Αυθόρμητη δοκιμή NST

Μια αυθόρμητη δοκιμή με NBT (νιτρομπλε τετραζόλιο) επιτρέπει την αξιολόγηση της κατάστασης του εξαρτώμενου από το οξυγόνο βακτηριοκτόνου μηχανισμού των φαγοκυττάρων του αίματος (κοκκιοκύτταρα) in vitro.

Κανονικά, στους ενήλικες, ο αριθμός των NBT-θετικών ουδετερόφιλων είναι έως και 10%.

Χαρακτηρίζει την κατάσταση και τον βαθμό ενεργοποίησης του ενδοκυτταρικού αντιβακτηριακού συστήματος NADPH-οξειδάσης. Η αρχή της μεθόδου βασίζεται στην αποκατάσταση της διαλυτής χρωστικής NBT που απορροφάται από το φαγοκύτταρο σε αδιάλυτη διφορμαζάνη υπό την επίδραση του ανιόντος υπεροξειδίου (που προορίζεται για την ενδοκυτταρική καταστροφή του μολυσματικού παράγοντα μετά την απορρόφησή του), που σχηματίζεται στην αντίδραση NADPH-οξειδάσης. Οι δείκτες της δοκιμής NBT αυξάνονται στην αρχική περίοδο των οξειών βακτηριακών λοιμώξεων, ενώ μειώνονται στην υποξεία και χρόνια πορεία της μολυσματικής διαδικασίας. Η απολύμανση του σώματος από τον παθογόνο συνοδεύεται από ομαλοποίηση του δείκτη. Μια απότομη μείωση υποδηλώνει απορύθμιση της αντιμολυσματικής προστασίας και θεωρείται προγνωστικά δυσμενές σημάδι.

Η εξέταση NBT παίζει σημαντικό ρόλο στη διάγνωση χρόνιων κοκκιωματωδών νοσημάτων, τα οποία χαρακτηρίζονται από την παρουσία ελαττωμάτων στο σύμπλεγμα οξειδάσης NADPH. Οι ασθενείς με χρόνιες κοκκιωματώδεις παθήσεις χαρακτηρίζονται από την παρουσία υποτροπιάζουσων λοιμώξεων (πνευμονία, λεμφαδενίτιδα, πνευμονικά, ηπατικά και δερματικά αποστήματα) που προκαλούνται από Staphylococcus aureus, Klebsiella spp., Candida albicans, Salmonella spp., Escherichia coli, Aspergillus spp., Pseudomonas cepacia, Mycobacterium spp. και Pneumocystis carinii.

Τα ουδετερόφιλα σε ασθενείς με χρόνιες κοκκιωματώδεις νόσους έχουν φυσιολογική φαγοκυτταρική λειτουργία, αλλά λόγω ελαττώματος στο σύμπλεγμα οξειδάσης NADPH, δεν είναι σε θέση να καταστρέψουν τους μικροοργανισμούς. Τα κληρονομικά ελαττώματα του συμπλέγματος οξειδάσης NADPH στις περισσότερες περιπτώσεις συνδέονται με το χρωμόσωμα Χ και λιγότερο συχνά είναι αυτοσωμικά υπολειπόμενα.

Η μείωση της αυθόρμητης δοκιμασίας με NST είναι χαρακτηριστική της χρόνιας φλεγμονής, των συγγενών ελαττωμάτων του φαγοκυτταρικού συστήματος, των δευτερογενών και πρωτοπαθών ανοσοανεπάρκειων, της λοίμωξης από HIV, των κακοήθων νεοπλασμάτων, των σοβαρών εγκαυμάτων, των τραυματισμών, του στρες, του υποσιτισμού, της θεραπείας με κυτταροστατικά και ανοσοκατασταλτικά και της έκθεσης σε ιονίζουσα ακτινοβολία.

Αύξηση στην αυθόρμητη δοκιμασία με NST παρατηρείται σε περίπτωση αντιγονικού ερεθισμού λόγω βακτηριακής φλεγμονής (πρόδρομη περίοδος, περίοδος οξείας εκδήλωσης λοίμωξης με φυσιολογική φαγοκυττάρωση), χρόνιας κοκκιωμάτωσης, λευκοκυττάρωσης, αυξημένης εξαρτώμενης από αντισώματα κυτταροτοξικότητας των φαγοκυττάρων, αυτοαλλεργικών ασθενειών και αλλεργιών.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ]

Ενεργοποιημένη δοκιμή με NST

Κανονικά, στους ενήλικες, ο αριθμός των NBT-θετικών ουδετερόφιλων είναι 40-80%.

Η δοκιμασία ενεργοποιημένης NBT επιτρέπει την αξιολόγηση της λειτουργικής εφεδρείας του εξαρτώμενου από το οξυγόνο μηχανισμού βακτηριοκτόνου δράσης των φαγοκυττάρων. Η δοκιμασία χρησιμοποιείται για τον προσδιορισμό των εφεδρικών δυνατοτήτων των ενδοκυτταρικών συστημάτων των φαγοκυττάρων. Με διατηρημένη ενδοκυτταρική αντιβακτηριακή δράση στα φαγοκύτταρα, παρατηρείται απότομη αύξηση στον αριθμό των θετικών στη φορμαζάνη ουδετερόφιλων μετά τη διέγερση τους με λάτεξ. Η μείωση των τιμών της δοκιμασίας ενεργοποιημένης NBT των ουδετερόφιλων κάτω από 40% και των μονοκυττάρων κάτω από 87% υποδηλώνει ανεπαρκή φαγοκυττάρωση.

[ 5 ]