Μολυσματική μονοπυρήνωση: αντισώματα στον ιό Epstein-Barr στο αίμα

Η λοιμώδης μονοπυρήνωση είναι μια κοινή συστηματική λεμφοϋπερπλαστική ασθένεια, που συνήθως προκαλείται από τον ιό Epstein-Barr. Toxoplasma gondii και άλλους ιούς (CMV, ιό ανθρώπινης ανοσοανεπάρκειας και τον ανθρώπινο ιό έρπητα τύπου 6, μία αναγνωρισμένη αιτία αιφνίδιου εξανθήματος) μπορεί να προκαλέσει κλινικά παρόμοιες ασθένειες. Αυτοί οι ίδιοι αιτιολογικοί παράγοντες είναι προφανώς ικανοί να προκαλέσουν την ανάπτυξη συνδρόμου χρόνιας κόπωσης.

Ο ιός Epstein-Barr είναι ένας ιός από την ομάδα του έρπητα, έχει έναν τροπισμό για τα Β-λεμφοκύτταρα, επιμένει επίμονα στα κύτταρα-ξενιστές ως λανθάνουσα λοίμωξη. Διανέμεται ευρέως σε όλο τον κόσμο. Με δομή και μέγεθος, ο ιός Epstein-Barr δεν διακρίνεται από άλλους ιούς του έρπητα, αλλά διαφέρει σημαντικά από αυτά σε αντιγονικές ιδιότητες. Ο ιός έχει ένα αντιγόνο μεμβράνης (ΜΑ - μεμβράνη αντιγόνο), πυρηνικό αντιγόνο (ΕΒΝΑ - Epstein-Barris νουκλεϊκού αντιγόνο) και ιικό αντιγόνο καψιδίου (VCA - αντιγόνο του ιού της καψιδίου).

Η μόλυνση εμφανίζεται όταν ο ιός μεταδίδεται με σάλιο. ιό Epstein-Barr, όταν προσλαμβάνεται μολύνει φάρυγγα επιθήλιο, προκαλώντας φλεγμονή και πυρετό - τα τυπικά κλινικά συμπτώματα άρχισαν λοιμώδη μονοπυρήνωση. Αυστηρά λεμφοτροπικός ιός, που ενώνει κυτταρική μεμβράνη υποδοχέα S3α των Β-λεμφοκυττάρων επάγει τον πολλαπλασιασμό των πολυκλωνικών Β-λεμφοκυττάρων με αντίστοιχη αύξηση στις αμυγδαλές, συστημικές λεμφαδενοπάθεια και σπληνομεγαλία. Τα Β-λεμφοκύτταρα μετασχηματισμένα (αποκτούν την ικανότητα να άπειρο διαίρεση), και εν απουσία μίας επαρκούς κυτταρικής ανοσολογικής απόκρισης, η διαδικασία αυτή μπορεί να εξελιχθεί προφανώς κακοήθη (π.χ., Χ-συνδεδεμένο σύνδρομο λεμφοπολλαπλασιαστικές). Εάν κυτταρικών παραγόντων ανοσίας ελέγχουν την αντιγραφή του ιού του ιού Epstein-Barr στο σώμα, τα κλινικά συμπτώματα της λοιμώδους μονοπυρήνωσης σταδιακά εξαφανίζονται.

Όπως και άλλα ερπητοϊούς, ιό Epstein-Barr μπορεί να παραμείνουν σε λανθάνουσα μόλυνση (το DNA του που περιέχεται στον πυρήνα μιας μικρής ποσότητας του Β-λεμφοκυττάρων). Επεισοδιακή ασυμπτωματική επανενεργοποίηση της λοίμωξης - ένα κοινό φαινόμενο, περίπου 20% των υγιών νέων αποβάλλουν τον ιό ιό Epstein-Barr με το σάλιο. Σε άτομα με φθαρμένο κυτταρική ανοσία (π.χ. AIDS, αταξία-τελαγγειεκτασία, σε λήπτες μοσχευμάτων) μπορεί να αναπτύξουν μία σαφή αντιδραστική μόλυνση με τριχωτό λευκοπλακία, διάμεση πνευμονίτιδα, ή υπό τη μορφή ενός Β-κυττάρου λέμφωμα μονοκλωνικό. Με ιό Epstein-Barr συνδυάζεται αιτιολογία του ρινοφαρυγγικού καρκινώματος και το λέμφωμα Burkitt.

