Ανοσολογικές μέθοδοι διάγνωσης κληρονομικών ασθενειών

Πρόσφατα, το κύριο σύμπλεγμα ιστοσυμβατότητας - HLA (Ανθρώπινα Αντιγόνα Λευκοκυττάρων) έχει αρχίσει να θεωρείται ως ένας σημαντικός ανοσολογικός δείκτης της γενετικής του πληθυσμού. Τα αντιγόνα αυτού του συστήματος προσδιορίζονται ανοσολογικά στα λευκοκύτταρα του αίματος. Το σύμπλεγμα γονιδίων HLA βρίσκεται συμπαγώς στον βραχύ βραχίονα του χρωμοσώματος 6 (6p21.3). Ο εντοπισμός αυτού του συστήματος και η έκταση των τόπων του στο χρωμόσωμα μας επέτρεψαν να υπολογίσουμε ότι το σύμπλεγμα αποτελεί περίπου το 1/1000 της γονιδιακής δεξαμενής του οργανισμού. Τα αντιγόνα ιστοσυμβατότητας συμμετέχουν στη ρύθμιση της ανοσολογικής απόκρισης του οργανισμού, στη διατήρηση της ανοσολογικής ομοιόστασης. Λόγω του πολυμορφισμού τους και του συμπαγούς εντοπισμού των αντιγόνων HLA, έχουν αποκτήσει μεγάλη σημασία ως γενετικός δείκτης.

Αυτή τη στιγμή, έχουν ανακαλυφθεί περισσότερα από 200 αλληλόμορφα αυτού του συστήματος. Πρόκειται για το πιο πολυμορφικό και βιολογικά σημαντικό γενετικό σύστημα του ανθρώπινου σώματος. Διαταραχές διαφόρων λειτουργιών του μείζονος συμπλέγματος ιστοσυμβατότητας συμβάλλουν στην ανάπτυξη μιας σειράς ασθενειών, κυρίως αυτοάνοσων, ογκολογικών και λοιμωδών.

Σύμφωνα με τη θέση του συμπλόκου HLA στο χρωμόσωμα 6, διακρίνονται οι ακόλουθοι τόποι: D/DR, B, C, A. Νέοι τόποι G, E, H, F έχουν ανακαλυφθεί σχετικά πρόσφατα. Ο βιολογικός τους ρόλος μελετάται ενεργά επί του παρόντος. Τρεις κατηγορίες αντιγόνων διακρίνονται στο σύμπλεγμα μείζονος ιστοσυμβατότητας. Τα αντιγόνα κατηγορίας Ι κωδικοποιούνται από τους τόπους A, B, C. Νέοι τόποι ανήκουν επίσης σε αυτήν την κατηγορία. Τα αντιγόνα κατηγορίας II κωδικοποιούνται από τους τόπους DR, DP, DQ, DN, DO. Τα γονίδια των κατηγοριών I και II κωδικοποιούν αντιγόνα μεταμόσχευσης. Τα γονίδια κατηγορίας III κωδικοποιούν συστατικά του συμπληρώματος (C2, C4a, C4b, Bf), καθώς και τη σύνθεση ισομορφών ενός αριθμού ενζύμων (φωσφογλυκομουτάση, γλυκοξυλάση, πεψινογόνο-5, 21-υδροξυλάση).

Η παρουσία Ag που σχετίζεται με μια συγκεκριμένη ασθένεια σε ένα άτομο μας επιτρέπει να υποθέσουμε αυξημένη προδιάθεση για αυτήν την παθολογία και, σε ορισμένες συσχετίσεις, αντίθετα, αντίσταση σε αυτήν.

Ο προσδιορισμός των αντιγόνων του συστήματος HLA πραγματοποιείται σε λεμφοκύτταρα που απομονώνονται από το περιφερικό αίμα χρησιμοποιώντας ορούς ιστοτυπίας σε μικρολεμφοκυτταροτοξική αντίδραση ή μοριακές γενετικές μεθόδους.

Η δημιουργία συσχετιστικών δεσμών μεταξύ ασθενειών και του αντιγόνου του μείζονος συμπλέγματος ιστοσυμβατότητας επιτρέπει:

• να εντοπίζουν ομάδες που διατρέχουν αυξημένο κίνδυνο εμφάνισης της νόσου·
• προσδιορισμός του πολυμορφισμού του, δηλαδή προσδιορισμός ομάδων ασθενών με χαρακτηριστικά της πορείας ή της παθογένεσης της νόσου · από αυτή την άποψη, μπορεί να πραγματοποιηθεί ανάλυση της συντροπίας των ασθενειών, προσδιορίζοντας τις γενετικές προϋποθέσεις για τον συνδυασμό διαφόρων μορφών παθολογίας · η συσχέτιση με αντιγόνα που καθορίζουν την αντοχή στις ασθένειες επιτρέπει τον εντοπισμό ατόμων με μειωμένο κίνδυνο ανάπτυξης αυτής της παθολογίας.
• διεξάγει διαφορική διάγνωση ασθενειών ·
• καθορίστε την πρόγνωση·
• αναπτύξουν βέλτιστες τακτικές θεραπείας.

Δεδομένου ότι οι περισσότερες ασθένειες δεν έχουν άμεση σχέση με τα αντιγόνα του μείζονος συμπλέγματος ιστοσυμβατότητας, προτάθηκε η θεωρία των «δύο γονιδίων» για να εξηγήσει τη συσχέτιση μεταξύ ασθενειών και αντιγόνων HLA. Σύμφωνα με αυτή τη θεωρία, υπάρχει ένα γονίδιο ανοσολογικής απόκρισης (γονίδια) (γονίδιο Ir) που συνδέεται στενά με αντιγόνα HLA και γονίδια που ρυθμίζουν την ανοσολογική απόκριση. Τα προστατευτικά γονίδια καθορίζουν την αντοχή στις ασθένειες, ενώ τα προκλητικά γονίδια καθορίζουν την ευαισθησία σε ορισμένες ασθένειες.

Ο σχετικός κίνδυνος της νόσου για άτομα με τον αντίστοιχο γονότυπο υπολογίζεται χρησιμοποιώντας τον τύπο: x = [h _p × (1 - h _c )] / [h _c × (1 - h _p )], όπου h _p είναι η συχνότητα του χαρακτηριστικού στους ασθενείς και h _c είναι η συχνότητα σε άτομα της ομάδας ελέγχου.

Ο σχετικός κίνδυνος δείχνει το μέγεθος της συσχέτισης της νόσου με ένα συγκεκριμένο Ag/Ag του συστήματος HLA (δίνει μια ιδέα για το πόσες φορές υψηλότερος είναι ο κίνδυνος ανάπτυξης της νόσου παρουσία Ag σε σύγκριση με την απουσία του). Όσο υψηλότερος είναι αυτός ο δείκτης σε έναν ασθενή, τόσο υψηλότερη είναι η συσχετιστική σύνδεση με τη νόσο.

Συσχέτιση ανθρώπινων ασθενειών με HLA-Ag (συχνότητα γονιδίων,%)

Ασθένειες	HLA	Ομάδα ελέγχου,%	Αρρωστος,%	Σχετικός κίνδυνος
Ρευματολογία
Αγκυλοποιητική σπονδυλίτιδα	Β27	5-7	90-93	90-150
Σύνδρομο Reiter	Β27	6-9	69-76	32-49.6
Αρθρίτιδα που προκαλείται από λοιμώξεις:
- Γερσίνια	Β27		58-76	17,59
- Σαλμονέλα	Β27		60-69	17,57
Ψωριασική αρθρίτιδα	Β13		9-37	4,79
Ρευματοειδής αρθρίτιδα	Dw4	12-19	48-72	3.9-12.0
	DR4	20-32	70	4.9-9.33
Σύνδρομο Μπεχτσέτ	Β5	13	48-86	7.4-16.4
SKV	Β5		11-34	1,83
	Β8		19-48	2.11
	Bw15	6-10	21-40	5.1
	DR2	26.4	57.1	3,80
	DR3	22.2	46.4	2,90
Σύνδρομο Gougerot-Sjogren	Β8		38-58	3.15
	Dw3	26	69-87	19,0
Καρδιολογία
Ιδιοπαθής στεφανιαία νόσος (ΙHD)	Β7	27,8	45,8	2.19
	Β14	7.5	14.8	2.14
	Β15	11.1	20.4	2.05
	Cw4	18.7	32,8	2.12
Υπέρταση	Β18	10.4	22.6	2.52
	Αυ19	12.6	28.3	2,74
Ενδοκρινολογία
Διαβήτης τύπου 1	Β8	32	52-55	2.1-2.5
	Β18		5-59	1,65
	Β15	12	18-36	1,89-3,9
	Dw3	26	48-50	2.9-3.8
	Dw4	19	42-49	3,5-3,9
	DR3 DR3/DR4	20	60	6.10 33
Υπερθυρεοειδισμός	Β8	21	35-49	2.34-3.5
	Δ3	26	61	4.4
	DR3	20	51	4.16
Υποξεία θυρεοειδίτιδα (νόσος de Quervain)	Bw35	13	63-73	16,81
	Dw1		33	2.1
Νόσος του Άντισον	Β8		20-80	3,88-6,4
	Dw3	26	70-76	8,8-10,5
Σύνδρομο Itsenko-Cushing	Α1		49	2,45
Γαστρεντερολογία
Κακοήθης αναιμία	Β7	19	26-52	1.7-3.1
	DR5	6	25	5.20
Ατροφική γαστρίτιδα	Β7		37	2,55
Πεπτικό έλκος του δωδεκαδακτύλου	Α2	48.1	61,3	1.7
	Α10	20.6	63,3	6,65
	Β14	4.0	10.3	2,76
	Β15	6.6	24.4	4,56
	Β40	9,72	23.3	2,82
Αυτοάνοση ηπατίτιδα	Β8	16	37-68	2.8-4.1
	DR4	24	71	7,75
Φορείς HBsAg	Bw41		12	11.16
	Β15		10-19	0,29

Ασθένειες	HLA	Ομάδα ελέγχου,%	Αρρωστος,%	Σχετικός κίνδυνος
Δερματολογία
Ψωρίαση	Bw17	6-8	22-36	3.8-6.4
	Β13	3-5	15-27	4.2-5.3
	Bw16	5	15	2.9
ερπητοειδής δερματίτιδα	Β8	27-29	62-63	4.00-4.6
	DR3	19	80	16,60
Σκληρόδερμα	Β7	24	35	1.7
Πέμφιγα	Α10			3.1
Ατοπική δερματίτιδα	Β13	6,86	21.28	3,67
	Β27	9,94	25,53	3.11
	A10/B13	0,88	8.51	10,48
Εκζεμα	Α10	19,64	36,67	2.37
	Β27	9,94	26,67	3.29
Κνίδωση και οίδημα Quincke	Β13	6,86	21,21	3,65
	Β5.8	1.42	12,12	9,57
	Β5.35	0,71	6.06	9.02
Νευρολογία
Πολλαπλή σκλήρυνση	Α3	25	36-37	2.7-2.8
	Β7	25-33	36-42	1.4-2.0
	Dw2	16-26	60-70	4.3-12.2
	DR2	35	51.2	1,95
	DR3	20	32,5	1,93
Μυασθένεια	Β8	21-24	52-57	3,4-5,0
	Α1	20-25	23-56	3.8
	DR3	26	50	2.5
Πνευμονολογία
Βρογχικό άσθμα (σε ασθενείς ηλικίας 19-30 ετών)	Β21	4.62	12.5	2,95
	Β22	9,94	19,64	2.22
	Β27	12.31	37,5	4.27
	Β35	0,11	5.36	51.4
	Β27/35	0,47	7.14	16.2
Άλλες ασθένειες
Αγγειοκινητική ρινίτιδα	Α3	26,98	52,38	2,98
	Β17	7,57	28,57	4,88
	Α3/10	2,72	23,83	11.18
	Β7/17	0,47	9.52	22.28

Τα δεδομένα που παρουσιάζονται στον πίνακα δείχνουν ότι οι ισχυρότεροι συσχετιστικοί δεσμοί εντοπίζονται σε ασθένειες με πολυγονιδιακό ή πολυπαραγοντικό τύπο κληρονομικότητας.

Έτσι, ο προσδιορισμός αντιγόνων του κύριου συμπλέγματος ιστοσυμβατότητας στα κύτταρα του αίματος (λευκοκύτταρα) μας επιτρέπει να προσδιορίσουμε τον βαθμό ατομικής προδιάθεσης ενός ατόμου σε μια συγκεκριμένη ασθένεια και, σε ορισμένες περιπτώσεις, να χρησιμοποιήσουμε τα αποτελέσματα της έρευνας για διαφορική διάγνωση, αξιολόγηση πρόγνωσης και επιλογή τακτικών θεραπείας. Για παράδειγμα, η ανίχνευση αντιγόνων HLA-B27 χρησιμοποιείται στη διαφορική διάγνωση αυτοάνοσων ασθενειών. Ανιχνεύεται στο 90-93% των ασθενών της καυκάσιας φυλής με αγκυλοποιητική σπονδυλίτιδα και σύνδρομο Reiter. Σε υγιείς εκπροσώπους αυτής της φυλής, τα αντιγόνα HLA-B27 ανιχνεύονται μόνο στο 5-7% των περιπτώσεων. Τα αντιγόνα HLA-B27 ανιχνεύονται συχνά στην ψωριασική αρθρίτιδα, στις χρόνιες φλεγμονώδεις παθήσεις του εντέρου που εμφανίζονται με ιερολαγονίτιδα και σπονδυλίτιδα, στη ραγοειδίτιδα και στην αντιδραστική αρθρίτιδα.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ]