Πειραματική εργασία για τη μεταμόσχευση αλλογενών κερατινοκυττάρων σε τεχνητά δημιουργημένες ουλές λευκών αρουραίων

Η επιθυμία να χρησιμοποιήσει το δυναμικό των κυττάρων και την ανάγκη εξεύρεσης νέων και αποτελεσματικών μεθόδων για τη βελτίωση της αισθητικής εμφάνισης των ουλών οδήγησε στην ιδέα να προσπαθήσει να διερευνήσει τη δυνατότητα μεταφύτευσης κερατινοκυττάρων ουλή στην επιφάνεια.

Προκειμένου να αποδειχθεί η δυνατότητα χρησιμοποίησης καλλιέργεια κερατινοκυττάρων για να ενισχύσει την εμφάνιση των ουλών πειραματική εργασία έχει γίνει για τη λευκή εργαστηριακούς αρουραίους, τα οποία δημιουργήθηκαν επιφάνεια ουλής. αρουραίοι μοντέλο ουλές παρασκευάστηκαν με τεχνητά επούλωση πληγές στην πλάτη, κατά μήκος της σπονδυλικής στήλης. Οι αρουραίοι κόπηκαν κομμάτια του ίδιου δέρματος, το μέγεθος των 2x3 cm. Μετά από 2,5 μήνες μετά τη λειτουργία «ουλές προσομοίωση» αρουραίους διεξήχθη χειρουργική δερμοαπόξεση (αφαίρεση των ανώτερων στρωμάτων μέσω ignioperation μεγάλης κοιλίας) και μεταμοσχεύονται αλλογενή κερατινοκύτταρα, απομονωμένα από το δέρμα νεαρών αρουραίων 2-4 ημέρες μετά τη γέννηση.

Η απομόνωση και η ανάπτυξη των επιδερμοκυττάρων του αρουραίου διεξήχθη στο εργαστήριο κυτταρικών τεχνολογιών του Ινστιτούτου Κυτταρολογίας RAS της ακόλουθης τεχνολογίας.

Το δέρμα πλύθηκε σε αλατούχο διάλυμα Hank που περιέχει 200 U / ml γενταμικίνη, κομμένο σε μικρά κομμάτια, μια περιοχή του 0,2-0,5 cm ². Οι κύβοι δέρματος επωάσθηκαν σε ένα διάλυμα 0.5% δισασσάσης σε ένα ισορροπημένο διάλυμα ρυθμισμένο με φωσφορικό αλατόνερο στους 37 ° C για μία ώρα. Τα τεμάχια στη συνέχεια μεταφέρθηκαν σε φυσιολογικό ορό ρυθμισμένο με φωσφορικό Dulbecco και η επιδερμίδα διαχωρίστηκε από το χόριο. Οι επιδερμίδα επωάστηκε σε διάλυμα τρυψίνης 0,125% για 10-15 λεπτά υπό ανάδευση σε μία ταχύτητα 50 rev / min, μετά την οποία το ένζυμο σταμάτησε με προσθήκη 5% εμβρυϊκού βόειου ορού. Το ένα τρίτο του προκύπτοντος κυτταρικού εναιωρήματος χρησιμοποιήθηκε σε καθαρή μορφή για μία από τις επιλογές να μεταμοσχεύσει ουλές, δεύτερη τρίτη καλλιεργούνται στην εγχώρια βιοσυμβατή επικάλυψη φιλμ «Polipor», το τρίτο - σε ένα τρυβλίο Petri χωρίς ένα υπόστρωμα. Dermabrasion Λειτουργία λαμβάνεται ουλές σε αρουραίους με επακόλουθη μεταφορά τους epidermotsitov αρουραίου υπό αναισθησία με αιθέρα διεξήχθη χρησιμοποιώντας καυτηριασμός.

Η πρώτη ομάδα αρουραίων μετά dermabrasion για γυαλισμένο, πλύθηκε με αλατούχο διάλυμα και ξηράνθηκε επιφάνεια αποστειρωμένο μεγάλης κοιλίας προεξέχοντας κομμάτια του χλοοτάπητα, η οποία κατατέθηκε ως κωδικοποιημένο πολτός αλλογενή αρουραίου epidermotsitov σε συγκέντρωση 1,5 εκατομμύρια κύτταρα ανά 1 ml (σύμφωνα με το Ινστιτούτο της Κυτταρολογίας). Cambric κομμάτια στοιβάζονται σε γυαλισμένα ουλή έτσι ώστε τα κύτταρα που σχηματίζεται στην επιφάνεια της ουλής. Επίδεσμος πάνω από αρκετά στρώματα τουλουπάνι, το οποίο είναι ραμμένο στις άκρες της ουλής.

Μέρος του κυτταρικού εναιωρήματος που προέκυψε τοποθετήθηκε σε τρυβλία Petri σε αποστειρωμένες μεμβράνες Polypore που κόπηκαν με τη μορφή κυπέλλων, ενώ το άλλο μέρος σε δίσκους Petri χωρίς φιλμ. Η καλλιέργεια διεξήχθη σε ένα μέσο FAD αποτελούμενο από ένα μείγμα DMEM και F12 σε αναλογία 3: 1. με την προσθήκη 10% εμβρυϊκού βόειου ορού, 5 μg / ml ινσουλίνης (Sigma), 0,5 μg / ml ημιηλεκτρικού υδροκορτιζόνης (Sigma). 10 μg / ml επιδερμικού αυξητικού παράγοντα EGF (Ινστιτούτο Κυτταρολογίας RAS, Αγία Πετρούπολη). Η δεύτερη και η τρίτη ομάδα αρουραίων με 7 άτομα λειτουργούν 6 ημέρες μετά την πρώτη. Μέσω αυτού του χρόνου, σχηματίσθηκαν πολυστρωματικά στρώματα από την εναιώρηση των σπαρμένων κερατινοκυττάρων σε τρυβλία Petri, τα οποία μεταμοσχεύθηκαν σε αρουραίους. Η δεύτερη ομάδα μεταμοσχεύθηκε με επιδερμοκύτταρα στο φιλμ, η τρίτη ομάδα - με πολυστρωματικό στρώμα χωρίς υπόστρωμα. Μετά από 7 ημέρες, τα πολυστρωματικά στρώματα αλλογονικών κερατινοκυττάρων (ΜΡΑΙ_Κ), που σπάρθηκαν σε φιλμ Polypore, μεταμοσχεύθηκαν με καλλιέργεια απ 'ευθείας στην επιφάνεια του τραύματος. Πάνω, η ταινία, προκειμένου να αποφευχθεί η αντιγραφή της, σταθεροποιήθηκε με ένα πολύστρωτο επίδεσμο γάζας και ραμμένο στο δέρμα των αρουραίων.

