PCR ηπατίτιδας C

Ο HCV κανονικά απουσιάζει από το υλικό.

Σε αντίθεση με τις ορολογικές μεθόδους διάγνωσης της ιογενούς ηπατίτιδας C, οι οποίες ανιχνεύουν αντισώματα κατά του HCV, η PCR επιτρέπει την άμεση ανίχνευση της παρουσίας του HCV RNA και την ποσοτικοποίηση της συγκέντρωσής του στο υλικό δοκιμής. Η δοκιμή έχει ειδικότητα είδους και υψηλή ευαισθησία: δέκα μόρια HCV RNA στο υλικό δοκιμής είναι αρκετά για να την ανιχνευθούν. Η ανίχνευση αντισωμάτων κατά του HCV επιβεβαιώνει μόνο το γεγονός της μόλυνσης του ασθενούς, αλλά δεν επιτρέπει να κριθεί η δραστηριότητα της μολυσματικής διαδικασίας (αναπαραγωγή του ιού) και η πρόγνωση της νόσου. Επιπλέον, αντισώματα κατά του HCV ανιχνεύονται τόσο στο αίμα ασθενών με οξεία και χρόνια ηπατίτιδα, όσο και σε ασθενείς που νοσούσαν και ανάρρωσαν, και συχνά τα αντισώματα στο αίμα εμφανίζονται μόνο αρκετούς μήνες μετά την έναρξη της κλινικής εικόνας της νόσου, γεγονός που περιπλέκει τη διάγνωση. Η ανίχνευση του HCV στο αίμα χρησιμοποιώντας PCR είναι μια πιο ενημερωτική διαγνωστική μέθοδος. Η ανίχνευση του HCV RNA στην PCR υποδηλώνει ιαιμία, επιτρέπει να κριθεί η αναπαραγωγή του ιού στο σώμα και χρησιμεύει ως ένα από τα κριτήρια για την αποτελεσματικότητα της αντιιικής θεραπείας. Η ανίχνευση του HCV RNA με PCR σε πρώιμα στάδια της ιογενούς λοίμωξης, απουσία οποιωνδήποτε ορολογικών δεικτών, μπορεί να χρησιμεύσει ως η πρωιμότερη ένδειξη λοίμωξης. Ωστόσο, η μεμονωμένη ανίχνευση του HCV RNA, απουσία οποιωνδήποτε άλλων ορολογικών δεικτών, δεν μπορεί να αποκλείσει εντελώς ένα ψευδώς θετικό αποτέλεσμα PCR. Σε τέτοιες περιπτώσεις, είναι απαραίτητη μια ολοκληρωμένη αξιολόγηση κλινικών, βιοχημικών και μορφολογικών μελετών με επαναλαμβανόμενη πολλαπλή επιβεβαίωση της παρουσίας λοίμωξης με PCR.

Η χρήση της μεθόδου PCR σε ασθενείς με χρόνια ιογενή ηπατίτιδα C έχει μεγάλη σημασία, καθώς οι περισσότεροι από αυτούς δεν έχουν συσχέτιση μεταξύ της παρουσίας ιικής αντιγραφής και της δραστηριότητας των ηπατικών ενζύμων. Σε τέτοιες περιπτώσεις, μόνο η PCR μας επιτρέπει να κρίνουμε την παρουσία ιικής αντιγραφής, ειδικά εάν το τελικό αποτέλεσμα εκφράζεται ποσοτικά. Στις περισσότερες περιπτώσεις της νόσου, η εξαφάνιση του HCV RNA από τον ορό του αίματος συμβαίνει αργότερα από την ομαλοποίηση των ηπατικών ενζύμων, επομένως η ομαλοποίησή τους δεν μπορεί να χρησιμεύσει ως βάση για τη διακοπή της αντιιικής θεραπείας.

Είναι πρακτικά σημαντικό να εξετάζονται όχι μόνο ο ορός του αίματος, αλλά και τα λεμφοκύτταρα και τα δείγματα ηπατοβιοψίας χρησιμοποιώντας τη μέθοδο PCR για την ανίχνευση HCV RNA. Οι ιοί μπορούν να ανιχνευθούν 2-3 φορές συχνότερα στον ηπατικό ιστό από ό,τι στον ορό του αίματος. Κατά την αξιολόγηση των αποτελεσμάτων μιας εξέτασης ορού αίματος για HCV RNA, θα πρέπει να θυμόμαστε ότι η ιαιμία μπορεί να έχει κυμαινόμενη φύση (καθώς και αλλαγές στην ενζυμική δραστηριότητα). Επομένως, μετά από θετικά αποτελέσματα εξέτασης PCR, μπορεί να ληφθεί αρνητικό αποτέλεσμα και αντίστροφα. Σε τέτοιες περιπτώσεις, είναι καλύτερο να εξετάζονται δείγματα ηπατοβιοψίας για να επιλυθούν τυχόν αμφιβολίες που προκύπτουν.

Η ανίχνευση του HCV RNA σε υλικό με PCR χρησιμοποιείται για τους ακόλουθους σκοπούς:

• επίλυση αμφισβητήσιμων αποτελεσμάτων ορολογικών εξετάσεων·
• διαφοροποίηση της ιογενούς ηπατίτιδας C από άλλες μορφές ηπατίτιδας·
• προσδιορισμός του οξέος σταδίου της νόσου σε σύγκριση με την προηγούμενη λοίμωξη ή επαφή· προσδιορισμός του σταδίου μόλυνσης νεογνών από μητέρες οροθετικές για HCV·
• παρακολούθηση της αποτελεσματικότητας της αντιιικής θεραπείας.

Ασθενείς με υποψία ιογενούς ηπατίτιδας C:

• δωρητές·
• άτομα με παράγοντες κινδύνου·
• άτομα με αυξημένη δραστηριότητα ALT·
• ασθενείς με οξεία ηπατίτιδα

Όλα τα προαναφερθέντα χαρακτηριστικά της αξιολόγησης των αποτελεσμάτων και των προσεγγίσεων στη διάγνωση του HCV με χρήση PCR ισχύουν και για άλλες λοιμώξεις.

Η μέθοδος PCR επιτρέπει όχι μόνο την ανίχνευση του HCV RNA στο υπό μελέτη υλικό, αλλά και τον προσδιορισμό του γονότυπού του. Ο προσδιορισμός του γονότυπου του ιού έχει μεγάλη σημασία για την επιλογή ασθενών με χρόνια ιογενή ηπατίτιδα C για θεραπεία με ιντερφερόνη-άλφα και ριμπαβιρίνη. Οι εργαστηριακές ενδείξεις για τη θεραπεία της χρόνιας ιογενούς ηπατίτιδας C με ιντερφερόνη άλφα είναι οι εξής:

• αυξημένη δραστικότητα τρανσαμινάσης.
• παρουσία RNA HCV στο αίμα.
• HCV γονότυπος 1;
• υψηλή ιαιμία στο αίμα (περισσότερο από 8×105 ^{αντίγραφα} /ml).

Επί του παρόντος, είναι δυνατός ο ποσοτικός προσδιορισμός της περιεκτικότητας σε HCV RNA στον ορό του αίματος χρησιμοποιώντας τη μέθοδο PCR, η οποία έχει μεγάλη σημασία για την παρακολούθηση της θεραπείας με ιντερφερόνη άλφα. Το επίπεδο της ιαιμίας αξιολογείται ως εξής: με περιεκτικότητα σε HCV RNA από 102 ^έως 104 ^{αντίγραφα} /ml - ασθενής· από ¹⁰⁵ έως ¹⁰⁷ αντίγραφα/ml - μέση, πάνω από 108 ^{αντίγραφα} /ml - υψηλή. Με αποτελεσματική θεραπεία, το επίπεδο της ιαιμίας μειώνεται.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ]