Ανοσοηλεκτροφόρηση των πρωτεϊνών του αίματος

Δεν υπάρχουν παραπρωτεΐνες στον ορό του αίματος.

Οι ανοσοσφαιρινικές παθήσεις ή οι γαμοπάθειες συνδυάζουν μια μεγάλη ομάδα παθολογικών καταστάσεων που χαρακτηρίζονται από πολυκλωνική ή μονοκλωνική υπεργαμμασφαιριναιμία. Οι ανοσοσφαιρίνες αποτελούνται από δύο βαριές (Η) αλυσίδες (μοριακό βάρος 50.000) και δύο ελαφρές (L) αλυσίδες (μοριακό βάρος 25.000). Οι αλυσίδες συνδέονται με δισουλφιδικές γέφυρες και αποτελούνται από δομές που ονομάζονται πεδία (H - από 4, L - από 2 τομείς). Κάτω από τη δράση των πρωτεολυτικών ενζύμων, η Ig διαιρείται σε θραύσματα: το θραύσμα Fc και το θραύσμα Fab. Οι βαρειές αλυσίδες της ανθρώπινης Ig αντιπροσωπεύονται από πέντε δομικές παραλλαγές, οι οποίες σημειώνονται με τα γράμματα του ελληνικού αλφαβήτου: γ, α, μ, δ, ε. Οι ελαφριές αλυσίδες αντιπροσωπεύονται από δύο δομικά διαφορετικές παραλλαγές: κ (κάπα) και λ (λάμδα), που αντιστοιχούν σε δύο τύπους Ig κάθε κατηγορίας. Σε κάθε μόριο Ig, οι βαριές και ελαφρές αλυσίδες είναι ταυτόσημες. Όλοι οι άνθρωποι έχουν συνήθως Ig όλων των τάξεων και τους δύο τύπους, αλλά το σχετικό τους περιεχόμενο δεν είναι το ίδιο. Η αναλογία των μορίων κ και λ εντός των διαφόρων κατηγοριών Ig δεν είναι επίσης η ίδια. Η ανίχνευση μιας παραβίασης της Ig ή των θραυσμάτων τους παίζει καθοριστικό ρόλο στη διάγνωση μονοκλωνικών ανοσοσφαιρινών.

Μονοκλωνικά immunoglobulinopatiya (paraproteinemia) - ένα σύνδρομο που εκφράζεται στην συσσώρευση στον ορό ή / και ούρα όλων των ασθενών ομοιογενές φυσικο-χημικών και βιολογικών παραμέτρων Ig, ή θραύσματα αυτών. Μονοκλωνικά Ig (παραπρωτεϊνών, Μ-πρωτεΐνες) - έκκριση προϊόντος μόνον κλώνο λεμφοκυττάρων Β (πλασματοκύτταρα), και ως εκ τούτου αντιπροσωπεύουν μία δομικώς ομοιογενές πισίνα μορίων που έχουν μια βαριά αλυσίδα μιας κατηγορίας (υποκατηγορία) του ίδιου τύπου ελαφριάς αλυσίδας και την μεταβλητή περιοχή της ίδιας δομής. Οι μονοκλωνικές ανοσοσφαιρινικές παθήσεις συνήθως διαιρούνται σε καλοήθη και κακοήθη. Σε καλοήθεις μονοκλωνικό μορφές γαμμοπάθεια πολλαπλασιασμό των κυττάρων του πλάσματος ελέγχεται (πιθανώς από το ανοσοποιητικό σύστημα) έτσι ώστε τα κλινικά συμπτώματα είναι απόντα. Σε κακοήθεις μορφές συμβαίνει ανεξέλεγκτο πολλαπλασιασμό των λεμφοειδών κυττάρων ή στο πλάσμα, η οποία προκαλεί μια κλινική εικόνα της νόσου.

Ταξινόμηση της μονοκλωνικής ανοσοσφαιρινιοπάθειας

Κατηγορία γονόρροιας	Φύση της παθολογίας	Συγκέντρωση της παθολογικής Ig στον ορό, g / l
Β-κακοήθη κύτταρα	Πολλαπλό μυέλωμα, βακτηριοσφαιριναιμία Waldenström	Περισσότεροι από 25
	Plasmacytoma (μοναχικό - οστό και εξωμυελική), λέμφωμα, χρόνια λεμφοκυτταρική λευχαιμία, βαριά αλυσίδα	Σημαντικά κάτω από 25
Β-κύτταρα καλοήθη	Μονοκλωνικές γαμμαπάθειες άγνωστης προέλευσης	Παρακάτω είναι 25
Οι καταστάσεις ανοσοανεπάρκειας με ανισορροπία των μονάδων Τ και Β του ανοσοποιητικού συστήματος	Πρωτογενή (Σύνδρομα Wiskott-Aldrich, Di-Georgi, Nezalef, Σοβαρή Συνδυασμένη Ανοσοανεπάρκεια)	Παρακάτω είναι 25
	Δευτερογενής (ηλικία προκαλούνται από τη χρήση των ανοσοκατασταλτικών, ογκολογικών νόσων που σχετίζονται λεμφοειδή φύση (π.χ. καρκίνο του παχέος εντέρου, του μαστού, του προστάτη, κλπ).	Κάτω από 2.5
Οι καταστάσεις ανοσοανεπάρκειας με ανισορροπία των μονάδων Τ και Β του ανοσοποιητικού συστήματος	Ανοικοδόμηση του ανοσοποιητικού συστήματος μετά από μεταμόσχευση κόκκινου μυελού των οστών	Παρακάτω είναι 25
	Αντιγονική διέγερση στην πρώιμη οντογένεση (ενδομήτρια μόλυνση)	Παρακάτω είναι 25
Ομογενής ανοσολογική αντίδραση	Βακτηριακές λοιμώξεις	Παρακάτω είναι 25
	Αυτοάνοσες ασθένειες, όπως κρυογλοβουλνησία, ΣΕΛ, ρευματοειδής αρθρίτιδα, κλπ.	Παρακάτω είναι 25

Η ανοσοηλεκτροφόρηση πρωτεϊνών ορού αίματος επιτρέπει την ανίχνευση μονοκλωνικών (παθολογικών) IgA, IgM, IgG, αλυσίδων Η και L, παραπρωτεϊνών. Με την κανονική ηλεκτροφόρηση, η κανονική Ig, ετερογενής σε ιδιότητες, βρίσκεται στη γ ζώνη, σχηματίζοντας ένα οροπέδιο ή μια ευρεία ζώνη. Οι μονοκλωνικές Ig, λόγω της ομοιογένειάς τους, μεταναστεύουν κυρίως στη ζώνη γ, περιστασιακά στη ζώνη β και ακόμη στην περιοχή α, όπου σχηματίζουν μια υψηλή κορυφή ή μια σαφώς οριοθετημένη ζώνη (κλίση Μ).

Το πολλαπλό μυέλωμα (ασθένεια Rustitzky-Kahler) είναι η συχνότερη παραπρωτεϊναιμική αιμοβλάστωση. ανιχνεύεται όχι λιγότερο συχνά από τη χρόνια μυελο- και λεμφοκυτταρική λευχαιμία, τη λεμφογρονουλωμάτωση και την οξεία λευχαιμία. Η τάξη και ο τύπος της παθολογικής Ig που εκκρίνεται από το μυέλωμα καθορίζει την ανοσοχημική παραλλαγή της νόσου. Η συχνότητα των τάξεων και τύπων παθολογικής Ig στο μυέλωμα ως σύνολο συσχετίζεται με την αναλογία των κατηγοριών και των τύπων της φυσιολογικής Ig σε υγιείς ανθρώπους.

Μαζί με την αύξηση του περιεχομένου της παθολογικής Ig στον ορό ασθενών με πολλαπλό μυέλωμα, προσδιορίζεται η φυσιολογική Ig σε μειωμένη συγκέντρωση. Η περιεκτικότητα σε ολικές πρωτεΐνες αυξάνεται σημαντικά - έως και 100 g / l. Η δραστικότητα της διεργασίας με μυελοειδές G εκτιμάται από τον αριθμό των πλασμοκυττάρων στο σημείο της στερνής, τη συγκέντρωση της κρεατινίνης και του ασβεστίου στον ορό (η αύξηση του ασβεστίου τους υποδεικνύει πρόοδο της νόσου). Η συγκέντρωση της Μ-πρωτεΐνης (στα ούρα που ονομάζεται πρωτεΐνη Bens-Jones) χρησιμεύει ως κριτήριο για την αξιολόγηση της εξέλιξης της νόσου στο μυέλωμα Α. Η συγκέντρωση των παραπρωτεϊνών στον ορό και στα ούρα ποικίλει κατά τη διάρκεια της νόσου υπό την επίδραση της θεραπείας.

Για τη διάγνωση πολλαπλού μυελώματος, απαιτούνται τα ακόλουθα κριτήρια.

Μεγάλα κριτήρια

1. Plasmacytoma από τα αποτελέσματα μιας βιοψίας.
2. Πλασμοκυττάρωση στον ερυθρό μυελό των οστών (περισσότερο από 30% των κυττάρων).
3. Οι κορυφές της μονοκλωνικής (παθολογικής) Ig στην ηλεκτροφόρηση της πρωτεΐνης ορού γάλακτος: περισσότερο από 35 g / l για την κορυφή της IgG ή περισσότερο από 20 g / l για την κορυφή της IgA. Η απέκκριση των κ και λ αλυσίδων σε ποσότητα 1 g / ημέρα ή περισσότερο, αποκαλυπτόμενη με ηλεκτροφόρηση ούρων σε ασθενή χωρίς αμυλοείδωση.

Μικρά κριτήρια

1. Πλασμοκυττάρωση στον ερυθρό μυελό των οστών από 10-30% των κυττάρων.
2. Κορυφή PIg στον ορό σε ποσότητα μικρότερη από αυτή που αναφέρθηκε παραπάνω.
3. Θανατηφόρες βλάβες των οστών.
4. Η συγκέντρωση του φυσιολογικού IgM είναι κάτω από 0,5 g / l, η IgA είναι κάτω από 1 g / l ή η IgG είναι κάτω από 0,6 g / l.

Για τη διάγνωση πολλαπλού μυελώματος, απαιτούνται τουλάχιστον 1 μεγάλο και 1 μικρό κριτήριο ή 3 μικρά κριτήρια, με τα υποχρεωτικά κριτήρια των παραγράφων 1 και 2.

Για τον προσδιορισμό του σταδίου του μυελώματος, χρησιμοποιείται το σύστημα τυποποίησης του Dury-Salmon, το οποίο αντανακλά τον όγκο της αλλοίωσης του όγκου.

Όλες οι ομάδες μυελώματα διαιρούνται σε υποκατηγορίες, ανάλογα με την κατάσταση της νεφρικής λειτουργίας: Α - η συγκέντρωση της κρεατινίνης στον ορό λιγότερο από 2 mg% (176,8 umol / L), Β - 2 mg%. Σε υψηλές συγκεντρώσεις του μυελώματος β ₂ μικροσφαιρίνη στον ορό (πάνω από 6000 ng / ml) υποδηλώνει κακή πρόγνωση, καθώς και υψηλή δραστικότητα της LDH (μεγαλύτερη από 300 IU / L, θέτοντας την αντίδραση στους 30 ° C), αναιμία, νεφρική ανεπάρκεια, υπερασβεστιαιμία, υποαλβουμιναιμία και μεγάλο όγκο όγκου.

Οι ασθένειες των πνευμονικών αλυσίδων (μυελωμα Bence-Jones) αντιπροσωπεύουν περίπου το 20% των περιπτώσεων μυελώματος. Όταν Bence Jones μυελώματος σχηματίζονται αποκλειστικά ελεύθερο Οι ελαφριές αλυσίδες ανιχνεύονται στα ούρα (πρωτεΐνη Bence-Jones) απουσία μίας παθολογικής ορού Ig (Μ βαθμίδωση).

