Δερματική ισοδυναμία. Ιστορία προέλευσης και αποτελέσματα κλινικών δοκιμών

Στα τέλη της δεκαετίας του 1980, στο Πανεπιστήμιο Στάνφορντ αναπτύχθηκε μια υγρή μορφή κολλαγόνου βοοειδών, η οποία μετατράπηκε σε ένα μαλακό ελαστικό υπόστρωμα στη θερμοκρασία του σώματος. Το φάρμακο καταχωρήθηκε και εγκρίθηκε για χρήση σε ορισμένες ευρωπαϊκές χώρες ως εμφυτεύσιμος παράγοντας που ονομάζεται Zyderm Collagen Implantant. Αυτό το φάρμακο έγινε το πρώτο εμφύτευμα. Αργότερα, εμφανίστηκαν και άλλα μέσα για πλαστικά περιγράμματος, όπως τα Restylane, Perlane, Pharmacrylic gel, Artecol, Biopolymer gel και άλλα. Αυτά τα φάρμακα άρχισαν να χρησιμοποιούνται όχι μόνο για τη μοντελοποίηση περιγράμματος και τη διόρθωση των αλλαγών του δέρματος που σχετίζονται με την ηλικία, αλλά και για τη θεραπεία, ή πιο συγκεκριμένα, για την εξομάλυνση της ανακούφισης των ουλών. Όλα αυτά εγχύθηκαν κάτω από το κάτω μέρος της ουλής.

Η αναζήτηση πιο προηγμένων μεθόδων για τη θεραπεία υποτροφικών ουλών μας οδήγησε στην ιδέα της χρήσης ενός τεχνητά δημιουργημένου αναλόγου του δέρματος για αυτόν τον σκοπό - του "δερματικού ισοδύναμου" (DE), το οποίο χρησιμοποιούσε επίσης υγρό κολλαγόνο. Υπήρχαν πολλές επιλογές για τεχνητά υποκατάστατα δέρματος, αλλά η γενική ιδέα ήταν να δημιουργηθεί ένας δερματοειδής ιστός από τα δομικά συστατικά του χορίου, ο οποίος δεν θα απορριπτόταν σε περίπτωση μεταμοσχεύσεων και θα αποτελούσε ένα καλό υπόστρωμα για την ανάπτυξη του χορίου και των συστατικών της επιδερμίδας. Είναι γνωστό ότι τα κύρια δομικά συστατικά του χορίου είναι τα κυτταρικά, ινώδη στοιχεία και η ενδιάμεση ουσία. Τα ινώδη στοιχεία αντιπροσωπεύονται κυρίως από ίνες κολλαγόνου και ελαστίνης, η ενδιάμεση ουσία - γλυκοπρωτεΐνες, πρωτεογλυκάνες και γλυκοζαμινογλυκάνες. Το κύριο λειτουργικό κυτταρικό στοιχείο του χορίου είναι ο ινοβλάστης, ο κυτταρικός πληθυσμός των ινοβλαστών είναι η πηγή σχηματισμού σχεδόν όλων των δομικών συστατικών του χορίου. Επομένως, κατά τη δημιουργία ενός "υποκατάστατου δέρματος", οι περισσότεροι επιστήμονες χρησιμοποιούν ένα υπόστρωμα κολλαγόνου αναμεμειγμένο με ινοβλάστες και γλυκοζαμινογλυκάνες. Ένα στρώμα κερατινοκυττάρων εφαρμόζεται στην κορυφή με τον έναν ή τον άλλον τρόπο για να δημιουργηθεί ένα δέρμα πλήρους στρώσης και ταχύτερη αποκατάσταση της βιωσιμότητας του μεταμοσχευμένου ισοδύναμου δέρματος, κάτι που διευκολύνεται από πολυάριθμους αυξητικούς παράγοντες που εκκρίνονται από τα κερατινοκύτταρα. Μία από τις πρώτες εκδοχές ενός «ζωντανού ισοδύναμου δέρματος» προτάθηκε το 1983 από τους E. Bell et al. Οι ινοβλάστες του δέρματος αναμίχθηκαν με κολλαγόνο, πλάσμα και μέσο ανάπτυξης, γεγονός που οδήγησε στο σχηματισμό ενός πηκτώματος, στην επιφάνεια του οποίου αναπτύχθηκαν κερατινοκύτταρα. Όλα αυτά καλλιεργήθηκαν για 1-2 εβδομάδες σε vilro, μετά το οποίο το δερματικό ισοδύναμο θεωρήθηκε ώριμο και αντιπροσώπευε έναν βιώσιμο ιστό με τη μορφή μιας ημιδιαφανούς ελαστικής μάζας. Οι συγγραφείς πρότειναν να μεταφερθεί στις επιφάνειες των τραυμάτων ασθενών με εγκαύματα για να αναδημιουργηθεί μια δομή δέρματος πλήρους στρώσης. Μερικοί συγγραφείς χρησιμοποίησαν ένα σφουγγάρι κολλαγόνου ή μια μήτρα κολλαγόνου καλυμμένη με πρωτεογλυκάνες και συμπληρωμένη με ινοβλάστες ως βάση για το δερματικό ισοδύναμο, πάνω στο οποίο αναπτύχθηκαν αυτόλογα κερατινοκύτταρα. Ως αποτέλεσμα, δημιουργήθηκε ένα λεγόμενο τρισδιάστατο μοντέλο του δέρματος. Για την καλλιέργεια κερατινοκυττάρων με σκοπό την επακόλουθη μεταφορά τους σε επιφάνειες τραυμάτων, ορισμένοι συγγραφείς χρησιμοποίησαν επίσης μια τεχνητή μήτρα κολλαγόνου, γλυκοζαμινογλυκανών και χιτοζάνης, δέρμα πτωμάτων και δέρμα χοίρου ως υπόστρωμα. Μετά από 7-14 ημέρες από την έναρξη της καλλιέργειας, ένα μόσχευμα πλήρους στιβάδας που περιείχε το χόριο και την επιδερμίδα μεταμοσχεύτηκε στα τραύματα ασθενών ή ζώων.