Πριν από τη μεταμόσχευση κερατινοκύτταρα τρίτη ομάδα αρουραίων, καλλιεργούνται χωρίς το υπόστρωμα, παράγοντας ένα διαχωρισμό του PAC από τον πυθμένα της θεραπείας τρυβλίο Petri δισπάση, έχοντας τη δυνατότητα να σπάσει επιλεκτικά το δερμο-επιδερμική επικοινωνία. Υπό την δράση ενός πολυστρωματικού dispase δεξαμενή καταστρέφει τη σύνδεση της βασικής στιβάδας κυττάρων στον πυθμένα του τρυβλίου Petri και σε πολύ μικρότερο βαθμό, επηρεάζει την ενδοκυτταρική επικοινωνία, η οποία καθιστά δυνατή την «αφαίρεση» ολόκληρο το επίπεδο. Η απόσπαση του πολυστρωματικού κυτταρικού στρώματος από την διάθεση διεξήχθη ως εξής. Από Petri πιάτα αναμειγνύονται μέσο μεταφοράς, οι κυτταρικές φύλλα πλύθηκαν τρεις φορές με μέσο που περιέχει αντιβιοτικά, ιδίως - γενταμικίνη (0,2 mg / ml). Πολυστρωματικό στιβάδες χύνονται 0,125 διάλυμα% δισπάση ( «Sigma») και τοποθετήθηκε σε έναν επωαστήρα όπου αυτά επωάστηκαν σε t = 37 ° C για 20-30 λεπτά. Η εμφάνιση της λευκή στεφάνη, ξεφλούδισμα γύρω από την περιφέρεια της δεξαμενής - ένας δείκτης της αρχή της διαδικασίας διαχωρισμού του από τα άκρα και τον πυθμένα του τρυβλίου Petri. Λίγα λεπτά μετά την έναρξη της διαδικασίας διαχωρισμού, δισπάση διάλυμα αδειάστηκε 2-3 φορές επιθηλιακών στιβάδες πλύθηκαν με μέσο. Στις εφαρμόστηκε η επιφάνεια της επιδερμικής στρώσης, κομμένα σε μέγεθος κομμάτι κύπελλο στείρο επίδεσμο τραύματος «Leith-χρώμα, το οποίο διασπάται διαχωρίζεται δισπάση σχηματισμό, περαιτέρω απελασματοποίηση του πυθμένα του κυπέλλου με μία σπάτουλα. Χρησιμοποιώντας οφθαλμικών τσιμπιδάκι στρώμα μαζί με την επικάλυψη της σερβιέτας» Leith-χρώματος «(ρωσικά ) έσπασε μακριά από το κάτω μέρος του ένα τρυβλίο Petri και μεταφέρεται προσεκτικά στην προετοιμασμένη επιφάνεια της ουλής. Χαρτοπετσέτες «Lita-χρώμα» περιέχει στη σύνθεσή του και γενταμυκίνη eksolin (απόσπασμα κολλαγόνου), το οποίο όταν είναι βρεγμένο περιβάλλον παραμένει βλαστάρι στο μέλλον Σημ αλατούχο διάλυμα διογκωμένων και έγινε σύγχρονη επίστρωση πληγή που παρέχει καλή προστασία από εξωτερική μόλυνση και την ταχεία επούλωση λόγω αρχόμενη ύγρανση με τη δομή.

Οι μεμβράνες πολυπροπυλίου και οι χαρτοπετσέτες τύπου Lita στρωματοποιήθηκαν με επίδεσμους από γάζα που ραμμένες πάνω στο δέρμα των αρουραίων για πιο σταθερή στερέωση. Κάθε αρουραίος φυτεύτηκε σε ξεχωριστό κλωβό, για να δημιουργηθούν οι βέλτιστες συνθήκες για τη διατήρηση και την ενσωμάτωση των μεταμοσχευμένων κερατινοκυττάρων. Επίδεσμοι αρουραίους που μεταμοσχεύονται αναστολή και πολυστρωματική δεξαμενή epidermotsitov πυροβολισμό δισπάση, κάθε μέρα αρκετές φορές την ημέρα, που έχει υγρανθεί με στείρο φυσιολογικό ορό για να δημιουργήσουν τις πιο ευνοϊκές συνθήκες των κυττάρων για εμφύτευση. Θεωρώντας ότι η ταινία "Polypor" ήταν αδιαπέραστη από το νερό, οι αρουραίοι της δεύτερης ομάδας δεν υγράνουν τα επιδέσμους, κάτι που ήταν ένα από τα πλεονεκτήματα έναντι των μεταμοσχεύσεων χωρίς φιλμ. Μετά από 10 ημέρες, οι επίδεσμοι αφαιρέθηκαν. Η κλινική εικόνα των ουλών μετά τη μεταμόσχευση κυττάρων διέφερε ελάχιστα από τις ουλές χωρίς μεταμόσχευση, εκτός από έναν πιο ροζ χρωματισμό (λόγω dermabrasion) και μεγαλύτερο ξεφλούδισμα. Αυτό το γεγονός δείχνει ότι. ότι αμέσως μετά την εξαφάνιση των επικαλύψεων του τραύματος με IPC, δεν σημειώθηκαν μεταβολές στο θράσος.

Λαμβάνοντας υλικό βιοψίας σε αρουραίους.

Μετά από 1, 2, 5 και 9 μήνες μετά τη μεταφορά αλόγων κερατινοκυττάρων αρουραίου στις ουλές εδάφους λευκών αρουραίων, το υλικό ελήφθη για ιστολογική, κυτομορφολογική και ηλεκτρονική μικροσκοπική εξέταση. Ως δείγματα ελέγχου φυσιολογικού δέρματος αρουραίου και ουλής λήφθηκαν χωρίς μεταμόσχευση κυττάρων. Η αναισθησία σε αρουραίους πραγματοποιήθηκε με αναισθησία με αιθέρα.

Μετά την αναισθησία, από τις σημειωμένες περιοχές, στις οποίες μεταμοσχεύθηκαν τα κερατινοκύτταρα, διατρυπικός μηχανισμός βιοψίας με διάμετρο 2 mm. Τα κομμάτια ιστού ουλής ελήφθησαν και τοποθετήθηκαν σε ένα διάλυμα γλουταραλδεΰδης 2,5% για την παρασκευή του υλικού για ηλεκτρονική μικροσκοπική εξέταση. Κομμάτια ιστού που λαμβάνεται για ιστολογική εξέταση τοποθετήθηκαν σε 10% διάλυμα ουδέτερης φορμαλίνης, ακολουθούμενο από μέσω καλωδίωσης αλκοόλες και γεμίζεται σε παραφίνη, που ακολουθείται από την κοπή των τμημάτων υπέρλεπτων και την προβολή τους στο φως-οπτικό μικροσκόπιο.

Έλεγχος I. Κανονικό δέρμα αρουραίου.

Προκειμένου να διαπιστωθεί η διαφορά μεταξύ της μικροσκοπικής εικόνας του φυσιολογικού δέρματος των ποντικών και των ουλών σε ορισμένες περιόδους μετά τη μεταμόσχευση IPC, αποτυπώνονται φωτογραφίες και περιγραφές σε όλα τα στάδια αυτής της μελέτης.

Η επιδερμίδα του φυσιολογικού δέρματος αποτελείται από 7-9 στρώματα κυττάρων. Horny στρώμα με μέτριο πάχος. Σε μέρη αποτελείται από 6-8 στρώματα καλαμιών. Το βασικό στρώμα αντιπροσωπεύεται από κύτταρα κυλινδρικού σχήματος με μεγάλο φως, κανονικούς πυρήνες και αρκετές νουκλεόλες. Οι δεσμοσωματικές συνδέσεις μεταξύ των κυττάρων και της βασικής μεμβράνης εκφράζονται σαφώς. Σύμφωνα με καλά καθορισμένη βασική μεμβράνη η οποία έχει λεπτή προεξοχές στο στρώμα υποεπιδερμικών κείνται παράλληλα προς τις απαλή δέσμες ινών κολλαγόνου και ελαστίνης, συμπεριλαμβανομένων επιμήκη ινοβλάστες, τα μικρά σκάφη. Σε βαθύτερα στρώματα, οι δεσμίδες ινών κολλαγόνου και ελαστίνης βρίσκονται σε διαφορετικές κατευθύνσεις. Μεταξύ αυτών υπάρχουν πολλά αγγεία με λεπτά τοιχώματα του ίδιου διαμετρήματος, κυτταρικά στοιχεία (ινοβλάστες, μαστοκύτταρα, λευκοκύτταρα). Σε μεγάλο αριθμό τριχοθυλακίων, σμηγματογόνων αδένων.