Στάδια πολλαπλού μυελώματος

Στάδιο	Κριτήρια	Βάρος όγκου (αριθμός κυττάρων), χ 10 12 / m 2
Εγώ	Μικρό μυέλωμα με τα ακόλουθα κριτήρια: η συγκέντρωση της αιμοσφαιρίνης στο αίμα είναι μεγαλύτερη από 100 g / l. η συγκέντρωση ολικού ασβεστίου στον ορό αίματος είναι φυσιολογική (<3 mmol / l). καμία μεταβολή στα οστά κατά τη διάρκεια της ακτινογραφίας ή του μοναχικού πλασματοτμήματος του οστού. χαμηλή συγκέντρωση παραπρωτεϊνών στον ορό του αίματος (IgG κάτω από 50 g / l, IgA κάτω από 30 g / l). L-αλυσίδες (πρωτεΐνη Bence-Jones) στα ούρα λιγότερο από 4 g / 24 h	<0,6
II	Ενδιάμεσο μυέλωμα (τα κριτήρια είναι μεταξύ των σταδίων Ι και ΙΙΙ)	0.6-1.2
III	Ένα μεγάλο μυέλωμα με ένα ή περισσότερα από τα ακόλουθα κριτήρια: η συγκέντρωση της αιμοσφαιρίνης στο αίμα είναι κάτω από 85 g / l. η συγκέντρωση ολικού ασβεστίου στον ορό πάνω από 12 mg% (3 mmol / l). εκτεταμένη αλλοίωση του σκελετού ή μεγάλα κατάγματα. υψηλή συγκέντρωση παραπρωτεϊνών στον ορό του αίματος (IgG μεγαλύτερη από 70 g / l, IgA μεγαλύτερη από 50 g / l). L-αλυσίδες (πρωτεΐνη Bens-Jones) στα ούρα περισσότερο από 12 g / 24 h.	> 1,2

Οι σπάνιες ανοσοχημικές εφαρμογές περιλαμβάνουν μη-εκκριτικό μυέλωμα παραπρωτεϊνών μυελώματος στις οποίες μπορεί να ανιχνευθεί μόνο στο κυτταρόπλασμα των κυττάρων μυελώματος και diklonovye μυελώματος και μυελώματος-M.

μακροσφαιριναιμία του Waldenstrom - subleukemic χρόνια λευχαιμία, Β-κυτταρικής προέλευσης, μορφολογικά εκπροσωπούμενη από λεμφοκύτταρα, κύτταρα πλάσματος, και όλες οι μεταβατικές μορφές κύτταρα τα οποία συνθέτουν RIgM (μακροσφαιρίνη). Ο όγκος έχει χαμηλό βαθμό κακοήθειας. Στην πολλαπλασιασμού μυελού των οστών ανιχνεύει μικρές βασεόφιλα λεμφοκύτταρα (πλασματοκυτταροειδή λεμφοκύτταρα) αυξημένος αριθμός των μαστοκυττάρων. Στην electrophoregram πρωτεΐνες ορού αποκαλύπτουν Μ-βαθμίδωση β- ζώνη ή γ-σφαιρίνες, τουλάχιστον παραπρωτεϊνης δεν μεταναστεύει σε ένα ηλεκτρικό πεδίο ενώ παραμένει στη θέση του. Ανοσοχημικά, αντιπροσωπεύει PIgM με έναν τύπο ελαφριάς αλυσίδας. Η συγκέντρωση του PIgM στον ορό αίματος με την μακροσφαιριναιμία Waldenstrom κυμαίνεται από 30 έως 79 g / l. Σε 55-80% των ασθενών, βρέθηκε μια πρωτεΐνη Bens-Jones στα ούρα. Η συγκέντρωση της φυσιολογικής Ig στο αίμα μειώνεται. Η νεφρική ανεπάρκεια αναπτύσσεται σπάνια.

Λεμφώματα. Η πιο συχνά καταγράφεται IgM-εκκρίνουν λέμφωμα, η δεύτερη θέση είναι κατειλημμένη από paraproteinemic λέμφωμα εκκρίνουν των IgG, IgA-λέμφωμα paraproteinemia ανιχνεύεται εξαιρετικά σπάνια. Η μείωση της συγκέντρωσης της φυσιολογικής Ig (συνήθως σε μικρό βαθμό) με λεμφώματα καταγράφεται στους περισσότερους ασθενείς.