Το τεχνητό υποκατάστατο δέρματος έχει χρησιμοποιηθεί όχι μόνο για την αποκατάσταση του δέρματος σε θύματα εγκαυμάτων, αλλά και για τον έλεγχο κυτταροτοξικότητας φαρμάκων και για τη μελέτη αυξητικών παραγόντων in vitro.

Η ανεπαρκής, από την άποψή μας, αποτελεσματικότητα της χειρουργικής δερμοαπόξεσης βαθιών υποτροφικών ουλών σε συνδυασμό με τη μεταμόσχευση MPC έδωσε λόγο να προσπαθήσουμε να εξισορροπήσουμε την ανακούφιση του δέρματος με τον εμβολιασμό ενός αναλόγου του δερματικού ισοδύναμου στην κοιλότητα της υποτροφικής ουλής. Το υγρό κολλαγόνο που ελήφθη στο εργαστήριο, στο οποίο εισήχθη ένα εναιώρημα ινοβλαστών, έγινε το υπόστρωμα για τη δημιουργία του δερματικού ισοδύναμου. Το δερματικό ισοδύναμο, καθώς και το MPC, δημιουργήθηκαν σε εξειδικευμένο εργαστήριο πιστοποιημένο για αυτό το είδος δραστηριότητας και την ημέρα και ώρα της επέμβασης παραδόθηκαν σε γυάλινη φιάλη σε δοχείο με πάγο στην κλινική.

Η χειρουργική στίλβωση ουλών πραγματοποιήθηκε χρησιμοποιώντας την τυπική τεχνική μετά από αντισηπτική επεξεργασία του δέρματος και τοπική αναισθησία με 2% λιδοκαΐνη ή νοβοκαΐνη ή υπερκαΐνη. Η στίλβωση λείανε την επιφάνεια της ουλής και ταυτόχρονα δημιούργησε συνθήκες για την ενσωμάτωση καλλιεργημένων κυττάρων ή κυτταρικών συνθέσεων. Στη συνέχεια, το ψυχρό υγρό τζελ κολλαγόνου με ινοβλάστες που είχε εμβολιαστεί σε αυτό εφαρμόστηκε με αποστειρωμένη σπάτουλα στην γυαλισμένη επιφάνεια των υποτροφικών ουλών (στην εμβάθυνση της ουλής), όπου πολυμερίστηκε υπό την επίδραση της θερμοκρασίας του σώματος.

Ως αποτέλεσμα, μετά από 5-10 λεπτά, το κολλαγόνο με ινοβλάστες πολυμερίστηκε από υγρή κατάσταση σε παχύρρευστη κατάσταση γέλης. Αφού πήχθηκε το DE, εφαρμόστηκε από πάνω ένας επίδεσμος με εναιώρημα ή MPC σε υπόστρωμα.

Ένας πολυστρωματικός αποστειρωμένος επίδεσμος στερεώθηκε όπως στην περίπτωση της μεταμόσχευσης MPC. Ανάλογα με την επιφάνεια της ουλής, το κάλυμμα του τραύματος στο οποίο βρίσκονταν τα κερατινοκύτταρα και τον τύπο της λείανσης, ο επίδεσμος απορρίφθηκε εντός 7 έως 12 ημερών.

Η μέθοδος συνδυασμένης θεραπείας υποτροφικών ουλών με χειρουργική δερμοαπόξεση με επακόλουθη μεταμόσχευση του "δερματικού ισοδύναμου" και κερατινοκυττάρων με τη μορφή πολυστρωματικού στρώματος που αναπτύσσεται σε ειδικά επιθέματα τραυμάτων ή με τη μορφή εναιωρήματος στην κοιλότητα της ουλής επιτρέπει την επίτευξη σημαντικά καλύτερων, αισθητικά αποδεκτών αποτελεσμάτων με μείωση ή πλήρη εξαφάνιση του (-) ιστού. Το δερματικό ισοδύναμο σχηματίζει τον ιστό του ασθενούς (χόριο), ο ουλώδης ιστός παραμένει κάτω από τον νεοσχηματισμένο ιστό. Το MPC δημιουργεί μια επιδερμίδα φυσιολογικού πάχους και λειτουργικής δραστηριότητας, λόγω της οποίας η γενική εμφάνιση της ουλής τείνει να βελτιώνεται σημαντικά σε διάστημα αρκετών μηνών.

Αυτή η τακτική αντιμετώπισης υποτροφικών ουλών μπορεί να χαρακτηριστεί ως η βέλτιστη για την επίλυση αυτού του προβλήματος σήμερα. Ωστόσο, η παραλλαγή DE που χρησιμοποιήσαμε με τη μορφή κολλαγόνου γέλης με ινοβλάστες εμβολιασμένους σε αυτήν δεν είναι πολύ βολική στην εργασία. Η DE για την εργασία με υποτροφικές ουλές θα πρέπει αρχικά να είναι παχύτερη, ώστε να μπορεί να τοποθετηθεί στην κοιλότητα της ουλής, να κατανεμηθεί σε αυτήν και στη συνέχεια να εφαρμοστεί ένα κάλυμμα τραύματος με κερατινοκύτταρα από πάνω. Έτσι, μπορούμε να πούμε ότι αυτή η κατεύθυνση στην εργασία με υποτροφικές ουλές είναι μόνο σκιαγραφημένη, αλλά οι προβλέψεις για την περαιτέρω ανάπτυξη και μελέτη της είναι πολύ αισιόδοξες.

Η πολυπλοκότητα και το υψηλό κόστος απόκτησης πολυστρωματικών στρωμάτων κερατινοκυττάρων ως θεραπευτικού υλικού ώθησαν την ανάγκη αναζήτησης άλλων επιλογών για κυτταρικές συνθέσεις. Μεγάλο ενδιαφέρον παρουσιάζει για τους ερευνητές η καλλιέργεια ινοβλαστών, οι οποίοι, όταν μεταμοσχεύονται σε επιφάνειες τραυμάτων, δίνουν ένα αποτέλεσμα που είναι από πολλές απόψεις παρόμοιο με τα αποτελέσματα της μεταμόσχευσης κερατινοκυττάρων, αλλά είναι ένα πολύ απλούστερο και φθηνότερο κυτταρικό υλικό. Στις μελέτες μας, αντιμετωπίσαμε αρκετούς ασθενείς με υποτροφικές ουλές με μεσοθεραπευτική ένεση εναιωρήματος ινοβλαστών κάτω από τις ουλές.

Ένα εναιώρημα ινοβλαστών σε ένα μέσο ανάπτυξης με 1,5-2 εκατομμύρια κύτταρα ανά 1 ml εισήχθη κάτω από τις ουλές χρησιμοποιώντας μεσοθεραπευτικές τεχνικές (μικροβλατιδώδεις, διηθητικές). Ο αριθμός των συνεδριών θεραπείας ήταν από 4 έως 10, ανάλογα με την ηλικία της ουλής, την ηλικία του ασθενούς και το βάθος του ελαττώματος. Το διάστημα μεταξύ των συνεδριών ήταν 7-10 ημέρες. Κατά κανόνα, η εισαγωγή ενός εναιωρήματος αυτόλογων και αλλογενών ινοβλαστών συνοδευόταν από μια μικρή, παροδική αγγειακή αντίδραση.

Ως αποτέλεσμα κλινικών μελετών, αποκαλύφθηκε ότι υπό την επίδραση μεταμοσχευμένων MPC, η διάρκεια της φλεγμονώδους αντίδρασης στο δέρμα και στις ουλές μετά από χειρουργική δερμοαπόξεση μειώνεται και η επιθηλιοποίηση των επιφανειών του τραύματος επιταχύνεται κατά μέσο όρο 3-4 ημέρες.

Όταν εργάζεστε με νορμοτροφικές και υπερτροφικές ουλές, η επιτάχυνση της επούλωσης των μετεγχειρητικών διαβρώσεων είναι ύψιστης σημασίας, καθώς εκεί βρίσκεται η δυνατότητα επίτευξης βέλτιστου θεραπευτικού αποτελέσματος.

Η μεταμόσχευση του δερματικού ισοδύναμου οδήγησε στην πλήρωση (-) ιστού των υποτροφικών ουλών, στην εξομάλυνση της ανάγλυφής τους, στην εξομάλυνση με το περιβάλλον δέρμα, με αποτέλεσμα η περιοχή των ουλών να γίνεται σημαντικά μικρότερη.

Η εισαγωγή ενός εναιωρήματος ινοβλαστών σε υποτροφικές ουλές οδήγησε επίσης σε εξομάλυνση της ανακούφισης του δέρματος και μείωση της περιοχής των ουλών.

Σε όλες τις περιπτώσεις μεταμόσχευσης κυττάρων, παρατηρήθηκε μια επακόλουθη βελτίωση, όταν κατά τη διάρκεια αρκετών μηνών υπήρξε βελτίωση στην αισθητική εμφάνιση των ουλών, οι οποίες έτειναν να μετασχηματίζονται σε μια δερματική δομή.

Όλα τα αποτελέσματα που παρατηρήσαμε σχετίζονται με την εφαρμογή του βιοδιεγερτικού δυναμικού των μεταμοσχευμένων κυττάρων. Μας φαίνεται ότι ο αριθμός των κυτταρικών στρωμάτων στα μοσχεύματα είναι συνήθως 10-30% υψηλότερος. Κατά συνέπεια, το συνολικό κυτταρικό δυναμικό ανά μονάδα επιφάνειας είναι ήδη 10-30% υψηλότερο από το κανονικό. Επιπλέον, τα καλύτερα αποτελέσματα στη μεταμόσχευση κερατινοκυττάρων και ινοβλαστών ελήφθησαν κατά τη μεταμόσχευση κυτταρικού υλικού από νέους και υγιείς ανθρώπους. Αυτό το γεγονός, παρεμπιπτόντως, συνηγορεί υπέρ της χρήσης μιας αλλογενούς καλλιέργειας που λαμβάνεται από νέους και υγιείς δότες. Το βιοενεργειακό και πληροφοριακό δυναμικό μιας τέτοιας καλλιέργειας μεταφέρεται στα ίδια τα κύτταρα των ληπτών, μερικές φορές όχι πολύ νεαρά, λόγω του οποίου βελτιώνεται η «ποιότητα» των ιστών και κυττάρων των ληπτών.

Έτσι, η χρήση καλλιέργειας κερατινοκυττάρων και ινοβλαστών επιτρέπει:

• Επιτάχυνση της επιθηλιοποίησης των ουλών μετά από δερμοαπόξεση.
• Μειώστε την ορατότητα των ουλών όχι μόνο ισοπεδώνοντας την επιφάνειά τους με την επιφάνεια του περιβάλλοντος δέρματος, αλλά και σχηματίζοντας μια πλήρη επιδερμίδα πάνω τους.
• Βελτιώνουν τα αποτελέσματα της χειρουργικής δερμοαπόξεσης λόγω της επίδρασης των κυτοκινών των μεταμοσχευμένων κυττάρων στην ουλή, η οποία τελικά τείνει να μετασχηματιστεί σε μια δερματοειδή δομή.
• Για την επίτευξη αισθητικά σημαντικά πιο αποδεκτών αποτελεσμάτων θεραπείας ασθενών με νορμοτροφικές, υποτροφικές, υπερτροφικές, ατροφικές ουλές και ραβδώσεις.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ], [ 8 ], [ 9 ], [ 10 ], [ 11 ]