Έλεγχος 2. Σημάδι αρουραίου ηλικίας 2 μηνών.

Κλινική εικόνα. Οι ουλές είναι ανοιχτό ροζ, με ξεφλούδισμα, σε μέρη που οι κρούστες παραμένουν. περιοχή τους μειώνεται λόγω της συρρίκνωσης των ινών κολλαγόνου και να γίνει περίπου 3,0-3,5 cm ^:. Τα δερμάτινα εξαρτήματα απουσιάζουν.

Μικροσκοπική εικόνα. Η επιδερμίδα αποτελείται από 3-5 στρώματα κυττάρων, πτυχωτό, εκπροσωπούμενη από στρογγυλεμένες βασικά κύτταρα, μία σειρά οβελοειδής, 1-2 σειρές κερατοϋαλίνης κοκκίων με κόκκους στο άνω στρώμα, υπάρχουν τμήματα του ενδοκυτταρικού οιδήματος. Η στρώση του κερατοειδούς μεταβάλλεται ετερογενώς από πολύ λεπτή σε παχιά. Υπάρχει μια αναδίπλωση του αυχένα λόγω της (συστολής) ιστού ουλής. Οι πτυχώσεις διεισδύουν στο θηλώδες στρώμα και δίνουν την εντύπωση των θηλών. Το όριο μεταξύ της επιδερμίδας και της επιδερμίδας είναι μια ευθεία γραμμή. Η βασική μεμβράνη δεν μπορεί να εντοπιστεί παντού. Στο κάτω μέρος των υποεπιπεδικών και βαθύτερων στρωμάτων - αγγεία με ένα παχύ, χαλαρωμένο τοίχωμα, πολλά ερημικά, με φαινόμενα στάσης. Γύρω από τα αγγεία - ένα σύμπλεγμα μακροφάγων, ινοβλαστών. Τα μακροφάγα περιβάλλουν τα ερυθροκύτταρα που αναδύονται από τα τριχοειδή αγγεία και τα φαγοκυτταροποιούν. Στα πιο επιφανειακά στρώματα - μικρά τριχοειδή. Κάτω από την επιδερμίδα, οι ίνες κολλαγόνου είναι χαλαρές. Στο βαθύτερο στρώμα των κόκκινων - χονδροειδών δεσμών ινών κολλαγόνου μεταξύ των οποίων υπάρχουν πολλοί ινοβλάστες.

Ουσιαστικά ένα αρουραίο ένα μήνα μετά τη μεταμόσχευση κερατινοκυττάρων ποντικού αρουραίου MPAl.

Κλινική εικόνα. Οι ουλές ροζ, η περιοχή τους μειώθηκε, ειδικά σε διάμετρο και μέσες τιμές 2,5-3 cm ². Τα μαλλιά και οι σμηγματογόνοι αδένες απουσιάζουν.

Αυτά μικροσκοπική εξέταση του υλικού που ελήφθη από αρουραίους με MPAlK μεταφορά MPAlK επί της μεμβράνης και του υποστρώματος, χωρίς ουσιαστικά πανομοιότυπα. Ωστόσο, από τεχνική άποψη, το έργο με MPAlK δεν υποστηρίζεται πολύ πιο δύσκολη και επίπονη από ό, τι όταν μεγαλώσει MPAlK στο υπόστρωμα, έτσι ώστε η περαιτέρω μελέτη του θέματος στη μεταμόσχευση kertainotsitov σημάδια που χρησιμοποιούνται ως βάση για την καλλιέργεια ( «υπόστρωμα») σε στρώσεις γκαζόν.

Μικροσκοπική εικόνα. Υπάρχει πάχυνση της επιδερμίδας σε 15-20 στρώματα, σχεδόν στα μέσα της οποίας τα κερατινοκύτταρα έχουν ένα στενό, επιμηκυμένο, κατακόρυφο σχήμα και μια συμπαγή διάταξη. Τα βασικά κύτταρα είναι διατεταγμένα σε ανώμαλη γραμμή. Οι πυρήνες τους είναι ελαφριές, μεγάλες, στρογγυλές σε σχήμα με ένα ή δύο πυρήνες, γεγονός που δείχνει την υψηλή συνθετική και πολλαπλασιαστική δράση τους. Το όριο μεταξύ της επιδερμίδας και της επιδερμίδας είναι μια ευθεία γραμμή. Το ακανθώδες στρώμα είναι καλά ανεπτυγμένο, αποτελείται από 3-5 στρώματα κυττάρων κυκλικού σχήματος, υπάρχουν 2 κύτταρα πυρήνων.

Αμέσως κάτω από την βασική μεμβράνη - plotnoraspolozhennye λεπτές δέσμες των κολλαγόνων ινών παράλληλα προς το μεγάλο αριθμό σκαφών zapustevshih βαθύτερες ίνες κολλαγόνου χονδρότερα συλλέγεται σε σφιχτό δέσμες. Πολλές μεγάλες ινοβλάστες, σιτευτικά κύτταρα (2-3 στον οπτικό πεδίο), μακροφάγα, λευκοκύτταρα και zapustevshih σκάφη των οποίων τα τοιχώματα έχουν χαλαρώσει γύρω τους - χαλαρά διατεταγμένες ίνες κολλαγόνου. Σε μερικά σκάφη - στάση, διαβίβαση ομοιόμορφων στοιχείων. Γύρω από τα αγγεία - ινοβλάστες, μεμονωμένα λεμφοκύτταρα. Τα δερμάτινα εξαρτήματα απουσιάζουν.

Όταν ένα αιώρημα κερατινοκυττάρων μεταμοσχεύεται σε γυαλισμένη ουλή, η μικροσκοπική εικόνα διαφέρει από την προηγούμενη. Στα περισσότερα ζώα - η επιδερμίδα είναι λεπτή, αποτελείται από 5-6 στρώματα κυττάρων. Το κάτω στρώμα αποτελείται από κύτταρα ακανόνιστου πολυγωνικού σχήματος με στρογγυλεμένους ακανόνιστους πυρήνες. Η κατάσταση του υποεπιδερμικού στρώματος είναι παρόμοια με αυτή της ομάδας ζώων χωρίς μεταμόσχευση.

Σε αυτή την περίπτωση, μπορεί κανείς να μιλήσει είτε για καθυστέρηση των διαδικασιών που συνοδεύουν τη μεταμόσχευση κυττάρων, είτε για μεγάλη απώλεια κυττάρων που έχουν μεταμοσχευθεί με τη μορφή εναιωρήματος. Ως εκ τούτου, καταλήξαμε στο συμπέρασμα ότι η διόρθωση των ουλών με μεταμόσχευση κερατινοκυττάρων με τη μορφή εναιωρήματος είναι ακατάλληλη.

Ουλές του αρουραίου 2 μήνες μετά τη μεταμόσχευση των κερατινοκυττάρων ποντικού αρουραίου ΜΡΑΙ.

Κλινική εικόνα. Η ουλή φαίνεται λεπτή, τρυφερή. Σε μέρη υπάρχει μια έκσταση, κλίμακες.

Μικροσκοπικές εικόνες. Η κεράτινη στιβάδα είναι παχιά, σε μέρη - υπερκεράτωση. Η επιδερμίδα είναι παχιά, αποτελείται από 12-20 σειρές κυττάρων. Το όριο μεταξύ της επιδερμίδας και της επιδερμίδας είναι μια ευθεία γραμμή. Οι λεπτές ίνες κολλαγόνου κάτω από την επιδερμίδα βρίσκονται αρκετά σφιχτά. Στα βαθύτερα στρώματα του αχλαδιού συλλέγονται σε χονδροειδείς μεγάλες δέσμες. Στο υποεπιπεδωματικό στρώμα εμφανίζεται ένας νέος σχηματισμός αγγείων. Στα χαμηλότερα στρώματα ιστού ουλής - πολλά κενά αγγεία, που βρίσκονται παράλληλα στην επιφάνεια της επιδερμίδας. Μεγάλες ινοβλάστες κατανέμονται ομοιόμορφα στο πάχος του μαργαριταριού, υπάρχουν γιγάντια, πολύπλευρα, πολλά μακροφάγα.

Ουλές του αρουραίου 5 μήνες μετά τη μεταμόσχευση του βλεννογόνου των σπερματοκυττάρων αρουραίου.

Κλινική εικόνα. Ουλή φαίνεται λεία, ομαλή, χωρίς ξεφλούδισμα, υπάρχουν μόνο τρίχα της μεγαλύτερης πυκνότητας τους στην περιφέρεια της ουλής, το οποίο δείχνει την άκρη εισδύον τριχοθυλακίων στη μεγάλη κοιλία και νεόπλασμα των θυλάκων των τριχών. Η περιοχή των ουλών συνεχίζει να μειώνεται.

Μικροσκοπική εικόνα. Η επιδερμίδα είναι ακόμα παχιά (15-20 στρώματα, μερικές φορές μέχρι 30) στα ανώτερα στρώματα γεμίζεται με κόκκους κερατογιαλίνης. Η βασική μεμβράνη είναι σαφώς ορατή. Κάτω από τις ίνες κολλαγόνου είναι χαλαρές. Στα χαμηλότερα στρώματα - το κολλαγόνο είναι πιο ισχυρό και σφιχτά συσκευασμένο. Μεταξύ των δοκών του κολλαγόνου υπάρχουν πολλά τριχοειδή αγγεία. Στα ανώτερα στρώματα ο αριθμός των κενών αγγείων μειώθηκε. Η επιδερμίδα και το χόριο είναι ελαφρώς κυματιστές. Υπάρχουν βαθιές επιδερμικές εξελίξεις στον ιστό των ουλών. Μεταξύ των ινών κολλαγόνου είναι ορατά νεοσχηματισμένα δοχεία. Εμφανίζονται μόνο τριχοθυλακίων και σμηγματογόνων αδένων.

Ουλές του αρουραίου 9 μήνες μετά τη μεταμόσχευση επιδερμικών κυττάρων αρουραίου ΙΡΑ αρουραίου.

Κλινική εικόνα. Οι ουλές έγιναν πολύ μικρότερες σε σύγκριση με τους παλαιότερους όρους, η περιοχή τους είναι κατά μέσο όρο περίπου 1,5-2,0 εκ . ². Οι ουλές καλύπτονται άνισα με λεπτά μαλλιά, ειδικά γύρω από την περιφέρεια. Μικρή κλίμακα μικρής πλάκας διατηρείται.

Μικροσκοπική εικόνα.

Η επιδερμίδα έγινε λεπτότερη, αντιπροσωπεύεται από 6-8 σειρές κυττάρων, που θυμίζουν την επιδερμική δομή του κανονικού δέρματος των αρουραίων, μόνο η πυκνότητα των κυττάρων κατά 1 mm. υψηλότερες και είναι μικρότερες. Το βασικό στρώμα αποτελείται από μικρά κελιά κυλινδρικού σχήματος. Η βασική μεμβράνη είναι καλά καθορισμένη, τα αιμιδοσώματα είναι σαφώς ορατά. Παρουσιάζεται η παρουσία επιδερμικών εξελίξεων στο υποεπιπεδωματικό στρώμα. Το θηλώδες στρώμα εκφράζεται σε όλο το μήκος της ουλή. Αυτά τα γεγονότα υποδεικνύουν ότι για αυτή την χρονική περίοδο η πρόσφυση των μεταμοσχευμένων κερατινοκυττάρων έχει γίνει πολύ πιο ανθεκτική με τους υποκείμενους ιστούς του ερυθροκυττάρου. Κατά συνέπεια, η φροντίδα για ουλές ατόμων με μεταμόσχευση MALC 9 μήνες μετά τη μεταμόσχευση IPC μπορεί να είναι παραδοσιακή. Κάτω από την επιδερμίδα είναι πιο ευαίσθητες ίνες κολλαγόνου απ 'ό, τι στα βαθιά στρώματα. Υπήρχαν πολλά σκάφη, ειδικά επιφανειακά τοποθετημένα. Σε μεγαλύτερα αγγεία, οι τοίχοι είναι παχιά. Τα τριχοθυλάκια και οι σμηγματογόνοι αδένες σε μεγάλες ποσότητες. Το μικροσκοπικό μοτίβο μοιάζει με δερματικό ιστό.

Αποτελέσματα πειραματικής εργασίας και συζήτηση τους.

Κατά τη διάρκεια αυτής της εργασίας για τεχνητό δέρμα ουλές των αρουραίων μετά από τη λειτουργία δερμοαπόξεση, μεταμοσχευμένα κερατινοκύτταρα σε διάφορα formah- σε επιφάνειες του τραύματος, σαν ένα εναιώρημα σε cambric και σχηματισμό στρώσεις χωρίς ένα υπόστρωμα. Η εργασία έγινε για να ληφθούν μορφολογικά δεδομένα σχετικά με την επίδραση των μεταμοσχευμένων αλλογονικών κερατινοκυττάρων σε ουλές, καθώς και για τον προσδιορισμό των βέλτιστων παραλλαγών μεταμόσχευσης.

Διαπιστώθηκε ότι και οι τρεις μέθοδοι μεταμόσχευσης πραγματικό, αλλά χωρίς μεταμόσχευση Μπάκα υπόστρωμα - μια πολύ επίπονη διαδικασία, κατά την οποία μπορεί να τραυματιστεί Μπάκα, αντικατοπτρίζεται στα αποτελέσματα της μεταμόσχευσης. Επιπλέον, αυτή η μέθοδος μεταμόσχευσης αποκλείει την εργασία σε μεγάλες επιφάνειες.

Μεταμόσχευση εναιώρημα κερατινοκυττάρων - είναι σημαντικά πιο οικονομική μέθοδος δεν απαιτεί μια μακρά καλλιέργεια κυττάρων και απλή στην παρούσα υλοποίηση, επαφή χρησιμοποιώντας αποστειρωμένο προπλάσματα cambric, οι διαστάσεις των οποίων αντιστοιχούν με την αξία των ουλών. Η υστέρηση του θεραπευτικού αποτελέσματος κατά τη διάρκεια της μεταμόσχευσης του κυτταρικού εναιωρήματος για περίπου ένα μήνα σε σύγκριση με το MIC στην επικάλυψη του τραύματος δεν είναι σημαντική στιγμή με τη διάρκεια της θεραπείας, που υπολογίζεται σε πολλούς μήνες. Είναι γνωστό ότι κατά τη μεταμόσχευση IPC για την καύση των ασθενών, ο μετασχηματισμός της κατάστασης της δομής του δέρματος έγινε σταδιακά και για αρκετά χρόνια. Η μεταμόσχευση της καλλιέργειας κερατινοκυττάρων σε καλύμματα τραυμάτων είναι η πιο βολική και πολλά υποσχόμενη μέθοδος, ωστόσο, είναι επίσης πολύ πιο ακριβό. Επιπροσθέτως, απαιτώντας για σήμερα την αναζήτηση πιο εξελιγμένων επιστρώσεων που πρέπει να είναι πλαστικές, υγροσκοπικές, να έχουν βακτηριοστατικές ή βακτηριοκτόνες ιδιότητες και να είναι βιολογικά ουδέτερες για τα κύτταρα. Η ταινία «Polipor» - ένα ενδιάμεσο έκδοση της κάλυψης εγχώριας ταινία πληγή, παρά τις κάποιες αδυναμίες, μας επέτρεψε να μελετήσουμε πειραματικά κερατινοκυττάρων αρουραίους μεταμόσχευση σε ουλές και να εξαχθούν συμπεράσματα σχετικά με την αποτελεσματικότητα αυτής της κατεύθυνσης έλξης ουλές.

Συγγραφείς που πραγματοποίησε την μεταμόσχευση με τις πληγές IPC καεί, σημείωσε ότι κατά τη διάρκεια της πρώτης εβδομάδας μετά τη μεταμόσχευση των πολυεπίπεδο κερατινοκυττάρων δεξαμενή στο τραύμα αποστειρωμένο, η επιδερμίδα πυκνώνει και στρωματοποιημένη. Όλα τα στρώματα της επιδερμίδας ήταν καλά καθορισμένα. Είναι ενδιαφέρον ότι ο αριθμός των κυτταρικών στρωμάτων στις μεταμοσχεύσεις είναι 10-30% μεγαλύτερος από ότι σε δείγματα βιοψίας δέρματος. Οι συγγραφείς παρατήρησαν την εμφάνιση κερατοϋαλίνη κόκκων για την 5η ημέρα μετά τη μεταμόσχευση MEC, βασικής μεμβράνης και poludesmosom - ήδη από την 3η ημέρα.

J.Rives et αϊ .. (l994), Paramonov BA (1996)? NM Kuznetsov et al. (1998) βρήκαν ότι κατά τις πρώτες περιόδους μετά τη μεταμόσχευση ασθενών BMD με polnosloynymi ελαττώματα του φλοιού μετά από εγκαύματα, η επικοινωνία μεταξύ του χορίου και της επιδερμίδας είναι πολύ αδύναμη και είναι μια ευθεία γραμμή, θηλώδη στιβάδα είναι απούσα. Μέχρι το τέλος του 2ου μήνα αρχίζει ο σχηματισμός των ρηχών θηλών και των εξαρτημάτων του δέρματος, το χόριο την επικοινωνία και την επιδερμίδα γίνεται πιο δυνατός. Βιβλιογραφικά δεδομένα μεταμόσχευση govoryato αλλογενή κερατινοκύτταρα για την πληγή καίγονται ασθενείς ως μια πολλά υποσχόμενη μέθοδο. Παρά το γεγονός ότι η απόρριψη των αλλογενών κερατινοκυττάρων συμβαίνει υποβάλλονται από διάφορους συγγραφείς κατά το χρονικό διάστημα από 10 ημέρες έως 3 μήνες, ωστόσο, έχουν ένα ρόλο στην επούλωση της επιφάνειας του τραύματος, απελευθερώνοντας αυξητικούς παράγοντες και μηχανικώς το κλείσιμο του ελαττώματος. Πιστεύεται ότι MPAlK έχουν μειωμένη αντιγονική δραστικότητα, όπως όταν καλλιεργούνται in vitro χάσουν κύτταρα Langerhans που τους επιτρέπει να υφίστανται για μεγάλο χρονικό διάστημα στο σώμα του λήπτη. Επιπλέον, αλλογενή καλλιέργειας που προέρχεται από το δέρμα υγιών νέοι έχουν πολύ μεγαλύτερη βιολογική δυναμικό από την αυτόλογη καλλιέργειας των ασθενών μετά από τραύμα.

Ο κύριος στόχος της μελέτης μας ήταν να διαπιστώσουμε αν τα αλλογενή κερατινοκύτταρα θα επιβιώσουν στις ουλές και ποιες θα είναι οι αλλαγές στον ιστό των ουλών υπό την επίδραση μιας τέτοιας βιολογικώς δραστικής "επίστρωσης πληγής". Σε περίπτωση θετικού αποτελέσματος, επεξεργαστείτε την πιο αποτελεσματική τεχνολογία με τη μεγαλύτερη δυνατή ένταση εργασίας σε αυτόν τον τομέα της ιατρικής αποκατάστασης.

Τα δεδομένα που ελήφθησαν από εμάς από πολλές απόψεις αποδείχθηκαν παρόμοια με τα στοιχεία της βιβλιογραφίας σχετικά με τις μορφολογικές αλλαγές που εμφανίστηκαν στην ανθρώπινη επιδερμίδα μετά τη μεταφορά αλλογονικών κερατινοκυττάρων για να κάψουν πληγές. Υπάρχουν όμως σημαντικές διαφορές, τόσο ως προς το μορφολογικό υπόστρωμα, το οποίο μεταμοσχεύεται όσο και ως προς την τεχνολογία. Έτσι. η διαδικασία σχηματισμού της βασικής μεμβράνης και των δερμα-επιδερμικών συνδέσεων (αιμιδοσώματα, παπίλες) συμβαίνει αργότερα από ό, τι στη μεταμόσχευση κερατινοκυττάρων στις επιφάνειες του τραύματος χωρίς μεταβολές της ουλή. Αυτό φαίνεται να οφείλεται στην κακή διατροφή των ιστών της κοιλίας σε σύγκριση με το δέρμα ή τη μυϊκή περιτονία. Το σημάδι, ειδικά το παλιό, είναι ένας πυκνός συνδετικός ιστός με πολύ μικρό αριθμό αγγείων, ο πυθμένας του εγκαύματος είναι ένας ιστός κοκκοποίησης πλούσιος σε αιμοφόρα αγγεία. Έτσι, είναι προφανές ότι οι συνθήκες υπό τις οποίες συμβαίνουν μεταμόσχευση και εμφύτευση κερατινοκυττάρων είναι τελείως διαφορετικές. Όσο πιο αγγειοποιημένη είναι η περιοχή της μεταμόσχευσης των κυττάρων, τόσο πιο εύκολη είναι η επεξεργασία τους. Από αυτό το αξίωμα υπάρχει ένα συμπέρασμα σχετικά με την προτίμηση για εργασία με μικρές ουλές, στις οποίες ο συνδετικός ιστός είναι ακόμα αρκετά χαλαρός και πλούσιος σε αιμοφόρα αγγεία.

