσεις, για να επιλυθούν οι αμφιβολίες που προκύπτουν, είναι καλύτερο να ερευνώνται οι ηπατοβιοβάτες.

Η ανίχνευση του HCV RNA σε ένα υλικό χρησιμοποιώντας PCR χρησιμοποιείται για τους ακόλουθους σκοπούς:

• την επίλυση αμφισβητήσιμων αποτελεσμάτων ορολογικών μελετών ·
• διαφοροποίηση της ιογενούς ηπατίτιδας C από άλλες μορφές ηπατίτιδας.
• την ανίχνευση του οξεικού σταδίου της νόσου σε σύγκριση με τη μεταδιδόμενη μόλυνση ή επαφή. το στάδιο μόλυνσης νεογνών από οροθετικές μητέρες HCV,
• την παρακολούθηση της αποτελεσματικότητας της αντιικής θεραπείας.

Ασθενείς με εικαζόμενη ιογενή ηπατίτιδα C:

• δωρητές ·
• άτομα με παράγοντες κινδύνου ·
• άτομα με αυξημένη δραστηριότητα της ALT.
• ασθενείς με οξεία ηπατίτιδα

Όλα τα παραπάνω χαρακτηριστικά αξιολόγησης των αποτελεσμάτων και των προσεγγίσεων για τη διάγνωση του HCV με PCR επίσης ισχύουν για άλλες λοιμώξεις.

Η μέθοδος PCR επιτρέπει όχι μόνο την ανίχνευση HCV RNA στο υλικό δοκιμής, αλλά και τον καθορισμό του γονότυπου του. Ο προσδιορισμός του γονότυπου του ιού έχει μεγάλη σημασία για την επιλογή των ασθενών με χρόνια ιική ηπατίτιδα C για τη διεξαγωγή θεραπείας με ιντερφερόνη-άλφα και ριμπαβιρίνη. Οι εργαστηριακές ενδείξεις για τη θεραπεία της χρόνιας ιογενούς ηπατίτιδας C με ιντερφερόνη άλφα έχουν ως εξής:

• αυξημένη δραστικότητα τρανσαμινάσης.
• παρουσία HCV RNA στο αίμα.
• γονότυπος 1 HCV.
• υψηλή ιαιμία στο αίμα (περισσότερο από 8 × 10 ⁵ αντίγραφα / ml).

Προς το παρόν, η περιεκτικότητα HCV RNA στον ορό του αίματος μπορεί να ποσοτικοποιηθεί με PCR, η οποία έχει μεγάλη σημασία για τον έλεγχο της θεραπείας με ιντερφερόνη άλφα. Το επίπεδο της ιαιμίας εκτιμάται ως εξής: για το HCV RNA από 10 ² έως ¹⁰⁴ αντίγραφα / ml - ασθενές. από 10 ⁵ έως 10 ⁷ αντίγραφα / ml - μέσο, πάνω από 10 ⁸ αντίγραφα / ml - υψηλό. Με αποτελεσματική θεραπεία, το επίπεδο της ιαιμίας μειώνεται.

[1], [2], [3], [4]