Μία από τις εκδηλώσεις μολυσματικής μονοπυρήνωσης είναι η εμφάνιση στο περιφερικό αίμα άτυπων λεμφοκυττάρων (μέχρι 10% του συνολικού αριθμού λεμφοκυττάρων). Τα ατυπικά λεμφοκύτταρα βρίσκονται στο αίμα από την αρχή της περιόδου κλινικών εκδηλώσεων της λοίμωξης. συγκέντρωσή τους στο αίμα φτάνει σε ένα μέγιστο στα τέλη του 2ου ή στις αρχές της τρίτης εβδομάδας και μπορεί να διατηρείται σε επίπεδο 1,5-2 μήνες, η πλήρης εξαφάνιση συμβαίνει συνήθως στην αρχή του 4ου μήνα από την έναρξη. Η παρουσία άτυπων λεμφοκυττάρων είναι ένα σχετικά μη ευαίσθητο σημάδι μόλυνσης που προκαλείται από τον ιό Epstein-Barr, αλλά έχει συνολική ειδικότητα περίπου 95%.

Ο πολλαπλασιασμός των πολυκλωνικών Β-λεμφοκυττάρων σε μόλυνση που προκαλείται από τον ιό Epstein-Barr, δημιουργεί μια μεγάλη ποικιλία αυτοαντισωμάτων στον ασθενή, όπως IgM-αντι-i (κρύο αγλουτινίνη), ρευματοειδής παράγοντας, αντιπυρηνικά αντισώματα. Τα περισσότερα από τα ασυνήθιστα φάρμακα που εμφανίζονται στη μολυσματική μονοπυρήνωση ονομάζονται ετεροφιλικά αντισώματα Paul-Bunnel. Αυτά τα αντισώματα ανήκουν στην κατηγορία IgM, έχουν μια συγγένεια για αρνί και άλογο ερυθρά αιμοσφαίρια, δεν κατευθύνονται σε οποιοδήποτε αντιγόνο του ιού Epstein-Barr. Ετεροφυλικά αντισώματα - Τυχαία προϊόντα Β-λεμφοειδών πολλαπλασιασμού (που προκαλείται από τον ιό Epstein-Barr), εμφανίζονται κατά την πρώτη εβδομάδα της λοιμώδους μονοπυρήνωσης και σταδιακά εξαφανίζονται κατά τη διάρκεια της ανάρρωσης, αυτά συνήθως δεν ανιχνεύονται σε 3-6 μήνες.

Δεδομένου ότι η αρχική οξεία φάση της λοίμωξης καθίσταται λανθάνων σε όλα τα κύτταρα σε ένα μεγάλο αριθμό των γονιδιωμάτων εμφανίζονται ιού Epstein-Barr (μοναδική αντιγόνα), και το αντιγόνο πυρήνα που απελευθερώνονται στο περιβάλλον. Σε απόκριση στο αντιγόνο, συντίθενται ειδικά αντισώματα - πολύτιμοι δείκτες του σταδίου της νόσου. Λίγο μετά την έναρξη της μολύνθηκαν Β λεμφοκύτταρα ανίχνευση πρώιμων αντιγόνο (πρώιμου αντιγόνου - EA) - μία πρωτεΐνη αναγκαία για την αντιγραφή του ιού του ιού Epstein-Barr (όχι ένα δομικό συστατικό του ιού). Στο αρχικό αντιγόνο στο σώμα του ασθενούς, συντίθενται αντισώματα κατηγοριών IgM και IgG. Μαζί με τον πλήρη ιό του ιού Epstein-Barr, εμφανίζονται αντιγόνα του ιικού καψιδίου (VCA) και μεμβρανικού αντιγόνου (ΜΑ). Δεδομένου ότι η μόλυνση υποχωρήσει ένα μικρό ποσοστό των μολυσμένων ιό τον ιό Epstein-Barr στα λεμφοκύτταρα του ανοσοποιητικού αποφεύγει αποικοδόμηση και διατηρεί το ιικό γονιδίωμα στην λανθάνουσα μορφή. Το πυρηνικό αντιγόνο (EBNA) του ιού Epstein-Barr είναι υπεύθυνο για την επανάληψη και την επιβίωσή του.

Οι εργαστηριακές εξετάσεις μπορούν να ανιχνεύσουν αντισώματα σε διάφορα αντιγόνα.

Από τις ορολογικές μεθόδους διάγνωσης μολυσματικής μονοπυρήνωσης, η αντίδραση Paul-Bunnel (συγκόλληση) είναι πιο κοινή, με στόχο την ανίχνευση ετεροφίλων αντισωμάτων στον ορό. Ο τίτλος των ετεροφίλων αντισωμάτων 1: 224 και υψηλότερος στον ορό του ασθενούς αναγνωρίζεται ως διαγνωστικά σημαντικός, επιβεβαιώνοντας τη διάγνωση μολυσματικής μονοπυρήνωσης. Η ετερόφιλη συγκόλληση είναι θετική στο 60% των νέων μετά από 2 εβδομάδες και στο 90% μετά από 4 εβδομάδες από την έναρξη των κλινικών εκδηλώσεων της νόσου. Συνεπώς, απαιτούνται αρκετές μελέτες για τη διάγνωση μολυσματικής μονοπυρήνωσης: κατά την πρώτη εβδομάδα της νόσου (η αντίδραση μπορεί να είναι αρνητική) και 1-2 εβδομάδες αργότερα (η αντίδραση μπορεί να γίνει θετική). Η περιεκτικότητα σε ετεροφιλικά αντισώματα μειώνεται μετά το τέλος της οξείας περιόδου της μολυσματικής διαδικασίας, αλλά ο τίτλος τους μπορεί να προσδιοριστεί εντός 9 μηνών από την έναρξη των κλινικών συμπτωμάτων. Η αντίδραση Paul-Bunnel μπορεί να μετατραπεί από θετικό σε αρνητικό, ακόμη και ενάντια στο υπολειπόμενο αιματολογικό και κλινικό σύμπτωμα στον ασθενή. Η ευαισθησία της μεθόδου σε ενήλικες είναι 98%, η ειδικότητα είναι 99%. Σε παιδιά με λοιμώδη μονοπυρήνωση στην ηλικία των 2 ετών ετερόφιλα αντισώματα ανιχνεύθηκαν μόνο σε 30% των ασθενών ηλικίας 2-4 ετών - 75% πάνω από 4 χρόνια - περισσότερο από 90%. Η ευαισθησία της μεθόδου στα παιδιά είναι μικρότερη από 70%, η ειδικότητα είναι 20%. Η μείωση και στη συνέχεια η εκ νέου αύξηση του τίτλου των ετεροφίλων αντισωμάτων μπορεί να συμβεί σε απόκριση σε άλλη μόλυνση (συνηθέστερα σε ιογενείς λοιμώξεις της ανώτερης αναπνευστικής οδού). Η απόκριση του Paul-Bunnel δεν είναι συγκεκριμένη για τον ιό Epstein-Barr. Ο τίτλος των ετεροφίλων αντισωμάτων δεν δίνει διασταυρούμενη αντίδραση και δεν συσχετίζεται με ειδικά αντισώματα στον ιό Epstein-Barr ούτε συσχετίζεται με τη σοβαρότητα της πορείας της νόσου. Η δοκιμή είναι άχρηστη για τη διάγνωση της χρόνιας μορφής μολυσματικής μονοπυρήνωσης (θετική κατά μέσο όρο μόνο στο 10% των ασθενών).

Τίτλοι 1:56 ή λιγότερο μπορούν να βρεθούν σε υγιείς ανθρώπους και σε ασθενείς με άλλες ασθένειες (ρευματοειδής αρθρίτιδα, ερυθρά). Τα ψευδώς θετικά αποτελέσματα δοκιμών πληρούνται πολύ σπάνια.