Ως αποτέλεσμα αυτού του πειραματικού έργου αποδεικνύεται ότι:

1. Είναι δυνατή η μεταμόσχευση του MALK σε ουλές. 
2. Η βέλτιστη μέθοδος μεταμόσχευσης είναι η μεταμόσχευση κερατινοκυττάρων στο κάλυμμα του τραύματος.
3. Η επιφάνεια της ουλής θα πρέπει να αλέθεται χρησιμοποιώντας μια λειτουργική δερμοαπόξεση χρησιμοποιώντας το λέιζερ του Schumann ή ένα κόπτη.
4. Υπό την επίδραση της MPALK, λαμβάνει χώρα ταχεία επιθηλιοποίηση της επιφάνειας του εδάφους του αχλαδιού.
5. Ο καλύτερος αγγειοποιημένος ιστός ουλής, δηλαδή, όσο μικρότερη είναι η ουλή, τόσο καλύτερα είναι τα αποτελέσματα της μεταμόσχευσης κερατινοκυττάρων.
6. Ο ουλώδης ιστός υπό την επίδραση των μεταμοσχευμένων κερατινοκυττάρων βαθμιαία μετασχηματίζεται και μετατρέπεται σε ένα δερματικό (πιο εύθρυπτο ιστό ουλής με προσθήκες του δέρματος).
7. Η σταδιακή χαλάρωση του ουλώδους ιστού ξεκινάει με το υποεπιδερμικό στρώμα. Βελτιώνει την αγγείωση του, οι δέσμες ινών κολλαγόνου στο ανώτερο και στο κάτω μέρος της κοιλίας παίρνουν μια πιο εύθραυστη θέση από ότι στον ιστό ουλής χωρίς μεταμόσχευση κυττάρων. Υπάρχουν θύλακες των τριχών και σμηγματογόνες αδένες. Η επιδερμίδα στη δομή της, αφού περάσει τη φάση της υπερτροφίας, πλησιάζει στην επιδερμίδα του φυσιολογικού δέρματος.
8. Οι παρατηρηθείσες μεταβολές που σχετίζονται με κερατινοκύτταρα που εκκρίνεται αυξητικούς παράγοντες, κυτοκίνες ότι η βελτίωση θρέψη του ιστού ουλής συμβάλλουν στην μετατροπή της από ένα δύσκαμπτο ινώδη ιστό σε μια χαλαρότερη, η οποία οδηγεί σε βελτίωση της ουλής.

Έτσι, βάσει αυτής της μελέτης, μπορεί να εξαχθεί το συμπέρασμα ότι το ευεργετικό αποτέλεσμα των μεταμοσχευμένων κερατινοκυττάρων σε ιστό ουλής, που μπορεί να έχει πρακτική σημασία για την αποκατάσταση ασθενών με διάφορους τύπους ουλών.

Αυτή η εργασία σε αρουραίους επέτρεψε επίσης να διατυπώσει απαιτήσεις. Στα καλύμματα τραύματος, στα οποία καλλιεργούνται τα κερατινοκύτταρα.

Τα καλύμματα τραυμάτων πρέπει να είναι:

• βιοσυμβατό με κύτταρα,
• αναπνεύσιμο,
• έχουν μια ελαστική βάση,
• να είναι υδρόφιλο,
• καθώς τα φαρμακευτικά πρόσθετα περιέχουν αντιβακτηριακά φάρμακα και τα αντιοξειδωτικά δεν είναι τοξικά για τα καλλιεργημένα κύτταρα.

Κλινικά αποτελέσματα της βιοτεχνολογικής θεραπείας των ουλών.

Νωρίτερα, οι N. Carver et αϊ. (1993) βρήκαν ότι οι αποφρακτικοί επίδεσμοι είναι καλύτεροι για την προσκόλληση στο τραύμα και την επιβίωση των κερατινοκυττάρων, αλλά δεν επιτρέπουν τον σχηματισμό μιας στρωματοποιημένης (ώριμης) επιδερμίδας. Για να σχηματιστεί στρωματοποιημένη επιδερμίδα, απαιτείται ένα περιβάλλον αέρα. Συνεπώς, μετά την προσκόλληση του πολυστρωματικού στρώματος, προτάθηκε μια επικάλυψη πληγής μετά από 7-10 για να απομακρυνθούν και να διεξαχθούν πληγές κάτω από ξηρούς επίδεσμους ή υδατοδιαλυτές αλοιφές. Μπορούμε να πούμε ότι η ποιότητα και οι ιδιότητες του «υπόστρωμα» στο οποίο τα κύτταρα αναπτύσσονται είναι μια πολύ σημαντική στιγμή για την αποτελεσματικότητα της μεταμόσχευσης του κυτταρικού υλικού, και ως εκ τούτου, για τα αποτελέσματα της εργασίας των γιατρών. Αλλά δεν υπάρχει ιδανικό τραύμα που να καλύπτει σήμερα, παρά την πληθώρα των προτεινόμενων επιλογών (τεχνητό δέρμα, μη υφασμένο ύφασμα καρβοξυμεθυλοκυτταρίνης, επικαλύψεις φιμπρίνης, ημιδιαπερατές ταινίες πολυουρεθάνης). Δεν είναι ασήμαντη στιγμή σε αυτό το θέμα το κόστος των "υποστρωμάτων" (ειδικών επιχρισμάτων τραύματος), καθώς το υψηλό τους κόστος αυξάνει το συνολικό κόστος της βιοτεχνολογικής θεραπείας.

Η αποτελεσματικότητα των κυψελοειδών τεχνολογιών έχει αποδειχθεί μέχρι σήμερα, αλλά, δυστυχώς, αυτές οι τεχνολογίες είναι πολύ ακριβές, ειδικά σε χώρες όπου δεν έχει δημιουργηθεί βιομηχανική παραγωγή κυτταρικών συνθέσεων. Παρόλα αυτά, χώρες όπως οι Ηνωμένες Πολιτείες έχουν από καιρό καθιερώσει μια βιομηχανία για την παραγωγή κυτταρικού υλικού για τη μεταμόσχευση καμένων. Ειδικότερα, η εταιρεία Biosurface Technology Inc, από το 1989, έθεσε 37.000 διαδοχικά στρώματα της κερατινοκύτταρα, τα οποία έχουν χρησιμοποιηθεί για τη θεραπεία των 240 ασθενείς σε 79 χώρες σε όλο τον κόσμο (R.Odessey, 1992) 1 cm ² κυτταρική καλλιέργεια κοστίζει περίπου 7-8 $ ΗΠΑ.

Η τεχνολογία αντιμετώπισης διαφόρων ασθενειών και δερματικών προβλημάτων έχει πολλές διαφορές, αλλά στην καρδιά οποιασδήποτε επεξεργασίας με κύτταρα είναι η παραγωγή ποιοτικού κυτταρικού υλικού και η μεταμόσχευση του.

Αυτή η διαδικασία αποτελείται από τα ακόλουθα βήματα:

• επιλογή του δέρματος από τους προσβεβλημένους (ή από τους δότες),
• τη μεταφορά των πτερυγίων του δέρματος στο βιοτεχνολογικό κέντρο,
• η απομόνωση των κυττάρων της βασικής στρώσης και ο πολλαπλασιασμός τους,
• συσσώρευση πολυστρωματικών στρωμάτων κερατινοκυττάρων (IPC).
• μεταμόσχευση κυτταροκαλλιεργειών.

Το κύριο πρόβλημα στη θεραπεία με τη μεταμόσχευση πολυστρωματικών στρωμάτων κερατινοκυττάρων είναι η ανάγκη για βιώσιμα κύτταρα σε όλα τα στάδια της μεταμόσχευσης κυττάρων. Τα τεμάχια του δέρματος για την απομόνωση των αυτόλογων ή αλλογενών κυττάρων θα πρέπει να είναι όσο το δυνατόν λεπτότερα, αφού σε αυτή την περίπτωση είναι ευκολότερο να διαχωριστούν χρησιμοποιώντας μηχανικές και ενζυματικές μεθόδους και να ληφθεί ένα εναιώρημα ζωντανών κυττάρων για ανάπτυξη. Μπορούν να ληφθούν με αποκοπή του δερματώματος ή με τη χρήση του δέρματος των βλεφάρων, της ακροποσθίας, της εσωτερικής επιφάνειας του ώμου. Δεδομένου ότι τα κύτταρα είναι ευαίσθητα σε αλογόνα (χλώριο, ιώδιο), υπεροξείδιο του υδρογόνου, δεν μπορούν να χρησιμοποιηθούν στη θεραπεία του δέρματος κατά τη στιγμή της λήψης του υλικού.

Η ποσοτική και ποιοτική απόδοση των κυττάρων από δερματικά μοσχεύματα και η αποτελεσματικότητα της καλλιέργειάς τους εξαρτώνται επίσης από την κατάσταση της υγείας και την ηλικία του δότη. Επιπλέον, τα δείγματα βιοψίας δέρματος πρέπει να παραδίδονται στο εργαστήριο το συντομότερο δυνατόν και σε κατάλληλες συνθήκες (περιβάλλον, θερμοκρασία) να παραδίδονται σε πιστοποιημένο και διαπιστευμένο εργαστήριο.

Για την αποθήκευση και μεταφορά των μοσχευμάτων δέρματος μπορούν να χρησιμοποιηθούν ή Dulbecco Μέσο 199 συμπληρωμένο με 10% βόειο ορό, μέσο DMEM συμπληρωμένο με 5% εμβρυϊκό ορό και αντιβιοτικά βοοειδών.

Στο κυτταρολογικό εργαστήριο, η βιοψία του δέρματος αρχικά διαχωρίζεται μηχανικά σε μικρά κομμάτια, τότε η επεξεργασία των θραυσμάτων του δέρματος πραγματοποιείται με τη βοήθεια ενζύμων: τρυψίνη, κολλαγενάση, δυσπάση κλπ.

Κάτω από τη δράση των ενζύμων, γίνεται καταστροφή από δεσμοσώματα και τα κερατινοκύτταρα απελευθερώνονται στο μέσο ως ξεχωριστά κύτταρα ή συσσωματώματα που αποτελούνται από διαφορετικούς αριθμούς κυττάρων. Για καλλιέργεια, χρησιμοποιούνται μόνο βασικά κερατινοκύτταρα τα οποία αναπτύσσονται σε ειδικά μέσα σε επωαστήρες που περιέχουν 5% CO, σε δίσκους Petri ή σε φιαλίδια σε t = 37 ° C. Μέσα σε 48 ώρες, παρατηρείται ο σχηματισμός αποικιών κερατινοκυττάρων, που σταδιακά συγκλίνουν σε μια μονοστιβάδα. Μετά την απόκτηση ενός επαρκούς αριθμού κυττάρων, το προκύπτον εναιώρημα εξαπλώνεται στα καλύμματα του τραύματος που παρασκευάζονται για το σκοπό αυτό και τοποθετούνται σε τριβλία Petri. Από το εναιώρημα, σχηματίζεται πρώτα μία μονοστιβάδα και στη συνέχεια ένα πολύστρωτο στρώμα κερατινοκυττάρων. Σχηματικά, τα στάδια της διαδικασίας καλλιέργειας κερατινοκυττάρων φαίνονται στο Σχ. 12 (33.43.54.65).

Ο σχηματισμός ενός σχηματισμού πολλαπλών στρώσεων κερατινοκυττάρων κατάλληλου για μεταμόσχευση συνήθως διαρκεί 7-10 ημέρες. Μερικές φορές η περίοδος αυτή είναι μεγαλύτερη, η οποία εξαρτάται από την ποιότητα του αρχικού υλικού (ηλικία, υγεία του δότη, ορθότητα του υλικού, ποιότητα των χρησιμοποιούμενων μέσων κ.λπ.). Εάν η πολυστρωματική στρώση υπεραγωθεί, τότε στην επιφάνεια της μπορεί να υπάρχουν κύτταρα με φαινόμενα απόπτωσης ακατάλληλα για μεταμόσχευση. Τα τρυβλία Petri, τα οποία αναπτύσσονται σε αυτά σε καλύμματα τραυμάτων από πολυστρωματικά στρώματα κερατινοκυττάρων (IPC), παραδίδονται στην κλινική σε ειδικά δοχεία σε θερμοκρασία όχι μικρότερη από + 15 ° C.

Η τροποποιημένη μέθοδος του Green για την καλλιέργεια του IPC

Στην εργασία μας ως επίστρωση τραυμάτων, χρησιμοποιήσαμε ένα πολυστρωματικό κάμπρικ, εγκαταλείποντας τις πολυπορικές ταινίες με τις οποίες ξεκινήσαμε να δουλεύουμε σε ένα πείραμα με αρουραίους. Έτσι, τα στρώματα πολλαπλών στρώσεων κερατινοκυττάρων αναπτύχθηκαν από εμάς σε πρόωρα και αποστειρωμένα βατήρα, αν και δεν είναι και η βέλτιστη κάλυψη του τραύματος.

Οι κλινικές μελέτες διεξήχθησαν σε εθελοντές με την τήρηση των απαραίτητων δεοντολογικών κανόνων: υπογραφή συνθήκης και συναινετική συναίνεση.

1. Χρησιμοποιήθηκε η καλλιέργεια της ίδιας (αυτόλογης) και λήφθηκε από τα κυτταρικά κύτταρα (αλλογενή) κερατινοκύτταρα.
2. Τα ίδια κερατινοκύτταρα ελήφθησαν από ένα κομμάτι δέρματος που κόπηκε από το εσωτερικό του ώμου των ασθενών.
3. Η λειτουργία της dermabrasion των ουλών πραγματοποιήθηκε με τη βοήθεια των θερμοστοιχείων, περιστροφικών δίσκων και λέιζερ erbium.
4. Παρελήφθησαν ομάδες ασθενών με νορμοτροφικές, υποτροφικές και υπερτροφικές ουλές.

Η τεχνολογική διαδικασία για την εφαρμογή κυτταρικής τεχνολογίας για τη βελτίωση του τύπου δερματικών ουλών συνίστατο στα ακόλουθα στάδια:

1. Επιλογή ασθενών.
2. Εξηγώντας την ουσία της θεραπείας, το χρονοδιάγραμμα απόκτησης των αναμενόμενων αποτελεσμάτων, την υπογραφή μιας συνθήκης και την συνειδητή συναίνεση.
3. Ορισμός των ασθενών για 2-3 εβδομάδες πριν από τη χειρουργική επέμβαση selmevit κατά 1t. 3 φορές την ημέρα, zinkteral σε 1t. 3 φορές την ημέρα.
4. Λαμβάνοντας ένα κομμάτι δέρματος μήκους 2,0 cm και πλάτους 0,7-1,0 cm από την εσωτερική επιφάνεια του ώμου, υψηλό, σχεδόν στον πυθμένα της μασχαλιαίας περιοχής, για να ληφθούν αυτόλογα κερατινοκύτταρα.
5. Στην περίπτωση που οι ασθενείς αρνούνται να απομονώσουν τα δικά τους κερατινοκύτταρα εξαιτίας της πιθανότητας λήψης γραμμικής ουλής στην εσωτερική επιφάνεια του ώμου, το κυτταρικό υλικό λήφθηκε από μια κυτταρική τράπεζα (αλλογενή κερατινοκύτταρα).
6. Τα κερατινοκύτταρα απομονώθηκαν και αναπτύχθηκαν σε συνθήκες εργαστηρίου πιστοποιημένου για αυτόν τον τύπο εργασίας.
7. Αφού έλαβε ένα IPC επαρκές για μεταμόσχευση, μια ημέρα χειρουργικής επέμβασης χορηγήθηκε στα ουλές στην κλινική, όπου το υλικό τέθηκε σε ειδικές δεξαμενές σε πιάτα Petri.
8. Διεξήχθη η επέμβαση της αποφλοιώσεως του ορού, η αιμόσταση, η επιφάνεια του εδάφους πλύθηκε με αποστειρωμένο αλατούχο διάλυμα, ξηράνθηκε, μετά την οποία το IPC μεταμοσχεύθηκε σε αποστειρωμένα βατήρα "κύτταρα προς τα κάτω". Δηλαδή, τα κύτταρα που ήταν ανώτερα στο MIC ήταν χαμηλότερα, δίπλα στην γυαλισμένη επιφάνεια.
9. Μια αποστειρωμένη μεμβράνη υπερκαλύφθηκε στην κορυφή, η οποία ήταν στερεωμένη στο δέρμα με ελαστικό επίδεσμο ή ελαστική ενισχυτική ταινία Omnifix. Αντί της μεμβράνης, μπορούν επίσης να χρησιμοποιηθούν αδιάκριτα επιχρίσματα περιελίξεων που περιέχουν σιλικόνη, για παράδειγμα Mepitel, Mepiform, πλάκες γέλης σιλικόνης.

Μετά από 5-7 ημέρες, αφαιρείται η επίστρωση μεμβράνης ή σιλικόνης. Μέχρι αυτή την περίοδο, όλα τα κερατινοκύτταρα πρέπει να σέρνονται πάνω στη γυαλισμένη ουλή και να προσκολλώνται στην επιφάνεια της.

10. Το υγρό περιβάλλον που δημιουργείται κάτω από την επίστρωση μεμβράνης και σιλικόνης συμβάλλει ενεργά σε αυτό. Ο βαπτιστής που παραμένει στην ουλή από αυτό το σημείο μπορεί να εμποτιστεί με περιέργεια ή χιτοζάνη. Ως αποτέλεσμα, την 2η ημέρα, δημιουργείται μια πυκνή κρούστα, η οποία, για την ευκολία του ασθενούς, είναι καλύτερο να στερεωθεί με έναν ελαστικό, διαπερατό από αέρα γύψο, για παράδειγμα Omnifix. Ο αναπνεύσιμος φλοιός επιτρέπει στην νεοφιλετημένη επιδερμίδα να διαφοροποιείται και να μετατρέπεται σε ώριμη.

Ανάλογα με τον τύπο της ουλή και το βάθος της άλεσης, ο επίδεσμος απορρίπτεται μετά από 8-10 ημέρες. Η επιδερμίδα αυτή τη στιγμή έχει 30-40% περισσότερα κυτταρικά στρώματα από ότι στο φυσιολογικό δέρμα. Η βασική μεμβράνη δεν σχηματίζεται. Τα κερατινοκύτταρα της πυκνής επιδερμίδας απελευθερώνουν μάζα βιολογικά δραστικών μορίων στον ιστό ουλής.

Η επιτυχία της βιοτεχνολογικής θεραπείας των ουλών εξαρτάται σε μεγάλο βαθμό από τον τρόπο με τον οποίο λαμβάνουν φροντίδα στην μετεγχειρητική περίοδο. Οι κυτταροκαλλιέργειες είναι ένα "τρυφερό" είδος κάλυψης τραύματος και στις πρώτες περιόδους μετά τη μεταμόσχευση, η BMD μπορεί εύκολα να αποκολληθεί από τους υποκείμενους ιστούς. Ως εκ τούτου, οι ασθενείς συμβουλεύονται να φροντίζουν την ουλή μετά από χειρουργική επέμβαση. Για 8-9 μήνες, μην τρίβετε και εργάζεστε εύκολα με κρύο βρασμένο νερό για να αποφύγετε το σχίσιμο από μια λεπτή, νεοσύστατη επιδερμίδα που δεν έχει στενή λαβή με τους υποκείμενους ιστούς.

Σημείωση:

Πριν την επέμβαση και κατά τη χρήση dermabrasion των αλογονωμένων οξειδωτικών και συντηρητικά (yodopiron, sulyodopiron, iodinol, yodinat, χλωρεξιδίνη, το υπεροξείδιο του υδρογόνου) είναι επιτρεπτή πριν τη μεταφύτευση kletok- απολύτως αντενδείκνυται εξαιτίας κυτταροτοξικές επιδράσεις τους. Τοξικά στα κύτταρα είναι επίσης το κυανό του μεθυλενίου. λαμπρό πράσινο.

Για να αποφευχθεί η μόλυνση, ειδικά όταν εργάζονται με υπερτροφικές ουλές, είναι δυνατό να αντιμετωπιστεί το πεδίο λειτουργίας με θειική νεομυκίνη, πολυμυξίνη ή γενταμικίνη. Δεν ασκούν κυτταροτοξική επίδραση στα κερατινοκύτταρα.

Ως αποτέλεσμα αυτής της θεραπείας, επιτυγχάνεται τριπλό αποτέλεσμα.

1. Ευθυγράμμιση της επιφάνειας του μαργαριταριού.
2. Δημιουργήστε ένα στρώμα πάνω από αυτό μιας νέας επιδερμίδας, κανονικού πάχους.
3. Μετατροπή του ουλώδους ιστού στο dermopodobnuyu με την δράση των κυτταροκινών, αυξητικών παραγόντων και άλλων βιοδραστικών μορίων που εκκρίνονται από τα μεταμοσχευμένα κύτταρα και κερατινοκύτταρα διεγείρονται από αυτούς, ινοβλάστες και μακροφάγα.

Η ουλή γίνεται λιγότερο αισθητή, πιο ελαστική, εμφανίζονται πόροι σε αυτήν, τα μαλλιά ρουφηξιά, η αποχρωματισμός μπορεί να αποκατασταθεί λόγω της παρουσίας μελανοκυττάρων στο MPC.

Ωστόσο, όλες αυτές οι θετικές στιγμές στο cicatrix δεν έρχονται αμέσως. Από την άποψη αυτή, είναι απαραίτητο να προειδοποιήσουμε τους ασθενείς. ότι η διαδικασία μετασχηματισμού του ιστού ουλής στο χόριο είναι αργή και το βέλτιστο αποτέλεσμα μιας τέτοιας θεραπείας δεν μπορεί να αναμένεται νωρίτερα από 10-14 μήνες. Αμέσως μετά την απόρριψη του επίδεσμου, οι στιλβωμένες επιφάνειες έχουν έντονο πολυχρωματικό, τόσο φωτεινότερη είναι η διαδικασία λείανσης. Η ελάχιστη βλάβη στο δέρμα εμφανίζεται όταν λερώνετε τις κανονικοτροφικές ουλές με ένα λέιζερ ερυθρού. Το χρώμα των ουλών και του περιβάλλοντος δέρματος αποκαταστάθηκε στην περίοδο από 3 έως 8 εβδομάδες. Παρά αυτές τις προφυλάξεις, μερικές φορές υπάρχει μετεγχειρητική υπερχρωματισμός, η οποία μπορεί να συνεχιστεί ανεξάρτητα για αρκετούς μήνες.

[1], [2], [3], [4], [5], [6], [7], [8], [9], [10], [11]