Ασθένειες βαριάς αλυσίδας - λεμφικοί όγκοι Β-κυττάρων, συνοδευόμενοι από την παραγωγή μονοκλωνικών θραυσμάτων βαριάς αλυσίδας Ig. Οι ασθένειες των βαριών αλυσίδων είναι πολύ σπάνιες. Υπάρχουν 4 τύποι ασθένειας βαριάς αλυσίδας: α, γ, μ, δ. Οι βαριές αλυσίδες γ νόσου εμφανίζεται συνήθως σε άνδρες κάτω των 40 ετών, που χαρακτηρίζεται από διόγκωση του ήπατος, σπλήνα, λεμφαδένες, πρήξιμο του μαλακού ουρανίσκου και της γλώσσας, ερύθημα, πυρετό. Η καταστροφή των οστών, κατά κανόνα, δεν αναπτύσσεται. Η συγκέντρωση της παθολογικής σφαιρίνης στον ορό του αίματος είναι χαμηλή, η ESR είναι φυσιολογική. Λεμφοειδή κύτταρα και κύτταρα πλάσματος διαφορετικών βαθμών ωριμότητας βρίσκονται στον μυελό των οστών. Η ασθένεια προχωρά γρήγορα και τελειώνει με το θάνατο μέσα σε λίγους μήνες. Η νόσος των βαριών αλυσίδων ανιχνεύεται κυρίως στους ηλικιωμένους, εκδηλώνεται συχνότερα με ηπατοσπληνομεγαλία. Ο όγκος υποστρώματος - λεμφοειδή στοιχεία διαφόρων βαθμών ωριμότητας. Έχουν περιγραφεί μεμονωμένες περιπτώσεις βαρειάς αλύσου δ, προχωράει ως μυέλωμα. Η ασθένεια σοβαρής αλυσίδας α είναι η πιο κοινή μορφή που αναπτύσσεται κυρίως σε παιδιά και άτομα κάτω των 30 ετών, το 85% των περιπτώσεων αναφέρεται στη Μεσόγειο. Η ανοσοηλεκτροφόρηση του ορού αίματος και των ούρων είναι η μοναδική μέθοδος διάγνωσης της νόσου, καθώς συχνά απουσιάζει μια κλασική βαθμίδα Μ επί του ηλεκτροφογράμματος των πρωτεϊνών του ορού.

Αντιδραστική paraproteinemia συμβαίνουν υπό την παρουσία μιας γενετικής προδιάθεσης σε απόκριση προς βακτηριακές και ιογενείς λοιμώξεις (ηπατίτιδα, λοίμωξη CMV) ή μιας παρασιτικής μόλυνσης (λεϊσμανίαση, τοξοπλάσμωση, σχιστοσωμίαση). Αυτή η μορφή του μονοκλωνικού immunoglobulinopatii καταχωρηθεί στη μεταμόσχευση οργάνων, η θεραπεία με κυτταροστατικά, κληρονομική ή επίκτητη ανοσοανεπάρκεια. Παροδική paraproteinemia χαρακτηρίζονται από χαμηλές συγκεντρώσεις του χοίρου στον ορό, η έλλειψη πρωτεΐνης και ιχνοποσοτήτων της Bence-Jones στα ούρα.

Η συνδεδεμένη παραπρωτεϊναιμία συνοδεύει μια σειρά ασθενειών στην παθογένεση των οποίων παίζουν ρόλο οι ανοσοποιητικοί μηχανισμοί: αυτοάνοσες ασθένειες, όγκοι, χρόνιες λοιμώξεις. Αυτές οι ασθένειες περιλαμβάνουν την ΑΙ-αμυλοείδωση και την κρυογλοβουλνημία.

Η ιδιοπαθητική παραπρωτεϊναιμία εμφανίζεται σε ηλικιωμένους και μπορεί να είναι πρεμομυικές συνθήκες. Σε τέτοιες περιπτώσεις, είναι απαραίτητη μια διεξοδική εξέταση για τον προσδιορισμό του αρχικού σταδίου της νόσου και της παρατεταμένης δυναμικής παρατήρησης.

Τα συμπτώματα περιλαμβάνουν καλοήθη paraproteinemia: καμία Bence-Jones πρωτεΐνης, μεταβολές στη συγκέντρωση της κανονικής Ig, ο αριθμός των κυττάρων του πλάσματος στην στικτή μυελό των οστών λιγότερο από 15%, λιγότερο από 20% λεμφοκύτταρα, συγκέντρωση παραπρωτεϊνης ορού είναι κάτω από 30 g / l.

[1], [2], [3], [4], [5], [6], [7],