Επί του παρόντος, για την ανίχνευση αντισωμάτων σε ερυθροκύτταρα προβάτου χρησιμοποιώντας μία μέθοδο της «απλή κηλίδα» (α συγκόλλησης σε αντικειμενοφόρο), χρησιμοποιείται αρχικά ως δοκιμή διαλογής. Με ευαισθησία, είναι συγκρίσιμη με την αντίδραση Paul-Bunnel. Slide ψευδείς θετικές δοκιμασίες μπορεί να είναι περίπου 2% των μελετών (λευχαιμία, κακόηθες λέμφωμα, ελονοσία, ερυθράς, ιογενή ηπατίτιδα, καρκίνωμα του παγκρέατος) και ψευδώς αρνητικών ενήλικες - 5-7% των περιπτώσεων.

Πρέπει να σημειωθεί ότι το φάσμα των διαγνωστικών συστημάτων δοκιμών που παράγονται από τις επιχειρήσεις με βάση τον προσδιορισμό του τίτλου αντισώματος είναι πολύ ευρύ, επομένως είναι απαραίτητο να επικεντρωθεί ο διαγνωστικός τίτλος αντισωμάτων που καθορίζεται στις οδηγίες για τα συστήματα δοκιμών.

Εάν ετερόφιλα αντισώματα δεν αναγνωρίζονται, και κλινική εικόνα αντιστοιχεί σε λοιμώδη μονοπυρήνωση, είναι αναγκαίο να εξεταστούν ορό για ειδικά αντισώματα της IgM και IgG. Για την ανίχνευση των ειδικών αντισωμάτων έναντι του ιού Epstein-Barr χρησιμοποιώντας έμμεσες μεθόδους ανοσοφθορισμού (επιτρέπουν την ανίχνευση αντισωμάτων κατά αντιγόνων VCA και ΕΑ) antialexin-ανοσοφθορισμού (ανίχνευση αντισωμάτων σε ΕΑ, VCA και ΕΒΝΑ αντιγόνο) και IFA.

Τα αντισώματα στο συστατικό του αντιγόνου ΕΑ (αντι-ΕΑ-ϋ) εμφανίζονται ακόμη και στην λανθάνουσα περίοδο της πρωταρχικής μόλυνσης και εξαφανίζονται γρήγορα με ανάκτηση.

Αντισώματα στο συστατικό αντιγόνου ΕΑ αντιγόνου (αντι-ΕΑ-Κ) μπορούν να ανιχνευθούν 3-4 εβδομάδες μετά τις κλινικές εκδηλώσεις της νόσου. Επιμένουν στον ορό του αίματος για περίπου ένα χρόνο, συχνά ανιχνεύονται με άτυπα ή παρατεταμένα ρεύματα μολυσματικής μονοπυρήνωσης. Συνήθως, αυτά τα αντισώματα βρίσκονται με λέμφωμα του Burkitt.

Τα αντισώματα κατά της VCA κατηγορίας IgM (anti-VCA IgM) εμφανίζονται πολύ νωρίς, συνήθως σε κλινικά συμπτώματα, ανιχνεύονται στην εμφάνιση της νόσου σε 100% των περιπτώσεων. Οι υψηλοί τίτλοι εμφανίζονται την 1-6η εβδομάδα από την εμφάνιση της λοίμωξης, αρχίζουν να μειώνονται από την 3η εβδομάδα και συνήθως εξαφανίζονται μετά από 1-6 μήνες. Το αντι-VCA IgM είναι σχεδόν πάντα παρόν στον ορό με ενεργή μόλυνση, έτσι η μέθοδος ανίχνευσής τους είναι πολύ ευαίσθητη και ειδική για ένα οξύ επεισόδιο μολυσματικής μονοπυρήνωσης.

