Αντισώματα έναντι νουκλεϊκών αντιγόνων (αντιπυρηνικός παράγοντας) στο αίμα

Σε υγιείς ανθρώπους, ο τίτλος αντισωμάτων έναντι πυρηνικών αντιγόνων στον ορό του αίματος είναι 1:40-1:80 (ο κλινικά σημαντικός τίτλος είναι ≥1:160 όταν χρησιμοποιείται η έμμεση μέθοδος ανοσοφθορισμού, όταν χρησιμοποιούνται μέθοδοι διαλογής - κάτω από 1:50).

Αντιπυρηνικός παράγοντας - αντισώματα έναντι ολόκληρου του πυρήνα. Πρόκειται για μια ετερογενή ομάδα αυτοαντισωμάτων που αντιδρούν με διάφορα συστατικά του πυρήνα. Ο προσδιορισμός αντισωμάτων έναντι πυρηνικών αντιγόνων στον ορό του αίματος είναι μια δοκιμασία για συστηματικές παθήσεις του συνδετικού ιστού. Ο έλεγχος για την παρουσία αντιπυρηνικών αντισωμάτων στον ορό του αίματος πραγματοποιείται με ραδιοανοσοδοκιμασία (RIA), αντίδραση στερέωσης συμπληρώματος (CFR) ή ELISA.

Τα θετικά αποτελέσματα διαλογής θα πρέπει να επιβεβαιώνονται με τη μέθοδο έμμεσου ανοσοφθορισμού. Παρασκευάσματα που παρασκευάζονται από ένα εναιώρημα κυττάρων με μεγάλους πυρήνες [από ανθρώπινα επιθηλιακά κύτταρα της σειράς HEp-2 - καρκινικά κύτταρα λάρυγγα ή τομές ήπατος ποντικού] χρησιμοποιούνται ως κυτταρικό υπόστρωμα. Ο τύπος χρώσης (η φύση της κατανομής της φθορίζουσας ετικέτας στα κύτταρα) είναι διαφορετικός για διαφορετικές ασθένειες και καθορίζει την κατεύθυνση του περαιτέρω προσδιορισμού της εξειδίκευσης των αντιπυρηνικών αντισωμάτων.

• Η διάχυτη χρώση (ομοιόμορφη κατανομή της ετικέτας) είναι η λιγότερο ειδική, πιθανή στον συστηματικό ερυθηματώδη λύκο, το σύνδρομο φαρμακευτικού ερυθηματώδους λύκου και άλλες αυτοάνοσες ασθένειες, καθώς και σε ηλικιωμένα άτομα. Σε περίπτωση διάχυτης χρώσης κυττάρων, η αντίδραση πρέπει να επαναληφθεί με υψηλότερη αραίωση του ορού αίματος που εξετάζεται. Εάν ο τύπος χρώσης παραμείνει ο ίδιος, είναι πολύ πιθανό το αντιγόνο έναντι του οποίου στρέφονται τα αντιπυρηνικά αντισώματα να είναι η δεοξυριβονουκλεοπρωτεΐνη.
• Ομογενής ή περιφερειακή χρώση παρατηρείται όταν στον εξεταζόμενο ορό κυριαρχούν αντισώματα κατά του δίκλωνου DNA. Αυτός ο τύπος χρώσης απαντάται συχνότερα στον συστηματικό ερυθηματώδη λύκο.
• Η κηλιδωτή ή στικτή χρώση οφείλεται σε αντισώματα έναντι εκχυλίσιμων πυρηνικών αντιγόνων και συνήθως παρατηρείται σε μικτή νόσο του συνδετικού ιστού, σύνδρομο Sjögren και σύνδρομο φαρμακευτικού λύκου.
• Η πυρηνική χρώση (κατανομή της ετικέτας στα πυρηνόλια) προκαλείται από αντισώματα έναντι της ριβονουκλεοπρωτεΐνης (βλ. παρακάτω). Αυτός ο τύπος χρώσης είναι τυπικός για τη συστηματική σκληροδερμία και είναι περιστασιακά πιθανός και σε άλλες αυτοάνοσες ασθένειες.
• Η κεντρομερική ή διακριτή κηλιδωτή χρώση προκαλείται από αντισώματα στο κεντρομερές (μια εξειδικευμένη περιοχή των χρωμοσωμάτων) και είναι χαρακτηριστική του συνδρόμου CREST και άλλων αυτοάνοσων ρευματικών νοσημάτων.

Ο κύριος στόχος της μελέτης για τα αντιπυρηνικά αντισώματα είναι η ταυτοποίηση του συστηματικού ερυθηματώδους λύκου, καθώς σε αυτή την ασθένεια εμφανίζονται στον ορό του αίματος του 95% των ασθενών εντός 3 μηνών από την εμφάνισή της.

Ο προσδιορισμός αντισωμάτων έναντι πυρηνικών αντιγόνων έχει μεγάλη σημασία για τη διάγνωση των κολλαγονώσεων. Στην οζώδη πολυαρτηρίτιδα, ο τίτλος (χρησιμοποιώντας μεθόδους διαλογής) μπορεί να αυξηθεί σε 1:100, στην δερματομυοσίτιδα - σε 1:500, στον συστηματικό ερυθηματώδη λύκο - σε 1:1000 και υψηλότερο. Στον συστηματικό ερυθηματώδη λύκο, η δοκιμασία για την ανίχνευση αντιπυρηνικού παράγοντα έχει υψηλό βαθμό ευαισθησίας (89%), αλλά μέτρια ειδικότητα (78%) σε σύγκριση με τη δοκιμασία για την ανίχνευση αντισωμάτων έναντι του φυσικού DNA (ευαισθησία 38%, ειδικότητα 98%). Τα αντισώματα έναντι πυρηνικών αντιγόνων είναι ιδιαίτερα ειδικά για τον συστηματικό ερυθηματώδη λύκο. Η διατήρηση υψηλού επιπέδου αντισωμάτων για μεγάλο χρονικό διάστημα είναι ένα δυσμενές σημάδι. Η μείωση του τίτλου προμηνύει ύφεση ή (μερικές φορές) θανατηφόρα έκβαση.

Στη σκληροδερμία, η συχνότητα ανίχνευσης αντισωμάτων έναντι πυρηνικών αντιγόνων είναι 60-80%, αλλά ο τίτλος τους είναι χαμηλότερος από ό,τι στον συστηματικό ερυθηματώδη λύκο. Δεν υπάρχει σχέση μεταξύ του τίτλου του αντιπυρηνικού παράγοντα στο αίμα και της σοβαρότητας της νόσου. Στη ρευματοειδή αρθρίτιδα, συχνά διακρίνονται μορφές της νόσου που μοιάζουν με ΣΕΛ, επομένως τα αντισώματα έναντι πυρηνικών αντιγόνων ανιχνεύονται αρκετά συχνά. Στη δερματομυοσίτιδα, τα αντισώματα έναντι πυρηνικών αντιγόνων στο αίμα ανιχνεύονται σε 20-60% των περιπτώσεων (τίτλος έως 1:500), στην οζώδη πολυαρτηρίτιδα - σε 17% (1:100), στη νόσο Sjögren - σε 56% όταν συνδυάζεται με αρθρίτιδα και σε 88% των περιπτώσεων στο σύνδρομο Gougerot-Sjögren. Στον δισκοειδή ερυθηματώδη λύκο, ο αντιπυρηνικός παράγοντας ανιχνεύεται στο 50% των ασθενών.

Εκτός από τις ρευματικές παθήσεις, αντισώματα έναντι πυρηνικών αντιγόνων στο αίμα ανιχνεύονται σε χρόνια ενεργό ηπατίτιδα (σε 30-50% των περιπτώσεων) και ο τίτλος τους φτάνει μερικές φορές το 1:1000. Αυτοαντισώματα έναντι πυρηνικών αντιγόνων μπορούν να εμφανιστούν στο αίμα σε λοιμώδη μονοπυρήνωση, οξεία και χρόνια λευχαιμία, επίκτητη αιμολυτική αναιμία, νόσο Waldenström, κίρρωση του ήπατος, χολική κίρρωση, ηπατίτιδα, ελονοσία, λέπρα, χρόνια νεφρική ανεπάρκεια, θρομβοπενία, λεμφοϋπερπλαστικές ασθένειες, μυασθένεια και θυμώματα.

Σε σχεδόν 10% των περιπτώσεων, ο αντιπυρηνικός παράγοντας ανιχνεύεται σε υγιείς ανθρώπους, αλλά σε χαμηλούς τίτλους (όχι περισσότερο από 1:50).

Τα τελευταία χρόνια έχει αναπτυχθεί μια μέθοδος ανοσοενζυμικής δοκιμασίας για τον προσδιορισμό αντιπυρηνικών αντισωμάτων διαφόρων φασμάτων, η οποία είναι εύκολη στην εκτέλεση και σταδιακά αντικαθιστά τη μέθοδο ανοσοφθορισμού.

Ορισμένα φάρμακα μπορούν να οδηγήσουν σε ψευδώς θετική αύξηση του τίτλου των αντιπυρηνικών αντισωμάτων: αμινοσαλικυλικά, καρβαμαζεπίνη, ισονιαζίδη, μεθυλντόπα, προκαϊναμίδη, ιωδίδια, από του στόματος αντισυλληπτικά, τετρακυκλίνες, θειαζιδικά διουρητικά, σουλφοναμίδες, νιφεδιπίνη, β-αναστολείς, υδραλαζίνη, πενικιλαμίνη, νιτροφουραντοΐνη κ.λπ., λόγω της ικανότητας αυτών των φαρμάκων να προκαλούν παρεμβολές κατά τη διάρκεια της μελέτης.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ]