Ηλεκτροφορητική ανάλυση λιποπρωτεϊνών

Η λιποπρωτεΐνη του πλάσματος του αίματος είναι μια μορφή μεταφοράς λιπιδίων στο ανθρώπινο σώμα. Μεταφέρουν λιπίδια τόσο εξωγενούς (τροφικής) όσο και ενδογενούς προέλευσης. Ορισμένες λιποπρωτεΐνες δεσμεύουν την περίσσεια χοληστερόλης από τα κύτταρα των περιφερικών ιστών για να τη μεταφέρουν στο ήπαρ, όπου οξειδώνεται σε χολικά οξέα και απεκκρίνεται με τη χολή. Οι λιποδιαλυτές βιταμίνες και ορμόνες μεταφέρονται επίσης με τη συμμετοχή λιποπρωτεϊνών.

Οι λιποπρωτεΐνες του πλάσματος έχουν σφαιρικό σχήμα. Στο εσωτερικό τους υπάρχει μια «σταγόνα» λίπους που περιέχει μη πολικά λιπίδια (τριγλυκερίδια και εστεροποιημένη χοληστερόλη) και σχηματίζει τον πυρήνα του σωματιδίου LP. Περιβάλλεται από ένα κέλυφος φωσφολιπιδίων, μη εστεροποιημένης χοληστερόλης και πρωτεΐνης.

Υπάρχουν διάφορες μέθοδοι για τον προσδιορισμό των λιποπρωτεϊνών στο αίμα. Μία από αυτές είναι ο προσδιορισμός της περιεκτικότητας σε χοληστερόλη σε διάφορες κατηγορίες λιποπρωτεϊνών - όπως συζητήθηκε παραπάνω. Μια άλλη μέθοδος για τη μελέτη της περιεκτικότητας σε λιποπρωτεϊνες είναι η ηλεκτροφορητική. Κατά τη χρήση αυτής της μεθόδου, τα μεμονωμένα κλάσματα λιποπρωτεϊνών ταξινομούνται συγκρίνοντας την ηλεκτροφορητική τους κινητικότητα με την κινητικότητα των φυσιολογικών πρωτεϊνών ορού. Με βάση την ηλεκτροφορητική κινητικότητα, οι λιποπρωτεΐνες χωρίστηκαν στα ακόλουθα κλάσματα.

• Χυλομικρά. Κατά τη διεξαγωγή ηλεκτροφόρησης, τα χυλομικρά παραμένουν στην αρχή (περιέχουν πολύ λίγη πρωτεΐνη) όπως οι γ-σφαιρίνες. Είναι σωματίδια πλούσια σε λίπος που εισέρχονται στο αίμα από τη λέμφο και μεταφέρουν τριγλυκερίδια τροφής. Είναι οι μεγαλύτερες λιποπρωτεΐνες. Το πλάσμα αίματος υγιών ανθρώπων που δεν έχουν φάει για 12-14 ώρες δεν περιέχει χυλομικρά ή τα περιέχει σε αμελητέες ποσότητες.
• Άλφα λιποπρωτεΐνες. Κατά την ηλεκτροφόρηση, οι α-LP κινούνται μαζί με τις άλφα σφαιρίνες και αντιστοιχούν στην HDL. Η HDL περιέχει έως και 50% πρωτεΐνη, περίπου 30% φωσφολιπίδια, 20% χοληστερόλη και πολύ λίγα τριγλυκερίδια. Σχηματίζονται στο ήπαρ και στο τοίχωμα του λεπτού εντέρου.
• Βήτα λιποπρωτεΐνες. Κατά την ηλεκτροφόρηση σε χαρτί, οι βήτα λιποπρωτεΐνες (LP) κινούνται μαζί με τις βήτα σφαιρίνες και αντιστοιχούν στην LDL. Η LDL περιέχει 25% πρωτεΐνη, 50% χοληστερόλη, 20% φωσφολιπίδια και 8-10% τριγλυκερίδια. Υποτίθεται ότι η LDL σχηματίζεται μερικώς ή πλήρως από τη διάσπαση των λιποπρωτεϊνών πολύ χαμηλής πυκνότητας (VLDL).
• Προ-βήτα λιποπρωτεΐνες. Κατά την ηλεκτροφόρηση, οι προ-βήτα λιποπρωτεΐνες εμφανίζονται μεταξύ των άλφα-λιποπρωτεϊνών και των βήτα-λιποπρωτεϊνών, οι οποίες αντιστοιχούν σε VLDL.