Αντισώματα στην IgG κατηγορίας VCA (anti-VCA IgG) μπορεί να εμφανιστούν νωρίς (την 1-4η εβδομάδα), η ποσότητα τους φτάνει στο μέγιστο από τον 2ο μήνα της νόσου. Στην αρχή της νόσου βρίσκονται σε 100% των περιπτώσεων. Μόνο το 20% των ασθενών έδειξε 4 φορές αύξηση του τίτλου στη μελέτη των ζευγαρωμένων ορών. Ο τίτλος μειώνεται κατά την ανάκτηση, αλλά βρίσκεται μέσα σε αρκετά χρόνια μετά τη μεταφερόμενη μόλυνση, επομένως είναι άχρηστο για τη διάγνωση μολυσματικής μονοπυρήνωσης. Η παρουσία αντι-VCA IgG υποδηλώνει κατάσταση μετά από μόλυνση και ανοσία.

Τα αντισώματα έναντι του EBNA (αντι-ΕΒΝΑ) εμφανίζονται αργότερα από όλα, σπανίως υπάρχουν στην οξεία φάση της νόσου. Το περιεχόμενό τους αυξάνεται κατά την περίοδο αποκατάστασης (εντός 3-12 μηνών), μπορεί να παραμείνει στο αίμα για πολλά χρόνια μετά την ασθένεια. Η έλλειψη αντι-ΕΒΝΑ παρουσία αντι-VCA IgM και αντι-ΕΑ IgM υποδηλώνει ρευστή λοίμωξη. Η ανίχνευση του αντι-ΕΒΝΑ μετά από μια προηγούμενη αρνητική αντίδραση υποδηλώνει μια υπάρχουσα λοίμωξη. Όταν χρησιμοποιείται η μέθοδος ELISA, είναι δυνατό να ανιχνευθεί ταυτόχρονα η παρουσία ομάδων αντι-ΕΒΝΑ IgM και IgG. Εάν η ποσότητα του αντι-ΕΒΝΑ IgM είναι μεγαλύτερη από την αντι-ΕΒΝΑ IgG, πρέπει να ληφθεί υπόψη μια οξεία λοίμωξη, με την αντίστροφη σχέση να είναι η προηγούμενη.

Σε ό, τι αφορά την οξεία πρωτογενή μόλυνση, ένα ή περισσότερα από τα ακόλουθα συμπτώματα υποδεικνύουν την παρουσία:

• αντι-VCA IgG (ανιχνεύεται νωρίς, και αργότερα μειώνεται το περιεχόμενο).
• Υψηλός τίτλος (περισσότερο από 1: 320) ή 4-πλάσια αύξηση στον τίτλο αντι-VCA IgG κατά τη διάρκεια της νόσου.
• μια παροδική αύξηση του τίτλου του αντι-ΕΑ-ϋ (1:10 ή περισσότερο).
• νωρίς anti-VCA IgG χωρίς αντι-ΕΒΝΑ, και αργότερα - εμφάνιση αντι-ΕΒΝΑ.

Οξεία ή πρωτογενή μόλυνση που προκαλείται από τον ιό Epstein-Barr, αποκλείονται αν τίτλοι των αντι-VCA IgG και αντι-ΕΒΝΑ στον ορό δεν αλλάζουν κατά τη διάρκεια του χρόνου της μελέτης (κατά την οξεία φάση και ανάκτησης).

Η σταθερή παρουσία πρώιμου αντιγόνου και αντι-VCA IgG σε υψηλούς τίτλους υποδηλώνει χρόνια φάση μόλυνσης.

Η ανίχνευση αντισωμάτων στον ιό Epstein-Barr χρησιμοποιείται για τη διάγνωση μολυσματικής μονοπυρήνωσης και χρόνιων λοιμώξεων που προκαλούνται από τον ιό Epstein-Barr.

Αντισώματα κατά του ιού Epstein-Barr μπορεί να ανιχνευθεί στις ακόλουθες ασθένειες: δευτερογενή ανοσοανεπάρκεια, συμπεριλαμβανομένης της λοίμωξης HIV, ρινοφαρυγγικό καρκίνωμα, λέμφωμα Burkitt, λοίμωξη CMV, σύφιλη, τη νόσο του Lyme, βρουκέλλωση, και άλλοι.

[1], [2], [3], [4], [5], [6], [7]