Η ηλεκτροφόρηση λιποπρωτεϊνών επιτρέπει την ποιοτική ανάλυση των λιποπρωτεϊνών. Υπάρχουν δύο μεταβολικές διεργασίες που καθορίζουν την παθογένεση της αθηροσκλήρωσης: ο ρυθμός διείσδυσης λιποπρωτεϊνών πλούσιων σε χοληστερόλη στο εσωτερικό στρώμα του τοιχώματος του αιμοφόρου αγγείου και ο ρυθμός απομάκρυνσης της χοληστερόλης από τα αγγεία με επακόλουθη αποβολή από το σώμα. Σε αυτό το ισορροπημένο σύστημα, οι αυξημένες συγκεντρώσεις χυλομικρών, VLDL και LDL καθορίζουν τον κίνδυνο υπερβολικής εναπόθεσης χοληστερόλης στο εσωτερικό του τοιχώματος του αγγείου. Από την άλλη πλευρά, οι αυξημένες συγκεντρώσεις HDL συμβάλλουν σε αυξημένο ρυθμό απομάκρυνσης χοληστερόλης από τις αθηροσκληρωτικές πλάκες. Η ηλεκτροφόρηση LP μπορεί να παρέχει πρόσθετες πληροφορίες σχετικά με τη σχέση μεταξύ αυτών των μεταβολικών διεργασιών.

Εκτός από τις προαναφερθείσες κατηγορίες λιποπρωτεϊνών, και άλλα σύμπλοκα λιποπρωτεϊνών μπορούν να βρεθούν στο πλάσμα του αίματος, συμπεριλαμβανομένων των ασυνήθιστων, οι οποίες ονομάζονται παθολογικές (ή υπό όρους παθολογικές) λιποπρωτεΐνες. Αυτές περιλαμβάνουν τις β-VLDL, τις HDL- _chs και την LP-C. Οι β-VLDL, που ονομάζονται επίσης επιπλέουσες β-LP, χαρακτηρίζονται από την ηλεκτροφορητική κινητικότητα που είναι εγγενής στις β-LP και την πυκνότητα που αντιστοιχεί στις VLDL, λόγω της οποίας επιπλέουν κατά την υπερφυγοκέντρηση μαζί με τις τελευταίες. Η παρουσία β-VLDL είναι χαρακτηριστικό γνώρισμα των DLP τύπου III. Οι HDL- _chs είναι ένα κλάσμα της HDL που είναι υπερφορτωμένο με χοληστερόλη. Ο ρόλος αυτών των λιποπρωτεϊνών στην παθογένεση της αθηροσκλήρωσης δεν έχει διευκρινιστεί. Οι LP-C χαρακτηρίζονται από υψηλή περιεκτικότητα σε φωσφολιπίδια (65-68%) και μη εστεροποιημένη χοληστερόλη (23-27%). Λόγω της υψηλής ακαμψίας τους, οι LP-X συμβάλλουν στην αύξηση του ιξώδους του αίματος. Εμφανίζονται στο αίμα κατά τη διάρκεια αποφρακτικού ίκτερου και κατά τη διάρκεια ανεπάρκειας λεκιθίνης-χοληστερόλης ακυλοτρανσφεράσης. Ο ρόλος της LP-X στην ανάπτυξη της αθηροσκλήρωσης δεν έχει μελετηθεί.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ], [ 8 ]